泵管是蠕动泵的重要部件之一，而最终用户却经常错选管材，致使其不适于所需应用场合。有些用户甚至用普通管道来代替蠕动泵管，以致造成灾难性后果。随着市场上泵管种类的日益增多，也使泵管挑选难度增大。 蠕动泵因其无污染泵送特性及所需较少维护而日趋普及。然而，当设计或购买蠕动泵系统时，不少工程师却常会忽略一个重要的部件----蠕动泵的泵管。 化学相容性: 管材须与需泵送流体具有化学相容性，才能具有良好的泵送性能及安全性能。随着市场上管材的日益增多----有些蠕动泵机型的可用管材多达15种----所以用户总能找到一种合适的管材与特定流体具有化学相容性。许多泵管供应商会提供化学相容性表。但工程师们须注意，应使用专为泵管制定的化学相容性表，而不是为普通管道制定的化学相容性表。因为普通管道与化学物质只有一般性接触，而蠕动泵泵管是在压力条件下与化学流体接触，所以，普通管道的化学相容性级别与蠕动泵泵管的化学相容性级别不能等同。因此，应只参考泵管，而不是一般管道与相关物质的化学相容性级别，否则会使泵管失效或破损裂渗漏，以致造成泵的损坏或危险性事故。 最终用户在参阅化学相容性表时应将溶液的每一种成分，而不仅是主要成分拿来与欲使用的管材进行相容性核查。某些酸液或溶剂在与泵管接触数小时或数日后，哪怕只是微量，也会对泵管造成足够的破坏。最终用户应核查溶液中的每一种化学物质，以确保其都能与所选择的泵管相容。 另请牢记：泵管的抗化学能力随着温度增高而降低。有些化学物质虽然在室温下对泵管不构成影响，但当温度升高到一定程度时，就会对泵管造成损害。在化学相容性表中一定要注明特定的环境条件限定，特别是温度限定，才可用来确定化学相容性。 如果某一化学物质未被列入化学相容性表中，或如果某工厂的运行环境条件与表中规定的条件差别太大，可采用浸泡试验来获得更可靠的信息。在确定化学兼容性时，若没有其它信息可参考，则可采用此法。 浸泡试验步骤如下：取一小段泵管，对其称重量、测直径和长度。然后将泵管放入一个装有相关化学物质的封闭容器中浸泡48小时。将此管取出洗净晾干，称重量和测尺寸，记录下前后两次测量的变化量。还应检查泵管是否出现软化或脆化迹象，这类迹象表明化学物质已对泵管构成侵害。预选出一种或数种管材后，即可进行泵送试验。应将每种候选泵管试样放入工厂实际环境条件下进行试运行，并密切观察测试结果。如果泵管在试运行后未出现退色、肿胀、裂纹、丧失流动性、或其它恶化迹象，则证明其与该流体相容。 请记住，为挑选合适的管材，不论是查阅相容性表，还是做物理试验，还是两种方式并用，最终责任都应由最终用户自行承担。细致的分析和测试才能确保正确的测试结果，从而避免泵的损坏及确保人身、财产安全。 不同管材与溶液之间，化学相容性相差很大。但也有一些材质对大多数化学物质都有超强的抵抗能力。例如，Viton氟橡胶泵管可抵抗多种无机化学物质，甚至一些有机化学物质。又如，聚四氟乙烯（PTFE）泵管几乎可与所有化学物质相容。但聚四氟乙烯泵管是一种刚性管道，需采用一种专用泵头。在需泵送多种腐蚀性化学物质的场合中，能抗多种化学物质的管材应该是最佳选择。 压力 高压泵管的出现使得蠕动泵的应用范围扩展至前所未有的应用领域，包括过滤。 一个流体输送系统的压力源可以有所不同。当推动流体穿过一个过滤器、或推动流体通过一个流量仪或阀门、或泵送流体进入一个加压反应容器时，就会产生背压。用户在选择管材前，应首先确信已经弄清了系统中所有的压力源，并已获得系统总压力的实测值。用户在为蠕动泵挑选泵管时，应确保系统中的压力不要超过泵管的推荐工作压力。如果压力过高，泵管就会鼓胀，与泵头配合不良，从而导致过快磨损和失效。系统压力大大超过泵管的承受能力时，甚至会使泵管爆裂，喷出流体，危及安全。选定一种管材后，使用时应确保将压力维持在制造厂家推荐的压力范围之内。如果该系统超过最大工作压力，可安装一种简单的压力缓释阀或压力开关，以防过量压力的蓄积。压力缓释阀的作用是：当系统压力超过设定值时，便向大气中排气，使系统压力降到安全水平。也可使用一种复杂一些的压力开关，当压力值超过设定值时，其会通过一个继电器来关闭设备或鸣响报警装置。当系统压力超过安全线时，上述两种方式均有利于安全。温度 泵管的工作温度范围是另一个需考虑的重要因素。有些管材如硅橡胶具有较宽温度承受范围，对高温、低温过程均适宜；而有些管材如Tygonˉ 及 C-Flexˉ则只适于某一较小的温度范围。最终用户在选择管材前，应先弄清系统中的最高温度和最低温度，然后确保所选泵管安全工作于此温度区间。 在需逐渐提高温度的应用场合，最终用户应考虑温度对泵管抗化学能力及承压能力的影响。温度增高时，泵管的承压能力会降低。 尺寸 随着泵头中每一个辊子压过泵管，蠕动泵便会泵送一定量的流体，因此泵管的尺寸直接关系到泵送流量，也就是说，对流体输送系统的运行影响很大。泵管是设计优质蠕动泵时需重点考虑的部分。需计算出泵管的最佳尺寸或最佳尺寸范围。这里的尺寸主要指泵管内径和璧厚。内径决定转子每转一圈所泵送流体的量，而璧厚则决定每次碾压后，泵管恢复原始形状的能力，这一能力在很大程度上影响着泵管的使用寿命。泵管尺寸相对于泵头尺寸太小，泵头就不能卡牢泵管，泵管就会被拉出泵头；而且泵管尺寸太小，泵头中的辊子就压不住泵管，就会造成泵送流量不足以或完全失效。而如果泵管尺寸太大，多余的管材就会在辊子与泵壳之间或辊子与咬合床之间产生褶皱，导致过快磨损和过早失效。最终用户在选择泵管尺寸时，应遵从制造厂家的建议，以确保系统功能发挥良好。在要求较高精确性的一些应用场合（如化学剂量泵），泵管尺寸的作用就更加突出。尺寸稍有偏差就会导致流量或分配量偏差太大而不合格。虽然有些制造厂家提供的泵管尺寸与推荐尺寸很“接近”，“看上去一样”，但往往还是有差距的。所以为了使泵系统达到最佳性能和工作精度，用户应采用与厂家推荐尺寸完全一致的泵管尺寸。公差 公差即泵管尺寸的允许误差。公差越小，泵管的性能偏差就越小，一致性和重复性就越好。公差越大，泵管的性能便越不稳定。有些泵管的制造公差极小，其尺寸偏差在挤塑成形时就受到严格的控制。制造公差较小的泵管虽稍微贵一些，但比起泵送性能的提高幅度，这点花费还是值得的。 泵管的平均寿命 蠕动泵所面临的条件较为恶劣，所以内在品质较优的管材，尤其是回弹性能较好的管材才会有较长的使用寿命。长远看，管材使用寿命越长，运行成本越低。泵管更换次数越少，维护成本和停机时间越少。泵管出现渗漏和爆裂的可能性也越少。总之，泵管使用寿命越长，泵送总成本就越低。 泵管制造厂家应提供试验数据来证明其所宣称的泵管寿命。有些厂家在其手册（如《Cole-Parmer仪器公司Masterflex泵资料大全》中发布了有关信息。无论如何，工程师在设计一个系统时，应对有关管材的平均寿命有所了解，这样才能帮助最终用户制定预防性维护计划，以便在泵管失效以前就能将其更换。有丰富技术知识的泵管供应商可针对特定应用场合为用户提供有用的信息，以便选出合适的泵管材料。透明度 是否应采用透明管道，首先要看操作员是否需要随时观察管内流体的状况，还要看流体是否对光敏感。如果操作员需要随时观察管内流体、气泡、微粒、污染等情况，则应选用Tygon聚乙烯或硅橡胶等透明管材；而如果溶液不宜曝光，则应选用不透明管材 透气度 对于一些对气体敏感的流体，如易受氧化的流体，或厌氧细胞培养液，用户应考虑管道的透气度因素。总的来说，硅胶管的透气度最高。所以对于不宜于接触气体的流体，应选用透气度较低的管材。法规许可 对于制药行业，法规认证至关重要。在该行业，每一件与最终产品有接触的物品都必须符合专门的标准和准则。为此，许多泵管材料是严格按照法规要求研制出来的。这些法规包括美国药典（USP）、欧洲药典（EP）、美国食品及药物管理局(FDA)、美国农业部(USDA)、及美国国家卫生基金会(NSF)。当然，仅宣称某某材料符合某某法规还是不够的。泵管制造厂家应根据用户要求向用户提供证明该管道符合该法规的证书。这样用户就能提供必要的证书，证明泵系统符合必要的法规许可。 成本 成本几乎是制定每一个项目方案时都需要考虑的因素。正如选择其它部件时一样，用户应对备选泵管的整个使用成本进行评估。例如，某种泵管每英尺价格为2美元，每500小时需更换一次；而另一种泵管每英尺价格为1美元，每100小时需更换一次；则前者的性价比比后者更高。低质泵管突然破裂会导致贵重流体流失或导致泵的损坏，造成高成本的停机时间及大量维修、甚至更换整个泵。所以，最便宜的泵管不一定是最经济的选择。要在品种繁多的泵管市场上挑选出一款理想的泵管咋看起来不大可能。然而，只要仔细研究系统要求、参比有关的技术指标、与具有应用知识和经验的泵管制造商或供应商保持密切沟通，就能选定最适于相关泵系统的泵管。 

迷你离心机故障现象一、开机后转，头不运行：原因分析及解决方案：⒈电源线未插好时只要插好电源线⒉电源线插座无电供应时解决方案确保电源工作正常⒊电源开关未打开时解决方案打开电源开关⒋离心盖未闭合锁紧时只要向下按紧离心盖⒌保险管烧毁时请自行更换或咨询供应商技术人员迷你离心机故障现象二、开机后噪声大，剧烈振动或有异响：原因分析及解决方案：⒈仪器未放置在水平、坚固平台上解决方案将仪器放置到水平、坚固平台上⒉转头未安装水平或到位，或紧定螺钉未锁紧解决方案按4.b安装转头⒊试管未对称分布解决方案将试管等量对称放置⒋试管内液面不等高解决方案放置液面等高试管⒌试管为盖好，部分样品甩出，导致转头不平衡解决方案添加样品至平衡⒍试管质量差，破裂漏液导致转头不平衡解决方案换用合格试管⒎转头老化或局部缺损解决方案立即停止使用，更换新转头⒏多种规格试管混用解决方案换用相同规格试管迷你离心机故障现象三、转头转速偏低或不平稳：原因分析及解决方案：⒈样品重量过大导致负载超重解决方案每个离心管重量不得超过3.0g⒉电机老化解决方案请供应商技术人员维修

实验室离心机离心管种类有多种。1、按材质可分：塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。2、按速度可分：低速离心管和高速离心管。3、按容量可分：微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。4、按离心管口部形状可分：缩口离心管和直口离心管。5、按离心管底部形状可分：圆底离心管、尖底离心管和平底离心管。6、按离心管与盖接合形式可分：摁盖离心管和螺口离心管。7、按用途可分：制备型离心管和分析型离心管。

