目的： 1、了解电光分析天平的构造、使用方法、技巧、维护及保养。  2、掌握电光天平的原理。 3、测试分析天平的稳定性（示值变动性）和灵敏度。 4、学习直接法和减量法两种基本称量方法，正确使用称量纸和称量瓶。 5、练习用列表法表示实验数据。 一、外观检查 1、取下天平罩，叠好置于适当位置，检查砝码盒中砝码是否齐全，夹砝码的镊子是否在盒内，圈码是否完好并正确挂在圈码钩上，读数盘的读数是否在零位。 2、检查天平是否处于休止状态，天平梁和吊耳的位置是否正常。 3、检查天平是否处于水平位置，若不水平，可调节天平前部下方支脚底座上的两个水平调节螺丝，使水泡水准器中的水泡位于正中。 4、天平盘上如有灰尘或其它落入物体，应该用软毛刷轻扫干净。 二、零点调节     天平的零点是指天平空载时的平衡点，每次称量之前都要先测定天平的零点。天平的外观检查完毕后，接通电源，顺时针转动升降旋钮到底（即开启天平），此时可以看到缩微标尺的投影在光屏上移动，当标尺指针稳定后，若光屏上刻度线与标尺的0.00线不重合，可拨动升降旋钮下方的调零拉杆移动光屏使其重合，零点即调好。若光屏移动到尽头还是不能与标尺0.00线重合，应请老师通过旋转天平梁上的平衡螺丝来调整。 三、示值变动性的测定     示值变动性是指在不改变天平状态的情况下，多次开启天平其平衡位置的再现性，表示称量结果的可靠程度。其值越小，可靠性越高。     在天平空载的情况下，多次开启天平，记下每次开启天平稳定后平衡点的读数，反复四次，其最大值和最小值的差值即为该台天平的空载示值变动性。 空载示值变动性= Lo(最大值)－Lo(最小值)＝（） 在天平的左、右盘上各加20g砝码，再测出天平的平衡点，如此反复测定四次，并计算出天平变动性的大小。 载重示值变动性 = L(最大值)－L(最小值) ＝（） 四 、灵敏度的测定 天平的灵敏度：为每增加1mg砝码时引起的天平零点与停点之间所偏移的小格数，天平越灵敏偏移的格数越多。灵敏度常用感量表示，感量是指指针偏移一格时所需的质量。 1、空载灵敏度轻轻旋开旋钮以放下天平横梁，记下天平零点后，关上旋钮托起天平横梁。用镊子夹取10mg圈码，置于天平左盘的正中央。重新旋开旋钮，待指针稳定后，读取平衡点读数，关上旋钮，由平衡点和零点之差算出空盘灵敏度（小格/mg）及感量（mg/小格）。 空盘灵敏度＝（）（小格/mg） 2、载重灵敏度天平左右两盘各载重20g，用同样的操作测定载重时的灵敏度。天平的灵敏度是天平灵敏性的一种度量，指针移动的距离愈大，天平的灵敏度愈高。天平载重时，梁的重心将略向下移，故载重后的天平灵敏度有所下降。天平的灵敏度太高和太低都不好，其大小可通过天平背后上部的灵敏度调节螺丝（又称感量调节螺丝）进行调节。     一般要求天平的灵敏度在98－102小格/10mg范围内。若低于98小格/10mg，应将灵敏度调节螺丝向上调，以升高天平梁重心，增加其灵敏度，若高于102小格/10mg，应将灵敏度调节螺丝向下调，以降低天