紫外分析仪分为很多系列，有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列，不同的紫外分析仪有不同的用途。1、在科学实验工作中紫外分析仪是检测许多主要物质如蛋白质、核苷酸等。2、在药物生产和研究中，紫外分析仪可用来检查激素生物碱，维生素等各种 能产生萤光药品的质量，它特别适宜作薄层分析，纸层分析斑点和 检测。3、在染料涂料橡胶、石油等化学行业中，测定各种萤光材料，萤光指示剂及添加剂， 鉴别不同种类的原油和橡胶制品。4、在纺织化学纤维中可以用于测定不同种类的原材料如羊毛、真丝人造纤维、棉花合成纤维，并可检查成品质量。5、在粮油、蔬菜、食品部门可用于检查毒素、食品添加剂，变质的蔬菜、水果、可可豆肪、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖、蛋 00等的质量。6、在公安部门可检查指痕测定、密写字迹等。7、在地质、考古等部门可起到发现各种矿物质、判别文物化石的真伪。

电泳：在直流电场中，带电荷的粒子向带符号相反的电极移动，称为电泳。电泳也是一种分离的方法和技术，就是分离和鉴定混合物中带电粒子（包括离子、高分子多电解质、胶体粒子、病毒颗粒以致活的细胞，如细菌和红细胞等）的技术。 电泳装置：由电泳仪（电源）和电泳槽（混合样品电泳时的支持物）组成。 电泳仪（电源）：为混合样品电泳时提供直流电场。电泳仪可提供恒定电压、恒定电流和恒定功率。 电压分为：高压＞1500V；中压  500-1500V；低压＜500V 电流分为：大电流＞500mA；中电流  100-500 mA；小电流＜100 mA 功率为分：大功率＞200W；中功率  60-200W；小功率＜60W 选择何种规格的电泳仪（电源）视电泳类型及样品分子量大小。 通常高电压电泳适用于分离小分子质量物质，如氨基酸、肽、抗生素等。 恒定功率电源适用于做等电聚焦电泳。 大电流适用于做转移电泳。 低电压电泳适用于琼脂糖凝胶电泳法分离大分子核酸。 使用最多的是中压电泳仪（如DYY-6），适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳，此法普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。 电泳槽：常用的电泳槽有垂直电泳槽（主要用于分离蛋白质）和水平电泳槽（主要用于分离核酸样品）。为蛋白质和核酸的分离而设计的平板电泳仪，通常有水平和垂直平板二类。蛋白质的电聚焦和免疫电泳常采用水平板电泳形式，而蛋白质的其他形式区带电泳电泳则常采用垂直板电泳形式。特别是使用不连续体系冲液进行电泳时，垂直板电泳要比水平板电泳简便得多。实验室普遍使用的一种垂直板电泳（附图）所示。2块平板玻璃，根据电泳仪的大小裁定。其中一块上端开槽口，一般槽口的大小比例是：如果平板玻璃是425px*475px标准平板，那么所开槽口的大小是深50px，长350px。平板玻璃厚度常用3mm。2块平板玻璃之间、左、右、下3边加上垫片（又称隔条）就可组装成一个平板凝胶模。为了防止凝胶溶液渗漏和制成一块厚薄均匀的平板凝胶，必须使用强有力的夹子，将二块平板玻璃夹牢。垫片的厚度决定平板凝胶的厚度，最常用的是1.5mm厚。在平板凝胶膜中，灌浇凝胶溶液至一定高度后，插入加样梳，就可制成加样槽。加样槽体积的大小决定于加样梳齿的大小。因此，利用改变加样梳齿的多少和大小，就可方便地获得需要的加样槽。 水平板型电泳槽是目前进行琼脂糖凝胶电泳使用最普遍的装置。水平板型凝胶通常在一块可安放电泳槽平台的玻璃板或两侧带有挡板的胶模上灌制。如用玻璃板，则灌胶前需用胶带纸或医用胶带将四周贴成一个围墙，以防胶液渗漏。如使用与电泳槽配套购置的制胶模，则只需在灌胶前封住两端。 电泳类型：滤纸电泳、醋酸纤维素膜电泳、淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。 电泳目的：电泳技术广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、酶、多肽、激素类、嘧啶和其他有机化合物甚至无机离子的分离、鉴定、纯化、制备。 电泳技术使用领域：凡涉及到生物科学、生物技术、生物制药、生物工程（遗传工程、细胞工程、蛋白质工程）的高校，如生命科学学院、农学院、医学院，及有科研能力的医院、生物工程公司等都离不开电泳技术。

A. DNA模板：·   尽量使用高质量、纯化后的DNA作为模板·   需要提高保真度时，可使用较高的DNA模板浓度并减少循环数·   模板用量：以50 μl反应体系为例——        人基因组DNA：0.1~1.0 μg        大肠杆菌基因组DNA：10~100 ng        Lambda DNA：0.5~5 ng        质粒或病毒DNA：0.1~10 ngB. 引物设计原则：·  引物长度要满足特异性需要，一般可在18~25个碱基之间；扩增长片段时最好在24~30个碱基之间；·  当引入克隆位点时，引物末端应额外增加3个以上碱基；·  (G+C)%含量应尽量控制在40~60%，两条引物的(G+C)%含量应尽量接近；·  引物中GC碱基分布均匀；·  尽量避免相同碱基连续出现三次以上，3’端应避免使用A或T；·  避免引物内部自身配对形成二级结构；·  正反向引物之间应避免配对碱基，尤其是3’端的三个碱基，否则易生成引物二聚体(Primer dimer)；·  两条引物的解链温度（Tm）值应在42~65℃之间，而且两条引物间最好相差不超过5℃；·  引物Tm值的计算方法：       20 nt以下：Tm = 2℃ x (A + T) + 4℃ x (G + C)       20 nt以上：Tm = 81.5 + 0.41 x (GC%) -600/nt (nt：引物的碱基数)·  引物用量：·  0.1~1.0 μM，通常可以0.2 μM起始，根据体系不同调整用量；·  使用简并引物、随机引物时，需增加引物总量以弥补产量损失；但随着引物量加大，特异性将降低；·  模板较大较多，或结构较复杂(如人基因组DNA)时，需减少引物用量以提高特异性；·  模板较小较少(如质粒模板)时，增加引物用量可提高产量。C. 核苷酸（dNTPs）：·  常规dNTPs浓度为每种核苷酸0.1~1.0 mM，通常可以0.2 mM起始，根据体系不同调整用量；·  低浓度（0.05~0.1 mM）可增加保真性，但会降低产量；·  高浓度提高产量，尤其是长片段PCR，但会降低保真度。D. 镁离子浓度·   对于Taq DNA聚合酶，镁离子的最佳浓度为1.5~2.0 mM；·   最佳浓度取决于模板、缓冲液、DNA和dNTPs（每一种都有可能鳌合镁离子）；·   镁离子浓度过低，会降低产量；·   镁离子浓度过高，会增加非特异性PCR产物；·   优化镁离子浓度时，通常以0.5 mM梯度递增，最高到4 mM。E. Taq DNA 聚合酶浓度·   推荐使用浓度为 1~2.5 U/50 μl反应体系。F. 起始反应·   在冰上配制反应体系；·   最后加聚合酶；·   将热循环仪预热至变性温度(94℃)后，放入PCR管，立即进行反应。G. 变性温度与时间·   通常于94℃初始变性，使DNA双链完全打开；·   变性时间通常为15~30秒；·   避免长时间或高温度孵育；·   高GC含量模板可提高变性温度至98℃。H. 退火温度与时间·   通常情况下，退火温度为引物Tm值减5℃，在55~60℃之间；·   提高退火温度有利于减少非特异性条带；·   常规退火时间为15~30秒。I. 延伸温度与时间·   延伸反应通常在72℃下进行。·   Taq酶的延伸时间大约为15~30秒/kb DNA；·    产物小于1 kb时，建议延伸时间为30~60秒；·    产物大于3 kb或反应超过30个循环时，可能需要更长的延伸时间。 典型的循环条件：预变形94℃ 2 分钟94℃ 30秒，55℃ 30秒，72℃ 1分钟/1 kb，25~30个循环72℃ 5分钟 注：上述反应条件适用于普通Taq DNA聚合酶催化的PCR反应。当DNA模板富含GC、具有复杂二级结构、低浓度或产物>5 kb时可能需要改变相应条件。

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。1.前处理：分离纯化某种蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态（如果做不到呢？比如蛋白以包涵体形式存在），不丢失生物活性。为此，动物材料应先提出结缔组织和脂肪组织，种子材料应先去壳甚至去种皮以免手单宁等物质的污染，油料种子最好先用低沸点（为什么呢）的有机溶剂如乙醚等脱脂。然后根据不同的情况，选择适当的方法，将组织和细胞破碎。动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆机破碎或用超声波处理破碎。植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的细胞壁，一般需要用石英砂或玻璃粉和适当的提取液一起研磨的方法或用纤维素酶处理也能达到目的。细菌细胞的破碎比较麻烦，因为整个细菌细胞壁的骨架实际上是一个借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子，非常坚韧。破碎细菌细胞壁的常用方法有超声波破碎，与砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理等。组织和细胞破碎后，选择适当的缓冲液把所要的蛋白提取出来。细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除去。如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分，如细胞核、染色体、核糖体或可溶性细胞质等，则可利用差速离心的方法将它们分开，收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器结合的，则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚，然后用适当介质提取。2. 粗分级分离：当蛋白质提取液（有时还杂有核酸、多糖之类）获得后，选用一套适当的方法，将所要的蛋白与其他杂蛋白分离开来。一般这一步的分离用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大，既能除去大量杂质，又能浓缩蛋白溶液。有些蛋白提取液体积较大，又不适于用沉淀或盐析法浓缩，则可采用超过滤、凝胶过滤、冷冻真空干燥或其他方法进行浓缩。3.细分级分离：样品经粗分级分离以后，一般体积较小，杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化，一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳法，包括区带电泳、等电点聚焦等作为最后的纯化步骤。用于细分级分离的方法一般规模较小，但分辨率很高。结晶是蛋白质分离纯化的最后步骤。尽管结晶过程并不能保证蛋白一定是均一的，但是只有某种蛋白在溶液中数量上占有优势时才能形成结晶。结晶过程本身也伴随着一定程度的纯化，而重结晶又可除去少量夹杂的蛋白。由于结晶过程中从未发现过变性蛋白，因此蛋白的结晶不仅是纯度的一个标志，也是断定制品处于天然状态的有力指标。蛋白质分离纯化的方法：一、根据分子大小不同的纯化方法1、透析和超过滤2、密度梯度离心3、凝胶过滤二、利用溶解度差别的纯化方法1、等电点沉淀和pH控制2、蛋白质的盐析和盐溶3、有机溶剂分级分离法4、温度对蛋白质浓度的影响三、根据电荷不同的纯化方法1、电泳2、聚丙烯酰胺凝胶电泳3、毛细管电泳4、等电聚焦5、层析聚焦6、离子交换层析四、利用选择性吸附的纯化方法1、羟磷石灰层析2、疏水作用层析五、利用配体的特异生物学亲和力的纯化方法亲和层析（affinity chromatography）：a.凝集素亲和层析b.免疫亲和层析c.金属螯合层析d.染料配体层析e.共价层析六、高效液相层析合快速蛋白质液相层析

 核酸蛋白检测仪采用日本进口R212光电倍增管，LED数字输出2个OD值表,使用者可直接读出光密度A值；波长准确度和重复性高、单色性好、定性、定量分析中能直接记录各个峰面积的相对峰面值，并能计算质量相对的含量；配上层析柱、恒流泵、部分收集器等，即组成一套完整的液相色谱分离分析系统。  核酸蛋白检测仪参数：1.量程范围：0-100%T、0-2.0A、0-1.0A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A。2.数显模式：固定A量程读数（0-2.0A）；可变A量程读数（0-2.0A、0-1.0A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A）。（HD-21C-B型）3.输出方式：主机LED数字输出2个OD值表。4.流式样品池：容积100微升、光程3毫米。 微量样品池：容积30微升、光程10毫米。5.记录仪输出：10mV； 积分仪输出：0.1A/mV。6.量程在0.05A档时：噪音≦0.002A；

电子天平具有结构简单、方便实用、称量速度快等特点，目前广泛应用于企业和实验室，用来测定物体的质量。目前国内使用的电子天平种类繁多，无论是国产的，还是进口的;无论是大称量的，还是小称量的;无论是精度高的，还是精度低的，其基本构造原理都是相同的。怎样正确安装、使用和维护电子天平，并获得正确的称量结果，是保证产品质量的有效方法之一。在现场检定工作中发现，许多企业的天平没有按要求安装、使用和维护，致使测量数据偏差很大，超过检定规程要求的最大允许误差。为使企业从事天平使用的工作人员获得准确的称量结果，延长天平的使用年限，现将正确安装、使用和维护电子天平需要注意的问题浅析如下：1、对电子天平安装室的环境要求(1)房间应避免阳光直射，最好选择阴面房间或采用遮光办法。(2)应远离震源，如铁路、公路、震动机等震动机械，无法避免时应采取防震措施。(3)应远离热源和高强电磁场等环境。(4)工作室内温度应恒定，以20’C左右为佳。(5)工作室内的相对湿度应在45%～75%之间为最佳。(6)工作室内应清洁干净，避免气流的影响。(7)工作室内应无腐蚀性气体的影响。(8)工作台应牢固可靠。2.安装电子天平前的清洁要求(1)首先要用毛刷或鹿皮等除去浮土等物。(2)称量室或靠近磁钢处要用潮湿的绸布等除尘，不要让尘土和脏物落人磁钢中，以造成天平的故障。(3)用潮湿的绒布等将天平及部件擦拭干净(不宜使用溶剂)。(4)用干净的鹿皮或绸布等将天平及其部件擦拭干净，确保天平的干净。3.安装电子天平的主要步骤(1)选择合格的安装室并有合格的安装台。(2)拆去电子天平外包装，如木箱或纸箱，并将外包装及防震物品收藏好，以备再用。(3)清点天平主机及零部件是否齐全，外观是否良好。(4)对天平主机及零部件进行除尘和清洁工作。(5)安装天平主机，并通过调整天平后底部的水平调整脚，将天平调整至水平状态(可观察天平称量室内的水平装置)。(6)将天平的秤圈、秤盘等活动部件安装到位，有些秤盘需要旋转才能固定好。(7)松开运输固定螺丝或键钮等止动装置(有些电子天平没有此装置)。(8)将电子天平的外接电源选择键钮调至当地供电电压档上。(9)把外接电源、插销插入外接电源插座内，并打开电子天平的电源开关，观察天平的显示是否正常，如正常显示就按说明书的要求进行预热。4、电子天平操作前的注意事项(1)电子天平选择的电压档，应与使用处的外接电源电压相符。(2)电子天平应处于水平状态。(3)电子天平应按说明书的要求进行预热。(4)称量易挥发和具有腐蚀性的物品时，要盛放在密闭的容器内，以免腐蚀和损坏电子天平。(5)天平室内温湿度应恒定，温度应在20"C，湿度亦在50%左右。(6)对天平进行校正，使其达到最佳状态。5、操作电子天平的主要步骤(1)接通电源并预热使天平处于备用状态。(2)打开天平开关(按操纵杆或开关键)，使天平处于零位，否则按去皮键。(3)放上器皿，读取数值并记录，用手按去皮键清零，使天平重新显示为零。(4)在器皿内加人样品至显示所需重量时为止，记录读数，如有打印机可按打印键完成。(5)将器皿连同样品一起拿出。(6)按天平去皮键清零，以备再用。6、正确维护电子天平应注意的问题(1)经常保持天平室内的环境卫生，更要保持天平称量室的清洁，一旦物品撒落应及时小心清除干净。(2)经常对电子天平进行自校或定期外校，保证天平灵敏度等处于最佳状态。(3)长期不用天平时，应收藏好。(4)如果电子天平出现故障，应及时检修，不可带病工作。(5)操作天平不可过载使用，以免损坏天平。综上所述，从事天平使用的工作人员，只要考虑和做到以上几个方面，方可有效地提高称量准确度，延长天平的使用年限，保证产品质量。

蠕动泵的原理简介： 蠕动泵由于输出的流量非常稳定因此又叫恒流泵，由于蠕动泵是靠挤压软管而达到泵送流体的功能的因此又叫软管泵。蠕动泵的机械原理十分简单。它是由转轮挤压着泵管并转动从而推动管内的流体向前移动从而产生流体流动的，就象用两根手指夹挤一跟充满液体的软管一样，随着手指的移动，管内形成负压，液体随之流动。蠕动泵、恒流泵和软管泵的特点：1、洁清无污染：流体只通过和接触蠕动泵软管。2、精度高：恒流、重现精度高达0.5%，流量可精确调节。3、低剪切力：是输送剪切敏感，侵蚀性强流体的理想工具。4、 耐腐蚀能力：可以输送各种流体、如有机溶机、腐蚀性液体。5、可空转、干运转：也可以输送空气或气液固三相混合输送。6、具备自吸能力：可以自吸，无需灌泵，无需排空。7、具务截止阀功能、不会虹吸、无密封件、有截止阀和单向阀功能。 8、可双向输送功能：改泵泵转轮的方向就可以实现反抽和回吸功能。9、维护简单：只需更换蠕动泵软管，无阀门和密封件的更换。10、可以耐受较高的温度：蠕动泵可以连续输送80摄氏度的液体。 如何选择蠕动泵、恒流泵和软管泵：完整的蠕动泵系统由以下三部分组成：蠕动泵头+蠕动泵管+驱动装置第一步：确定应用需求。A,需要多大的流量？B,需要泵送什么化学流体？C,泵送中的要求：如粘度、背压、剪切、含固。第二步：根据流量选择泵型A,插电即用的成套整泵。B,自己装配到设备使用的散件。C,仅需要泵头。 第三步：选择泵头型号及泵管A,根据流量大学及运行时间选择泵头及管径大小。B,根据化学流体选择泵头和泵管材质。

电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。　 电泳过程必须在一种支持介质中进行。Tiselius等在1937年进行的自由界面电泳没有固定支持介质，所以扩散和对流都比较强，影响分离效果。于是出现了固定支持介质的电泳，样品在固定的介质中进行电泳过程，减少了扩散和对流等干扰作用。最初的支持介质是滤纸和醋酸纤维素膜，目前这些介质在实验室已经应用得较少。在很长一段时间里，小分子物质如氨基酸、多肽、糖等通常用滤纸或纤维素、硅胶薄层平板为介质的电泳进行分离、分析，但目前则一般使用更灵敏的技术如HPLC等来进行分析。这些介质适合于分离小分子物质，操作简单、方便。但对于复杂的生物大分子则分离效果较差。凝胶作为支持介质的引入大大促进了电泳技术的发展，使电泳技术成为分析蛋白质、核酸等生物大分子的重要手段之一。最初使用的凝胶是淀粉凝胶，但目前使用得最多的是琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。蛋白质电泳主要使用聚丙烯酰胺凝胶。　 电泳装置主要包括两个部分：电源和电泳槽。电源提供直流电，在电泳槽中产生电场，驱动带电分子的迁移。电泳槽可以分为水平式和垂直式两类。垂直板式电泳是较为常见的一种，常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质的分离。电泳槽中间是夹在一起的两块玻璃板，玻璃板两边由塑料条隔开，在玻璃平板中间制备电泳凝胶，凝胶的大小通常是12cm 14 cm，厚度为1mm～2? mm，近年来新研制的电泳槽，胶面更小、更薄，以节省试剂和缩短电泳时间。制胶时在凝胶溶液中放一个塑料梳子，在胶聚合后移去，形成上样品的凹槽。水平式电泳，凝胶铺在水平的玻璃或塑料板上，用一薄层湿滤纸连接凝胶和电泳缓冲液，或将凝胶直接浸入缓冲液中。由于pH值的改变会引起带电分子电荷的改变，进而影响其电泳迁移的速度，所以电泳过程应在适当的缓冲液中进行的，缓冲液可以保持待分离物的带电性质的稳定。　 为了更好的了解带电分子在电泳过程中是如何被分离的，下面简单介绍一下电泳的基本原理。在两个平行电极上加一定的电压（V），就会在电极中间产生电场强度（E），L是电极间距离。　 在稀溶液中，电场对带电分子的作用力（F），等于所带净电荷与电场强度的乘积。这个作用力使得带电分子向其电荷相反的电极方向移动。在移动过程中，分子会受到介质粘滞力的阻碍。粘滞力（F’）的大小与分子大小、形状、电泳介质孔径大小以及缓冲液粘度等有关，并与带电分子的移动速度成正比，对于球状分子，F’的大小服从Stokes定律，即：F’=6πrηυ式中r是球状分子的半径，η是缓冲液粘度，υ是电泳速度(υ= d / t，单位时间粒子运动的距离，cm / s )。当带电分子匀速移动时： F = F’，q?E = 6πrηυ由此可以看出，迁移率与带电分子所带净电荷成正比，与分子的大小和缓冲液的粘度成反比。用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量时，实际使用的是相对迁移率mR。带电分子由于各自的电荷和形状大小不同，因而在电泳过程中具有不同的迁移速度，形成了依次排列的不同区带而被分开。即使两个分子具有相似的电荷，如果它们的分子大小不同，由于它们所受的阻力不同，因此迁移速度也不同，在电泳过程中就可以被分离。有些类型的电泳几乎完全依赖于分子所带的电荷不同进行分离，如等电聚焦电泳；而有些类型的电泳则主要依靠分子大小的不同即电泳过程中产生的阻力不同而得到分离，如SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。分离后的样品通过各种方法的染色，或者如果样品有放射性标记，则可以通过放射性自显影等方法进行检测。

凝胶成像系统是，样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样，以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析，就可以确定它的成份和性质。     样品对投射或者反射光有部分的吸收，从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度，通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用最新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀，最大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。     凝胶成像使用方法：     第一： 打开电脑，启动凝胶分析软件，进进用户界面。     第二： 打开采集凝胶成像图像的暗箱装置电源开关，放进凝胶，打开紫外光源或白光光源，将采集装置与电脑上采集卡相连，然后选择“文件”菜单中的“图像采集”或工具栏的“图像采集”按钮，出现图像窗口：“开始采集”、“停止采集”、“采集图像”等。假如图像不清楚，可以调节暗箱上的变焦镜，使之清楚。可直接将图像保存起来，也可通过“图像处理”对图像进行旋转、裁剪、滤波、调节对比度……方面的处理。     第三： 对读进的电泳凝胶图像，可以启动电泳凝胶分析系统。在“功能选择”菜单中选择“电泳凝胶”或在工具栏上的“电泳凝胶”工具，将出现泳道分析工具栏，并在“图像显示”子窗口中出现一个红色的矩形框。还可进进“条带分析”系统，对条带 进行编号，对二条以上的条带进行比较。      第四： 采集图像结束后，封闭暗箱电源开关，从暗箱中取出凝胶，并将玻璃板清洗干净。

（一）根据配体特异性的分离方法－亲和色谱法亲和层析法（aflinity chromatography）是分离蛋白质的一种极为有效的方法，它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来，而且纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质与另一种称为配体（Ligand）的分子能特异而非共价地结合。其基本原理：蛋白质在组织或细胞中是以复杂的混合物形式存在，每种类型的细胞都含有上千种不同的蛋白质，因此蛋白质的分离（Separation），提纯（Purification）和鉴定（Characterization）是生物化学中的重要的一部分，至今还没的单独或一套现成的方法能移把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白质中提取出来，因此往往采取几种方法联合使用。（二）根据蛋白质分子大小的差别的分离方法1、透析与超滤透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法是利用高压力或离心力，强使水和其他小的溶质分子通过半透膜，而蛋白质留在膜上，可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。2、凝胶过滤法也称分子排阻层析或分子筛层析，这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶（Sephadex ged）和琼脂糖凝胶（agarose gel）。（三）根据蛋白质带电性质进行分离蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同，可将其分开。1、电泳法各种蛋白质在同一pH条件下，因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳，这是利用一种两性电解质作为载体，电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度，当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时，到达各自等电点的pH位置就停止，此法可用于分析和制备各种蛋白质。2、离子交换层析法离子交换剂有阳离子交换剂（如：羧甲基纤维素；CM-纤维素）和阴离子交换剂（二乙氨基乙基纤维素；DEAE?FONTCOLOR: black; FONT-SIZE: 14px;">宋体">纤维素），当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时，带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上，随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来。（四）根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子（如硫酸铵的SO4和NH4）有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之“失水”，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。盐析时若溶液pH在蛋白质等电点则效果更好。由于各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同，故盐析所需的盐浓度也不一样，因此调节混合蛋白质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉淀。影响盐析的因素有：（1）温度：除对温度敏感的蛋白质在低温（4度）操作外，一般可在室温中进行。一般温度低蛋白质溶介度降低。但有的蛋白质（如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白）在较高的温度（25度）比0度时溶解度低，更容易盐析。（2）pH值：大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度最低。（3）蛋白质浓度：蛋白质浓度高时，欲分离的蛋白质常常夹杂着其他蛋白质地一起沉淀出来（共沉现象）。因此在盐析前血清要加等量生理盐水稀释，使蛋白质含量在2.5-3.0%。蛋白质盐析常用的中性盐，主要有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等。其中应用最多的硫酸铵，它的优点是温度系数小而溶解度大（25度时饱和溶液为4.1M，即767克/升；0度时饱和溶解度为3.9M，即676克/升），在这一溶解度范围内，许多蛋白质和酶都可以盐析出来；另外硫酸铵分段盐析效果也比其他盐好，不易引起蛋白质变性。硫酸铵溶液的pH常在4.5-5.5之间，当用其他pH值进行盐析时，需用硫酸或氨水调节。蛋白质在用盐析沉淀分离后，需要将蛋白质中的盐除去，常用的办法是透析，即把蛋白质溶液装入秀析袋内（常用的是玻璃纸），用缓冲液进行透析，并不断的更换缓冲液，因透析所需时间较长，所以最好在低温中进行。此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐，所用的时间就比较短。2、等电点沉淀法蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。3、低温有机溶剂沉淀法用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分辨力比盐析高，但蛋白质较易变性，应在低温下进行。

气相色谱仪的进样系统概述气相色谱仪的进样系统的作用是将样品直接或经过特殊处理后引入气相色谱仪的气化室或色谱柱进行分析，根据不同功能可划分为如下几种：　　手动进样系统微量注射器：使用微量注射器抽取一定量的气体或液体样品注入气相色谱仪进行分析的手动进样。广泛适用于热稳定的气体和沸点一般在500℃以下的液体样品的分析。用于气相色谱仪的微量注射器种类繁多，可根据样品性质选用不同的注射器。　　气相色谱仪的进样系统的作用是将样品直接或经过特殊处理后引入气相色谱仪的气化室或色谱柱进行分析，根据不同功能可划分为如下几种：　　1、顶空进样系统顶空进样器主要用于固体、半固体、液体样品基质中挥发性有机化合物的分析，如水中VOCs、茶叶中香气成分、合成高分子材料中残留单体的分析等。　　2、手动进样系统微量注射器：使用微量注射器抽取一定量的气体或液体样品注入　　气相色谱仪进行分析的手动进样。广泛适用于热稳定的气体和沸点一般在500℃以下的液体样品的分析。用于气相色谱仪的微量注射器种类繁多，可根据样品性质选用不同的注射器。 固相微萃取(SPME)进样器：固相微萃取是九十年代发明的一种样品预处理技术，可用于萃取液体或气体基质中的有机物，萃取的样品可手动注入气相色谱仪的气化室进行热解析气化，然后进色谱柱分析。这一技术特别适用于水中有机物的分析。　　3、阀进样系统、气体进样阀　　气体样品采用阀进样不仅定量重复性好，而且可以与环境空气隔离，避免空气对样品的污染。而采用注射器的手动进样很难做到上面这两点。采用阀进样的系统可以进行多柱多阀的组合进行一些特殊分析。气体进样阀的样品定量管体积一般在0.25毫升以上。气相色谱的进样系统概述(色谱资料) 　　液体进样阀 　　液体进样阀一般用于装置中液体样品的在线取样分析，其样品定量环一般是阀芯处体积约0.1-1.0微升的刻槽。　　4、液体自动进样器　　液体自动进样器用于液体样品的进样，可以实现自动化操作，降低人为的进样误差，减少人工操作成本。适用于批量样品的分析。　　5、热解吸系统 　　用于气体样品中挥发性有机化合物的捕集，然后热解吸进气相色谱仪进行分析。 　　6、吹扫捕集系统 　　用于固体、半固体、液体样品基质中挥发性有机化合物的富集和直接进气相色谱仪进行分析。 　　7、热裂解器进样系统 　　配备热裂解器的气相色谱称为热解气相色谱(pyrolysis gas chromatography PGC)，理论上可适用于由于挥发性差依靠气相色谱还不能分离分析的任何有机物(在无氧条件下热分解，其热解产物或碎片一般与母体化合物的结构有关，通常比母体化合物的分子小，适于气相色谱分析)，但目前主要应用于聚合物的分析。 　　通常在气相色谱仪的载气(氦气或氮气)中，无氧条件下，将聚合物试样加热，由于施加到聚合物试样上的热能超过了分子的键能，结果引起化合物分子裂解。分子的碎裂包括以下过程：失去中性小分子，打开聚合物链产生单体单元或裂解成无规的链碎片。聚合物热裂解的机理取决于聚合物的种类，但热解产物的性质和相对产率还与热裂解器的设计和热裂解条件有关。影响特征热裂解碎片产率重现性的关键因素有：终点热解温度、升温时间或升温速率和进样量。　　用于固体和高沸点液体的热解器分为两类：脉冲型和连续型。目前常用的居里点热解器和热丝热解器属于第一类，炉式热解器属于第二类。此外还有一些特殊的热解器。 　　PGC应用于聚合物分析包括合成聚合物和生物聚合物。在合成聚合物领域的主要应用包括指纹鉴定、共聚物或共混物组成的定量分析和结构测定如无规、序列和支化。在生物聚合物领域的应用包括研究细菌、真菌、碳水化合物和蛋白质等。此外PGC在其他很多方面也有应用。上海金鹏分析仪器有限公司 电话： 36162366 手机： 18918199710 13585698333 13764356938传真：021-36162369地址：上海市真陈路1398弄15号 邮编：200444

紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中，在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。    有人说，紫外、可见分光光度计就是一把尺子一个天平，凡是有化验、分析的地方都能用到它。那么，如何评价一台紫外、可见分光光度计的优劣呢？首先，要考察它的外观。试想，一台外型呆板、做工粗糙的仪器，怎么可能是一台先进的仪器呢？然后，我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标：  1光度准确度光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的直接要求，每个用户都必须重视。   2杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。   3光谱带宽指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律，光谱带宽应该是越小越好的，但是如果仪器的光源能量弱，光学传感器的灵敏度低时，光谱带宽小了，也得不到理想的测量结果的。所以，选择和使用仪器时一定注意。 4稳定性 稳定性是使用者最关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠，不稳定更谈不上可靠了。  5噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。  6波长的准确度和重复性仪器的每个值都是在一定的波长下测得的，如果所示的波长和实际波长偏差万里，那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢？可见这个指标的重要性。     总之，这几个指标都是相互独立又相互关联的，每个指标对仪器的使用都有很大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时，多做比较，多做判断，切实找到一个稳定可靠的好帮手。  上海金鹏分析仪器有限公司 电话021-36162366,61425398,60959971    传真：021-36162369  M:13501668369通过ISO9001：2000认证

聚合酶链反应(PolymeraseChainReactionm,PCR)是一项体外基因扩增技术,1985年美国PE公司人类遗传研究室发明了该项技术,Saiki等首先应用于镰状红细胞贫血的产前诊断,但由于操作方法繁琐未能全面推广应用。直到1988年耐热DNA聚合酶(Taq酶)的发现和应用,使PCR技术变得极为简单,才被迅速应用于分子生物学、生物工程、医学、法医学和农学等领域,PCR技术已经作为分子生物学发展道路上一个里程碑，永载史册。(一)PCR技术的基本原理   类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：   ① 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；   ② 模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；  ③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍(Plateau)。 到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。在此同时认识到蛋白质是接受RNA的遗传信息而合成的。    50年代初Zamecnik等在形态学和分离的亚细胞组分实验中已发现微粒体(microsome)是细胞内蛋白质合成的部位；1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分离出tRNA并对它们在合成蛋白质中转运氨基酸的功能提出了假设；1961年Brenner及Gross等观察了在蛋白质合成过程中mRNA与核糖体的结合；1965年Holley首次测出了酵母丙氨酸tRNA的一级结构；特别是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等几组科学家的共同努力破译了RNA上编码合成蛋白质的遗传密码，随后研究表明这套遗传密码在生物界具有通用性，从而认识了蛋白质翻译合成的基本过程。    从分子生物学的发展过程，可以看到在近半个世纪中它是生命科学范围发展最为迅速的一个前沿领域，推动着整个生命科学的发展。至今分子生物学仍在迅速发展中，新成果、新技术不断涌现，但分子生物学的历史还短，积累的资料还不够。例如：在地球上千姿万态的生物携带庞大的生命信息，迄今人类所了解的只是极少的一部分，还未认识核酸、蛋白质组成生命的许多基本规律；又如即使到2005年我们已经获得人类基因组DNA3×109bp的全序列，确定了人的5-10万个基因的一级结构，但是要彻底搞清楚这些基因产物的功能、调控、基因间的相互关系和协调，要理解80%以上不为蛋白质编码的序列的作用等等，都还要经历漫长的研究道路。可以说分子生物学的发展前景光辉灿烂，道路还会艰难曲折。    ④、特异性强 作为引物的寡核苷酸与模板结合的正确性是决定反应产物是否特异的关键。　　⑤、对原始材料质量要求低 含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者总RNA，就可以用做反应起始材料来获取目的产物。（二）PCR技术的应用1、生命科学　　a、人类基因组计划 随着的PCR日臻完善，科学家于2003年在完成的人类基因组“工作框架图”的基础上，经过整理、分类和排列后得到的更加准确、清晰、完整的基因组图谱。这是对人类基因组基本面貌的首次揭示，表明科学家们开始部分“读”出人类生命“天书”所蕴涵的内容。　　b、后基因组计划 人类基因组DNA序列图谱完成后，鉴定基因组多态性及其单倍型以及寻找其在生物和医学应用中重要成为人们关心的热点。以研究基因功能为核心的“后基因组时代”已经来临，大规模的结构基因组、蛋白质组以及药物基因组的研究计划已经成为新的热点。　　c、物种的分类、进化及亲缘关系 可以进行物种进化的保守性分析及物种多态性分析、物种鉴定。2、医药　　a、疾病的诊断和治疗 遗传性疾病：如地中海贫血、镰刀状细胞贫血、凝血因子缺乏等有遗传倾向的疾病，尤其是老年性疾病，如糖尿病、高血脂症、甚至肿瘤中的一部分，均可预测；癌基因的检测和诊断：检测恶性肿瘤的标记物来诊断癌症等疾病；利用基因治疗方法治疗肿瘤性疾病。　　b、致病病原体的检测 检测范围包括细菌、病毒（SARS及禽流感病毒H5N1等）、原虫及寄生虫、霉菌、立克次体、衣原体和支原体等一切微生物。检测的灵敏度和特异性都远高于当前的免疫学方法，所需时间也已达到临床要求，这对于难于培养的病毒（乙肝），细菌（如结核、厌氧菌）和原虫（如梅毒螺旋体）等来说尤为适用。　　c、DNA指纹、个体识别（DNA身份证）、亲子关系鉴别和法医物证 可以用一根头发、一个细胞、一个精子来完成上述工作，这一领域也已发展到骨髓或脏器移植配型。　　d、生物工程制药 许多药物可通过工程菌和细胞来大量生产，如干扰素、白介素、促红细胞生长素等药物。　　e、转基因动物制药及疾病模型 转基因动物与医学及生物医药研究的关系越来越密切。近年来,各种人类疾病转基因动物模型不断建立。如转基因动物在遗传病、心血管疾病、肿瘤、高血压病、病毒性疾病、异种移植、输血医学、药理学研究中的应用；利用转基因动物-乳腺生物反应器生产药物蛋白,好比在动物身上建“药厂”,可以从动物乳汁中源源不断地获得具有稳定生物活性的基因产品。这是一种全新的药物生产模式,具有投资成本低,药物研制周期短和经济效益高等优点。 　　　　　　　　　　　　    f、中药材真伪鉴别　利用DNA分子的特征进行物种鉴别的DNA分子标记鉴别法,与现有的中药鉴别方法相比具有以下主要特点:1)准确性高、重现性好,真实、稳定、可靠;2)不受样品形态的限制,原药材、饮片、粉末乃至含有生药原型的中成药(丸剂、散剂等)均可应用;3)所需检样量少,对珍稀药材及化石标本的鉴定更具应用价值;4)PCR技术的快速、便捷性使得DNA分子标记鉴别法更适宜推广使用。3、农业科学    a、转基因植物 按其功能主要分提高产量、抗病力、抗除草剂、改良品质和发育调节。如:大豆、玉米、马铃薯、番茄等。    b、转基因动物 在农业方面，主要在改良畜禽生产性状,提高畜禽抗病力及利用转基因畜禽生产非常规畜产品。4、环境科学    a、环境生态研究 PCR-FLP技术为环境地球化学提供了一种新的研究方法和实验设计的新的思维方式。此方法具有所需样品量低、快速简便及特征性强等优点,可广泛应用于物质的生物地球化学循环、环境过程的生物作用、生物多样性及有机物源判断等方面的研究。展望未来研究成果,将会在海洋及湖泊沉积物等自然环境中发现更多的、新的微生物种类；将进一步阐明生物作用和物质循环的机理和过程；进一步阐明自然环境中生物大分子的变化机理及其环境效应并找到判断沉积物有机物。    b、环境监测 长期以来检测外环境（水样中的霍乱弧菌、空气中产气荚膜杆菌、海洋中已知病菌及有害生物如藻类等）均用传统的分离培养方法,既繁琐耗时,检出率又低，而用PCR方法能快速、准确地检测外环境致病性细菌盒有害生物。5、考古学及历史事件解读    利用人类短串联重复STR-PCR技术，研究人类种族的遗传多态性，效果非常稳定。目前此技术已广泛用于生物考古、种系发育、民族学、人类学和考古学等各个领域中。 6、卫生安全    a、食品微生物的检测 传统的致病菌检测首先经过长时间的培养，费时费力，应用PCR技术则非常迅速、准确。主要用于：食品致病菌的检测，如肉毒唆菌等；乳酸菌的检测；水中细菌指标测定。    b、转基因食品的检测 目前世界转基因食品已经有100多物种，大多数已经用于食品。转基因食品对人体健康的危害及对生态的影响也日受世界广泛的重视，因此对转基因食品的检测成为控制其泛滥的一种手段。    c、动、植物检疫　灵敏、特异、快速诊断检测方法是我国进出口口岸的门卫，检查出入国门的人员、动、植物（种畜、种籽）等是否携带烈性传染病（艾滋、动物病毒、植物病毒等）病原体，食品、饲料等是否带沙门氏菌等均需要基因诊断手段将这些病菌拒之于国门之外，是提高我国综合国力的必要保证。 本网是专业的生化器材网站，集生产、制造、销售于一体。优势产品有紫外分析仪、核酸蛋白检测仪、凝胶成像分析系统、低压液相色谱分离仪、自动部分收集器、梯度混合器、旋转蒸发器等生物仪器，是国内销售生化器材品种全面，规模庞大的专业企业。上海金鹏分析仪器有限公司电话：021-60959971   61425398   36162366手机： 13764356938  18918199710 13585698333 QQ:842727501，964122960，765695826，  2460311703， 2431022418，170324176传真：021-36162369地址：上海市真陈路1398弄15号 邮编：200444

时间：2015年5月15-18日 地点：国家会展中心（上海） 地址：盈港东路168号(CMEF&ICMD主入口)各个展区分布报到时间：5月13-14日 8:30-18:30报到地点：南大厅入口8米层持主办发快递的“报到函”原件到参展商报到处（南大厅入口8米层）领取胸卡等参展资料。国家会展中心（上海）位于上海市虹桥商务区核心区西部，与虹桥交通枢纽的直线距离仅 1.5 公里，通过地铁与虹桥高铁站、虹桥机场紧密相连。周边高速公路网络四通八达，2小时内可到达长三角各重要城市，交通十分便利。展馆西门附近有地铁2号线徐泾东地铁站。东、南、西、北四门届时均对观众开放。（低碳节能，速度快~） 推荐等级5颗星 2号线徐泾东站4、5、6号出口。周边拥有三条轨道线路2号线，其中2号线直达展馆内部，贯穿了整个上海，由东到西连接2个机场和1个火车站。 铁路上海虹桥站为上车点，选择地铁2号线徐泾东站（1站路）下6号出口，全程步行约1.3公里，总耗时约30分钟 铁路上海站为上车点，在上海火车站乘坐地铁1号线(莘庄方向)，在 人民广场站 下车（3站）站内换乘，地铁2号线(徐泾东方向) 在徐泾东站下（11站），6号出口，全程步行约2公里，总耗时约90分钟 虹桥机场上车从虹桥1号航站楼乘坐地铁10号线(虹桥火车站方向)，在虹桥火车站 下车（2站）乘坐地铁2号线(徐泾东方向)，在 徐泾东站 下车（1站） 6号口出。全程步行约2公里，总耗时约50分钟。推荐选择上海虹桥国际机场为到达机场 浦东国际机场站上车 乘坐地铁2号线东延伸段(广兰路方向), 在广兰路站 下车（8站）乘坐地铁2号线(徐泾东方向)，在徐泾东站下车(21站) 6号口出上海浦东国际机场下机（不建议）（私密舒适~精神爽~但需8点前抵达展馆南门）推荐等级4颗星1、从上海市区到国家会展中心：（1）南部、西南部：通过G60→嘉闵高架南段→盈港东路下，到会展中心1号门，驶入南广场地下停车场最方便（凭车证出入，按规定缴纳停车费），展馆南广场设有地下停车库方便停车，可停放2000辆小型车，现已开通（收费停车场，凭车证出入，数量有限，如有需要速速来约）；（2）北部、东北部：通过中环路-S5-S20-北翟高架路-嘉闵高架北段-崧泽高架到停车场；（3）东部、东南部地区，尽可能避开延安高架A线：通过南、北侧通道绕行，由沪青平立交-迎宾三路地道-申滨南路-申兰路-华翔路-盈港东路立交进停车场。B线：通过沪青平立交-迎宾一路-友乐路-联虹路-迎乐路-仙霞西路地道-申虹路-扬虹路-崧泽立交-蟠龙路下匝道进停车场。2、从长三角到国家会展中心：G60、G2等高速至G15沈海高速—崧泽大道下。                                    CMEF&ICMD的展商请尽量驶入南广场地下停车场（2500个停车位，计时收费），如果地下停车场车位已满，请驶入P3停车场，请走南大厅入口进入CMEF&ICMD展厅车辆停放在展馆指定停车场，如遇临时交通管制或车位已满的情况，现场安保人员将会引导车辆停入外围停车场。       （阿拉~师傅！大虹桥展馆）推荐等级3颗星 （绿色出行你我他~） 推荐等级3颗星直达公交线路：197路，706路，710路，865路，徐泾1路，徐泾2路，徐泾4路，白徐线，青徐线，朱徐线，青凤徐专线1、865路：可驳接地铁上海动物园、漕河泾开发区、锦江乐园站；2、706路：可驳接地铁九亭站；3、776路：可驳接地铁紫藤路、中山公园站。◆ 以下公交线路可换乘地铁：706路：可换乘地铁9号线九亭站865路：可换乘地铁10号线上海动物园站、地铁9号线漕河泾开发区站、地铁5号线 锦江乐园站

一、离心机工作原理     当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。    此外，物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的绝对的。扩散与物质的质量成反比，颗粒越小扩散越严重。而沉降是相对的，有条件的，要受到外力才能运动。沉降与物体重量成正比，颗粒越大沉降越快。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等，它们在溶液中成胶体或半胶体状态，仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的。因为颗粒越小沉降越慢，而扩散现象则越严重。所以需要利用离心机产生强大的离心力，才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。     离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。二、离心机的分类：     离心机的分类方法有三种：按用途分、按转速分和按结构分。    ●按用途分类：分为制备型离心机和制备分析离心机。      制备型离心机：仅供分离浓缩，提纯试样的离心机。      制备分析离心机：不但能分离浓缩、提纯试样，而且可以通过光学系统对试样的沉降过程进行观察、拍照、测量、数字输出、打印自动显示的离心机。    ●按转速分类：分为低速离心机、高速离心机、超速离心机。      低速离心机：转速在10000rpm以内或相对离心力在15000 ×g 以内。      高速离心机：转速在10000∽30000rpm以内或相对离心力在15000∽70000 ×g以内。      超速离心机：转速在30000rpm以上或相对离心力在70000 ×g以上。    ●按结构分类：     一般在高速和低速离心机根据结构和功能进行分类，品种繁多，各厂家命名也无统一标准。可分为台式离心机、多管微量台式离心机、细胞涂片离心机、血液洗涤台式离心机、高速冷冻离心机、大容量低速冷冻离心机、低速冷冻离心机、台式高速冷冻离心机、台式低速自动平衡离心机等。另外国外还有三联式（五联式）高速冷冻离心机，专作连续离心用。 本网是专业的生化器材网站，集生产、制造、销售于一体。优势产品有紫外分析仪、核酸蛋白检测仪、凝胶成像分析系统、低压液相色谱分离仪、自动部分收集器、梯度混合器、旋转蒸发器等生物仪器，是国内销售生化器材品种全面，规模庞大的专业企业。上海金鹏分析仪器有限公司电话：021-60959971   61425398   36162366手机：13764356938 18918199710 13585698333 QQ:842727501，964122960，765695826，  2460311703， 2431022418，170324176传真：021-36162369地址：上海市真陈路1398弄15号 邮编：200444

1）按原理可分为光学检测器（如紫外、荧光、示差折光、蒸发光散射）、热学检测器（如吸附热）、电化学检测器（如极谱、库仑、安培）、电学检测器（电导、介电常数、压电石英频率）、放射性检测器（闪烁计数、电子捕获、氦离子化）以及氢火焰离子化检测器。2）按测量性质可分为通用型和专属型（又称选择性）。通用型检测器测量的是一般物质均具有的性质，它对溶剂和溶质组分均有反应，如示差折光、蒸发光散射检测器。通用型的灵敏度一般比专属型的低。专属型检测器只能检测某些组分的某一性质，如紫外、荧光检测器，它们只对有紫外吸收或荧光发射的组分有响应。3）按检测方式分为浓度型和质量型。浓度型检测器的响应与流动相中组分的浓度有关，质量型检测器的响应与单位时间内通过检测器的组分的量有关。4）检测器还可分为破坏样品和不破坏样品的两种。

一、操作规程      1. 用胶管与冷凝水龙头连接，用真空胶管与真空泵相联。      2. 先将水注入加热槽。最好用纯水，自来水要放置1-2天再用。      3. 调正主机角度：只要松开主机和立柱连结螺钉。主机即可在0-45度之间任意倾斜。      4. 接通冷凝水，接通电源220V/50Hz，与主机连接上蒸发瓶（不要放手），打开真空泵使之达一定真空度松开手。      5. 调正主机高度：按压下位于加热槽底部的压杆，左右调节弧度使之达到合适位置后手离压杆即可达到所需高度。      6. 打开调速开关，绿灯亮，调节其左侧旁的转速旋钮，蒸发瓶开始转动。打开调温开关，绿灯亮，调节其左侧旁的调温旋钮，加热槽开始自动温控加热，旋转蒸发仪进入试运行。温度与真空度一到所要求的范围，即能蒸发溶剂到接受瓶。      7. 蒸发完毕，首先关闭调速开关及调温开关，按压下压杆使主机上升，然后关闭真空泵，并打开冷凝器上方的放空阀，使之与大气相通，取下蒸发瓶，蒸发过程结束。      二、旋转蒸发仪注意事项      1. 玻璃件应轻拿轻放，洗净烘干。      2. 加热槽应先注水后通电，不许无水干烧。      3. 所用磨口旋转蒸发仪安装前需均匀涂少量真空脂。      4. 贵重溶液应先做模拟试验。确认本旋转蒸发仪适用后再转入正常使用。      5. 精确水温用温度计直接测量。      6. 旋转蒸发仪工作结束，关闭开关，拔下电源插头。      尊敬的客户：          您好，我司是一支技术力量雄厚的高素质的开发群体，为广大用户提供高品质产品、完整的解决方案和优质的技术服务公司。主要产品有可见分光光度计、紫外透射仪等。      本企业坚持以诚信立业、以品质守业、以进取兴业的宗旨，以更坚定的步伐不断攀登新的高峰，为民族自动化行业作出贡献，欢迎新老顾客放心选购自己心仪的产品。我们将竭诚为您服务！

一个典型的台式发酵罐包括以下结构：1. 罐体：实验室用的发酵罐的体积一般为几升至几十升，其罐体通常由玻璃构成。2. 探测装置：典型发酵罐的探测装置有：(1) 温度探头：监测培养过程中的温度变化。 (2) 溶氧电极：直接浸在发酵液中，监测发酵液中的溶氧变化。(3) pH电极：直接浸在发酵液中，监测发酵液中pH的变化。3. 溶氧控制系统：(1) 空气流量计：通过调节空气流量的大小来手动调节发酵液中的溶氧水平。(2) 搅拌马达和搅拌联动装置：搅拌马达提供旋转的动力，带动搅拌联动装置转动；后者的叶片搅动发酵液，打散气泡，增加气液的接触界面，从而提高溶氧水平。4. 温度控制系统：包括罐体底部冷却水管和空气出口处的冷凝器上的冷却水管。由于发酵过程中通常会产热，通入冷却水可以维持温度的恒定。5. 酸碱平衡装置：通过蠕动泵可以把酸性或碱性溶液泵入到发酵液中以调节其pH值。6. 其他装置：(1)  接种口：通过接种口往发酵罐中接入种子液，同时也可以在发酵过程中补充营养。(2)  取样口：通过取样口可以从发酵罐中取出一定量的发酵液以供各种检测分析。上海金鹏分析仪器有限公司 www.jp1718.com电话：021-36162366 60959971   61425398  400免费咨询电话：4000-123-925  手机：18201872685 13764356938 18918199710 13585698333 QQ:842727501，964122960，765695826，  2460311703， 2431022418，170324176传真：021-36162369地址：上海市真陈路1398弄15号邮编：200444

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术是基因扩增技术的一次重大革新，是分子生物学发展史中的一个重要里程碑。使用PCR扩增技术，可以将极微量的靶DNA片段特异地扩增上百万倍，大大提高了对DNA分子的分析和检测能力。PCR技术具有敏感度高、特异性强、快速简便等优点，在医学、遗传学、法医学、微生物学、食品检验、卫生检验等众多领域中具有巨大的应用价值和广阔的发展前景。 耐热DNA聚合酶的应用是PCR技术的核心。根据是否具有3’→5’端外切酶活性，耐热DNA聚合酶通常分为无校读活性和有校读活性两类。无校读活性的DNA聚合酶（以Taq 酶为代表）具有较高的扩增效率，但由于缺乏校读活性，容易发生碱基错配，故产物中点突变较多。Taq DNA聚合酶还具有末端转移酶活性，可在PCR产物的3’末端非特异地添加碱基，因单个A突出碱基的比例最高，故PCR产物可直接与含有3’末端突出T碱基的载体连接（即TA克隆），方便PCR产物的克隆、扩增和测序。然而，TaqDNA聚合酶在PCR反应第一步升温过程中即可催化错配引物延伸或引物二聚体形成，因而导致非特异性扩增，影响目的片段的合成量。针对这一现象设计的热启动Taq DNA聚合酶，在低温时其聚合酶活性被抑制，通过高温变性，聚合酶的活性恢复，催化特异性结合的引物扩增，因而提高了目的片段的特异性和产量。另一类有校读活性的DNA聚合酶（以Pfu为代表）可选择性地去除错误掺入的dNTP，维持DNA链的正确延伸；然而其扩增效率通常低于Taq DNA聚合酶，特别是对于长片段DNA链的延伸能力较差。基于上述两类酶的特点，可将适量的Taq DNA聚合酶与任意一种有校读活性的DNA聚合酶混合，在适当的反应缓冲液体系中，可获得保真性与扩增性能介于上述两类酶之间的混合酶，用于长片段以及复杂模板的高保真扩增。 PCR实验受诸多因素的影响。优质的商业化耐热DNA聚合酶及其配套缓冲液通常可以满足绝大多数DNA片段扩增的需要。首先应根据模板的性质（基因组、cDNA、质粒等）和目的片段的大小、GC含量、有无二级结构等，选择合适的DNA聚合酶（参见GenStar? PCR产品选择指南）。对于难于扩增的片段，应针对不同的模板、引物，优化反应条件，以获得最佳的扩增效率。 A. 模板用量：以50 μl反应体系为例? 人基因组DNA：0.1~1.0 μg? 大肠杆菌基因组DNA：10~100 ng? λ DNA：0.5~5 ng? 质粒DNA：0.1~10 ng B. 引物设计原则：? 引物长度要满足特异性需要，一般可在18~25个碱基之间；扩增长片段时最好在24~30个碱基之间；? （G+C）%含量应尽量控制在40~60%，两条引物的（G+C）%含量应尽量接近；? 尽量避免相同碱基连续出现三次以上，3’端应避免使用A或T；? 避免引物内部自身配对形成二级结构；? 正反向引物之间应避免配对碱基，尤其是3’端的三个碱基，否则易生成引物二聚体（Primer dimer）；? 两条引物的Tm值应尽量接近，最好相差不超过5oC；? 引物Tm值的计算方法：20 nt以下：Tm = 2x（A + T）+ 4x（G+C）20 nt以上：Tm = 81.5+0.41x（G+C%）-600/nt（nt：引物的碱基数） C. 引物用量：? 0.1~1.0 μM，通常可以0.2 μM起始，根据体系不同调整用量；? 使用简并引物、随机引物时，需增加引物总量以弥补产量损失；但随着引物量加大，特异性将降低；? 模板较大较多，或结构较复杂（如人基因组DNA）时，需减少引物用量以提高特异性；? 模板较小较少（如质粒模板）时，增加引物用量可提高产量。

系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。1.分离系统　　该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。 　　另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。 　　再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。2．进样系统　液相色谱仪一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量       是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。3．输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。

摘要：目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。生物发光是生物发光器在细胞或生物体内发生光能释放反应的过程。本文简要介绍生物发光种类、机理及其在医学、生命科学、食品和环保等领域的应用。 1 种类生物发光主要有2种：①发生化学或生物学反应后产生的光能信号，主要有含荧光素酶的细菌、真菌、昆虫等；②被激发后产生的光能信号，主要有含荧光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。 2 机理2．1荧光素酶荧光素酶是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总称。依来源，可分为萤火虫荧光素酶(1uciferasefrom firefly，FL)和细菌荧光素酶(bacterial lucifer_ase，BL)。FL在Mg、ATP、O2的参与下，催化D-荧光素氧化脱羧，产生激活态氧化荧光素，并放出光子，产生550～580nm的荧光。BL以脂肪醛为底物，在还原型黄素单核苷酸及氧的参与下，使脂肪醛在氧化为脂肪酸的同时放出光子，产生490nm的荧光。 2．2 荧光蛋白荧光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究最清楚。GFP含有的特殊生色团是由蛋白质内部第65-67位丝氨酸、脱氢酪氨酸、甘氨酸自身环化和氧化形成的，用紫外或蓝光激发即能发出肉眼可见的绿色荧光，无需任何底物或辅助因子。 3 应用生物发光作为一种非放射性、非创伤损害性、高灵敏度、实时动态的检测技术，在医学生物学研究、食品及环境检测等领域应用广泛。 3．1在生物医学研究中的应用生物发光可对特定细胞或分子行为进行非侵入性连续动态观察，在生物医学领域被广泛用于致病机理、药物机制、新药筛选评价等研究。 荧光素酶被广泛应用于研究病毒感染、复制、治疗。Luker用荧光素酶基因标记牛痘病毒，免疫1h后即可测得细胞内荧光，荧光的变化量直接反映病毒的复制量。王建东利用荧光素酶基因标记肺癌细胞，并将其接种于严重联合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了稳定表达荧光素酶报告基因的肺癌细胞系及异种移植动物模型，为肺癌进展、转移以及药物敏感性等相关研究奠定了基础。朱红梅用绿色荧光蛋白基因gfp基因标记毒性大肠杆菌(ETEC)，获得了GFP基因表达、遗传稳定的发光标记菌株，为进一步研究ETEC侵染途径及致病机理奠定了基础。通过ETEc标记的GFP荧光可准确、简单、快速反应细菌易位率的变化，为益生素筛选、评价提供依据。 3．2在生物科学研究中的应用3．2．1在分子生物学中的应用荧光素酶基因广泛应用于不同启动子下外源基因表达强度和转录调控研究，尤其对低水平表达的调控方式有较大意义。姚文娟以荧光素酶基因为报告基因，探讨HBV转导后调节序列(HPRE)的功能元件(α，β1，β2)对INF-α作用的影响，HPRE的功能元件β2与INF-α作用最为密切，而α，β1在INF-α应答中作用甚小。荧光素酶还用于研究植物生理节奏，Mmar曾用萤光酶作报告基因研究拟南芥基因表达节律性。Ikawa制作了在肌肉、脾、肾、心脏等器官中表达GFP的转基因小鼠，表明GFP可作为胚胎移植前有效的选择标记，对胚胎进行荧光检测可以有选择地培育转基因小鼠，大大提高转基因动物的制作率，减少了胚胎移植的盲目性。单志新以巨噬细胞移动抑制因子基因为研究对象，利用GFP作报告分子筛选出能有效抑制巨噬细胞移动抑制因子基因表达的siRNA。 3．2．2在细胞生物学中的应用R Paulmurugan应用虫荧光素酶对成肌调节因子和细胞分化抑制因子间强烈的相互作用进行了研究。sung用这种原理把海星荧光素酶进行了剪切与重聚，研究雄激素受体在小鼠中的易位作用。为研究细胞网络、哺乳动物细胞中蛋白质磷酸化提供了一个可靠、快速的方法。GFP融合蛋白可以观察细胞骨架的动态变化、细胞器动力学和内膜系统的运输、信息转导、病毒的运动和大分子的运输等，Cheng用gfp基因修饰烟草花叶病毒并感染烟草，用激光扫描共聚焦显微镜，观测到病毒维管束浸染路径和积累方式。 3．3监测环境发光细菌发光强度与某些污染物浓度呈较好的线性关系，能稳定、快速地测定污染物浓度变化。王亚以DiFMI为底物，建立的荧光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)检测环境样本中MC结果和HPLC法检测结果相关性较好，作为一种快速检测方法，尤其对大批量、低浓度MC水样的监测有较好的应用前景。于海将发光细菌固定于光纤表面，与光检测系统结合，开发了一种发光细菌光纤传感器，用于水中污染物毒性快速监测和评价具有较好的准确性和灵敏度。  3．4检验食品3．4．1色素  党亚爱证明17种常用色素对发光细菌均有一定的急性毒性，细菌发光强度与色素毒性呈负相关，发光细菌可简便、快速检测色素口。3．4．2 致癌物 江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6种含氮杂环化合物对发光细菌的急性毒性作用。结果表明，发光细菌的相对发光度均随化合物浓度增加而线性降低，具良好相关性。3．4．2微生物高岳利用ATP生物发光技术对脱水香菇细菌污染情况进行了快速检测试验L2。结果与标准细菌培养方法有良好相关性，且不需复杂的设备，可用于食品快速筛选和现场检测，是一项值得推广的新技术。3．4．3检测农药残留袁东星发现发光细菌发光强度与有机磷农药浓度呈负相关，可用于现场快速检测，稍加改进便可用于食品中多种毒物检测。4小结与展望生物发光技术已在生物医学、农产品、环保等领域中发挥重要作用。相信，随着研究的进一步深入，它将在理论研究和实际应用中产生更大的价值。

PCR的工作机制 PCR由一系列复杂的化学反应，包含前、中、后三个阶段。最重要的化学变化是热循环期间的产物合成。每次循环后产物、模板、聚合酶、引物和脱氧核苷酸的余量都会改变，处于连续的不稳定状态。所有的循环都是从模板和先前产物的变性开始。当温度较低时，引物退火到模板上。 早先若干循环的退火步骤要求引物寻找正确的染色体模板作为它们的目标。在中期的循环中，先前合成的产物优先成为模板。最后几个循环中，增扩后的高浓度产物互相杂交，由此阻止与引物的杂交。引物退火后，Taq DNA聚合酶把自己定位到引物和模板综合体上，提取介质中的自由dNTPs然后沿着模板延伸。从本质上讲，引物和模板的任何反应都会造成产物扩展，它们的特异性在最初的几个循环中可能很难控制，得到非特异性产物的摩尔量超过在模板上正确退火位置的量。PCR反应特异性的可靠度依赖于2个引物必须定位到互补的DNA链上。进一步讲，退火温度和Mg2+离子的浓度影响引物稳定的杂交到模板上，杂交位置间距应小于10kb。 相比之下，增扩阶段的大部分循环里，模板被很好的与先前增扩的片段区分开。这些片段的数量取决于早先若干个循环的严密性。甄选同源性引物的退火位置是较简单的，增扩期间由染色体DNA贡献的有效的模板数量只是可以忽略一小部分。甄选的复杂性被超量由引物从互补位点新增扩的片段所降低。 PCR的化学计量 热力学方面的影响对PCR来讲是试剂浓度和模板间的对应关系。在起先的循环中PCR试剂的摩尔比率是最高的，随着PCR产物的增加而降低。令人惊讶的是这种减低是由增扩的目标分子的增加引起的而不是由于试剂的消耗。最初剩余的引物和脱氧核苷酸与模板的比率是固定的，反应结束后，dNTP的浓度下降超过1倍，引物任然剩余95%，Taq DNA聚合酶没有变化。增扩千万倍目标分子后，模板分子远多于酶分子。当产物增加后，酶全部被占用了，引物和模板的比率减低，推动自身退火。当自身退火的数量增加或酶的总量有限时，反应处于饱状态并停止指数级的增长。增扩阶段是自我受限的。这个阶段之后，热循环转向未在最初几个循环中被选择的欺骗性的目标增扩，尽管能够通过提高开始时Taq DNA聚合酶和引物的含量来维持高试剂比率，但这种修改很可能引起丢失特异性因为引物会胡乱杂交，出现额外的条带和斑点。  热启动（hot start）PCR 用于引物设计的位点因为遗传元件的定位而受限时，如site-directed突变、表达克隆或用于DNA工程的遗传元件的构建和操作，热启动PCR对提高PCR特异性尤为有效。 尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃，聚合酶在室温仍然有活性。因此，在PCR配制过程中，热循环刚开始，以及保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。这些非特异性产物一旦形成，就会被有效扩增。 限制Taq DNA聚合酶活性的常用方法是在冰上配制PCR反应液，并将其置于预热的PCR仪。这种方法简单便宜，但并不能完成抑制酶的活性，无法完全消除非特异性产物的扩增。热启动通过抑制DNA合成，直到PCR仪达到变性温度。方法包括延缓加入Taq DNA聚合酶，在反应体系达到90度时，暂停并保持温度在70度以上。手工加入聚合酶，这个方法过于烦琐， 尤其是对高通量应用容易造成污染。其他的热启动方法使用蜡防护层将一种基本成分如镁离子、酶、模板、缓冲液包裹起来，物理地分隔开。热循环开始后，因蜡熔化而把各种成分释放出来并混合在一起。蜡防护层法与手动热启动法一样比较烦琐，易受污染，不适用于高通量应用。 还有一种方法是使用inactive DNA Polymerase. polymerase被抗体抑制失活，当变性温度超过70度时，抗体也变性了，这样polymerase又被激活了。 Booster PCR 整个PCR反应过程中引物前后担任2种功能，筛选探针和增扩引导。在最初的几个热循环期间，每个引物作为探针独立地活动，筛选所有目标。如果一对引物与目标杂交，方向和位置都正确，就意味着目标选择的工作完成了。接下来在以后的循环中这对引物引导增扩反应。 增扩低浓度的模板（等于或小于100个模板）比如单个细胞，石蜡化的组织有不同的特点。筛选阶段相对于模板而言要有更多剩余的试剂。稀释的模板造成难以筛选，因为引物和模板相遇和频率被大大的降低了。这种情况更有可能引起引物之间形成二聚体。Booster PCR是解决这个问题的方法。在此步骤中，第一个循环阶段使用稀释后的引物和模板取得固定的引物/模板比例，大约在107:1。以确保开始扩增时的准确性，在增扩阶段提高引物的浓度到正常水品。 嵌套的引物 如果增扩出的DNA序列嵌套存在于引物退火位置之间，从大范围看增扩出的目标是同源的。引物杂交的严密性在最初若干个循环里是宽松的，允许较高的错配偏差。这个效果能通过低于计算得到引物退火温度来达到。第二步选择明确的产物，严谨地选择一条已知染色体片段用来增扩。简单点说就是设计两对引物, 一对是长的，另一对短的是包含在长引物内的，用长引物扩增的产物作为第二次扩增的模板，这样可以增加产物的量而且可以减少非特异性带和错配的情况. 假阴性 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应固定不宜随意更改。 酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因为酶的活性丧失或不够而导致假阴性。需注意的是有时PCR时忘了加Taq酶或电泳时忘了加溴化乙锭。 引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策为：①选定一个好的引物合成单位。②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。③引物使用过程中应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分，导致引物变质降解失效。④引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。 假阳性 引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染：这种污染有两种原因：一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假阳性。这种假阳性可用以下方法解决：①操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样器内或溅出离心管外。②除了酶及其他不耐高温的物质外，所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及进样枪头均应一次性使用。③必要时，在加标本前，反应管和试剂用紫外线照射，以破坏存在的核酸。二是空气中的小片段核酸污染，这些小片段比靶序列短，但有一定的同源性。可互相拼接，与引物互补后，可扩增出PCR产物，而导致假阳性的产生，可用巢式PCR方法来减轻或消除。 出现非特异性扩增带 PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数过多有关。其次，是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现，酶的量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有：①必要时，重新设计引物。②减低酶的量或调换另一来源的酶。③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数。④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸，也叫两步法)。 出现片状拖带或涂抹带 PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶的量过大或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶的量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓 度。④增加模板量，减少循环次数

电泳仪出现代码故障让很多使用者们着急，很多用户看不懂一些代码的意思，从而从无下手，为了解决您的问题，上海巴玖技术人员特意将一些常见的代码故障整理出来，希望能对您有帮助。Er1：输出电压超过最大值。 Er2：输出电流超过最大值。检查电泳缓冲液浓度是否过高。电泳仪运行时是否插拔电泳槽。 Er3：短路。切断电源后拔掉电泳槽连接线，重新开机看是否不再报警，则正常。仍旧报警则可能芯片损坏，需返修。 Er4：未接负载。检查电泳缓冲液浓度是否过低。电泳槽连接线未插好，或接触不良。怎么弄连接线都弄不好的话返修。 Er5：电压突变（可能插拔了一个负载）。 Er6：电流突变（可能插拔了一个负载）。切断电源后重新开机，建议不要在电泳仪运行是插拔电泳槽。 Er7：输出功率超过最大值。检查电泳缓冲液浓度是否过高。电泳仪运行时是否插拔电泳槽。 Er8：输出电压设置为0。Er9：输出电流设置为0。重新设置电压、电流数据。 Er11：风扇损坏。 Er12：风扇转速过慢或停止。风扇损坏或芯片损坏，需返修。 Er15：开机报警。 Er16：开机报警。前一次使用电泳仪时没有正常关机所致。所以无视之，按常规使用即可。 Er17：电流监控报警。电流过大或者超功率，检查电泳缓冲液浓度是否过高。降低电流或电压的设定值。 ErrS：短路、超载。切断电源后拔掉电泳槽连接线，重新开机看是否不再报警，则正常。仍旧报警则可能芯片损坏，需返修。ErrO：未接负载。检查电泳缓冲液浓度是否过低。电泳槽连接线未插好，或接触不良。怎么弄连接线都弄不好的话返修。

2015年5月6日，在武汉金三利大酒店，上海嘉鹏科技有限公司举办了2015年度湖北地区客户答谢酒会。来自湖北地区的代理商及重点客户共计100余人参加了此次活动。在答谢会现场，王朋总经理做了重要发言：在我们代理商的支持与客户的信赖下，上海嘉鹏科技在湖北地区的销售额均有了显著提高，新开发的智能LCD紫外分析仪、智能恒流泵、自动部分收集器市场占有率稳步提高，品牌形象和认知度得到显著提升。     本次客户答谢会提供了一个增进相互了解和友谊的最佳平台，大家更加坚定了与上海嘉鹏长期合作的信心。来访嘉宾纷纷对此次活动予以高度赞赏，很多客户表示，他们很看重未来与嘉鹏的进一步合作。特等奖：苹果IPAID

 恒流泵可以精确的输送高粘的各种墨水，其吸程和杨程都可以超过5米以上，并且恒流泵可以随意变换输送方向还具有截止阀的功能，可以取消管路中单向阀的配置，输送的精度可以达到1%，调速非常方便，因此做为墨泵使用，恒流泵是非常理想的选择。    喷绘机在高速喷绘的过程中，需要将墨水不断的输送到喷头，墨盒里的墨水会不断减少，为了保证墨水的连续供应，通常将墨管插入外置的墨桶之中用泵将墨水输送到副墨盒里中转。喷绘机比较常采用隔膜泵做为墨水输送泵，或者用隔膜泵收集排出废墨。这种泵虽然便宜，但是对于一些溶剂型的墨水或者是粘性较高的墨水，在输送的过程中就会造成泵的损坏或者流量的不稳定，同时也会带来泵内墨水死角残留等问题。    104K/ZL是一种定速微型恒流泵，靠12V或者24V直流电源驱动，流量大小可以选择（选择不同转速的电机）。104K/ZL恒流泵配备的是直流减速齿轮电机，因而确保了104K/ZL恒流泵在输送墨水的过程中始终保持超高的可靠性和稳定性，不会因为泵管的磨损而造成泵不出液体或者抽不上墨的现象。    有一些没有带减速箱的恒流泵靠电机轴外面包围3个轮子，轴很小，轮子大，轴高速转动，带动3个轮子做行星运转，全靠轴跟轮子之间的摩擦力实现传动。如果泵管受到磨损和轮子受到磨损，泵就会停止出液，甚至当出口阻力增大，也会停止出液。 

通常，一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好，但也有的色谱柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响色谱柱寿命和其它问题的因素很多，而有些因素是操作者很难控制的，如果被分析的样品(如分析生物样品)，怎么净化样品也是“脏”的，对于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后，在多数情况下总能够人为地减少色谱柱上故障，达到延长寿命的目的。 色谱柱预防及维护—避免高压冲击  一般色谱柱都能经得起高压，但经不起突然变化的高压冲击。引起高压突然冲击，主要是因样品阀的缓慢转动、泵起动快、柱切换操作等。转动六通进样阀时从泵到柱的液流会瞬时切断。在阀的泵侧压力升高，在阀的柱侧压力降低(变化超过20%)。阀转到底后压力突然冲击一下恢复正常。手动进样阀的变化不大，自动进样阀比较慢，可能造成压力冲击，可用氦气代替空气驱动进样阀。因氮压缩系数小。另外泵起动不应过快，可分步操作。如用3mL/min流速，先从lmL/min到2mL/min，然后再3mL/min，每个间隔应大于20s。柱切换技术的应用也很广泛，切换过程中在色谱柱的入口处压力在零到很大数字之间变化，会很快使柱报废。 色谱柱预防及维护—分离条件  多数色谱柱有很宽的试验条件范围，但具体应用又受到限制，主要是pH值、柱温和流动相的选择。硅胶为基质的键合相要求PH在2.5～7之间，极端pH的流动相能“溶解”硅胶，使键合相流失。结果非碱性组分的保留不断减少，碱性组分的保留增加，引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH的流动相，可加预柱(饱和柱)。预柱装在泵和进样阀之间，用分析柱相同的填料填装，或者用普通硅胶。硅胶饱和了流动相，减少了分析柱填料的损失。预柱不要求柱效高，用价格低的一般硅胶疏松地填装，按期检查硅胶的溶解情况。用预柱也有不利的影响，即新流动相难以平衡，保留时间不稳定或稳定慢。使用了预柱一定要加流路过滤器，以防止硅胶微粒引起的麻烦。以硅胶为基质的柱和阴离子交换柱超过60℃后，会增加对流动相中化学物质的吸附。在高温下用小颗粒柱引起柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。在40℃以上使用3μm柱，70℃以上使用5μm柱，会使值降低50%。 色谱柱预防及维护—加流路过滤器和保护柱  流路过滤器紧靠进样阀后面，位于分析柱前。0.5μm烧结不锈钢片夹在死体积很小的套子中，挡住来源于样品和进样阀垫圈的微粒入柱。因为每个样品都过滤既费事又带来误差，样品量少过滤更困难，因此流路上装过滤器是比较省事的办法。也可以在流路加上保护柱，放在流路过滤器和分析柱之间，或者代替流路过滤器。保护柱的使命是收集阻塞色谱柱进口的来自样品的化学“垃圾”。这种垃圾最终降低柱效能。保护柱是消耗品，分析50～100个比较脏的样品之后就要调换新的。保护柱应该是小体积，用分析柱的同种填料填装。保护柱使用得当，对分离无影响，好像未装保护柱一样。有些厂商的商品将保护柱和流路过滤器连在一个单元内，使用起来非常方便。自己填装保护柱都是用短柱、不超过3cm长，内径2～3mm，用较大粒度的填粒(15～20μm)干法填装，会使分析柱效略微有所降低。 色谱柱预防及维护—用强溶剂定期冲洗色谱柱   每次工作结束，用强溶剂冲洗柱是良好的习惯。可用甲醇、乙腈冲反相柱，冲去留在柱上的强吸附组分。用甲醇水为流动相时也应冲洗。冲洗的程序在以下章节中介绍。柱头的烧结不锈钢滤片，要求平整，死体积小，孔径适当(2～5μm)。过滤片选择不好会改变色谱峰形，增加阻力或起不到阻挡污染物的作用(填料很快变色)。 色谱柱预防及维护—净化样品  用溶剂溶解的样品，多数组分在一定的时间内能完全从柱中流出来，不会造成危害。有些样品可能含有微粒物质，样品中的某种组分(如蛋白质)在柱头上沉积下来，组分在固定相上保留很强，溶剂带走柱填料等，这些都会造成柱效能下降或对柱寿命的影响，有必要采取措施防止柱变坏。   如在光线照射下观察样品是浑浊的或带有乳白色，进样前必须要过滤．虽然流路上装有过滤器和保护柱，但不能代替样品的前处理，样品中过多的微粒会使过滤器和保护柱超载，很快阻塞，或者微粒进入分析柱，所以在进样前必须过滤样品。   若怀疑样品与流动相混合有沉淀而对色谱柱有阻塞，应先试验一下，看样品溶液加入流动相中有无变浑或乳白色出现。如果进样后压力突然增加而后又慢慢减小，表明样品中有微粒或发生沉淀。如有沉淀要设法改变分离条件，包括换样品溶剂和流动相或处理样品去掉不溶物质。应尽量用小体积的样品。   有些样品能很强地吸附在柱填料上，这样会降低塔板数，改变样品的保留物质外，还要加保护柱，定期清洗色谱柱。有时因为疏忽，用对柱有害的溶剂溶解样品，比如用6mol/L的氢氧化钠溶解样品，这样的样品只要进50～100μL到硅胶基质柱中，硅胶就很快溶解而使柱报废。在这种情况下，应立即中和样品，或除去原溶剂中的有害成分。  综上所述，如何保护良好的柱性能与柱寿命：1.认真阅读色谱柱使用说明书；2.使用填充良好的色谱柱；3.尽量减少压力波动，避免机械及热冲击；4.使用保护柱及在线过滤器；5.经常以强溶剂冲洗色谱柱；6.充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与强保留成分；7.用稳定的固定相(C18最稳定);8.在中等pH值操作时(6～8)，用有机缓冲溶液；9.色谱柱使用温度最好小于40℃；10.硅胶基质的色谱柱，应保持流动相的pH值范围在3.0～8.0；11.在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠；12.流动相中含有缓冲溶液，应注意用95：5的水及有机溶剂过滤，有机溶剂不能低于5%；13.过夜或贮存时，冲洗掉盐和缓冲液，用纯有机溶剂流动相保存。

366nm检测用紫外灯, 用于水及食物中的微生物检测，如水中大肠埃希氏菌在含MUG 的培养基中培养后，即会产生荧光反应也可用于实验室蛋白质及化合物的检测。 大肠埃希氏菌定义大肠埃希氏菌是指能产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培养液呈黄色，能产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的细菌。检测重要性《生活饮用水标准检验方法》GB/T 5750-2006中将大肠埃希氏菌列入检测项目中。并在解读《生活饮用水卫生标准》GB5749-2006中阐述：“只有埃希氏大肠杆菌是粪源特异性的，是最准确和专一的粪便污染指示”。二、用途 ：大肠埃希氏菌测定荧光观察使用方法：将台式紫外光灯置于暗处，插上电源，将经过24小时培养后的EC-MUG管在灯下照射，如有蓝色荧光产生则为大肠埃希氏菌阳性管；三、注意事项：每次观察时，用一个没开封的EC-MUG管和被测的EC-MUG管在紫外光灯同时观察，如果被测的EC-MUG管产生荧光，在紫外光灯下与没开封的EC-MUG管比较，有明显的区别。每次测试完后将电源拔掉。四、具体方法:取供试液10ml(相当于供试品1g、1ml）,直接或处理后接种至适量(不少于100ml)的胆盐乳糖培养基中,培养18--24小时,必要时可延长至48小时.取上述培养物0.2ml,接种至含5mlMUG培养基的试管内,培养,于5小时、24小时在366nm紫外线下观察,同时用未接种的MUG培养基作本底对照.若管内培养物呈现荧光,为MUG阳性,不呈现荧光,为MUG阴性.观察后,沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液,液面呈玫瑰红色,为靛基质阳性,呈试剂本色,为靛基持阴性.本底对照应为MUG阴性和靛基质阴性.如MUG阳性,靛基质阳性,判供试品检出大肠埃希菌;如MUG阴性,靛基质阴性,判供试品未检出大肠埃希菌;如MUG阳性,靛基质阴性,或MUG阴性,靛基质阳性,则应取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上,培养18--24小时.   若平板上无菌落生长,或生长的菌落与表所列的菌落形态特征不符,判供试品未检出大肠埃希菌.若平板上生长的菌落与表所列的菌落形态特征相符或疑似,应进行分离,纯化,染色镜检和适宜的生化试验,确认是否为大肠埃希菌.  大肠菌形态特征曙红亚甲蓝:呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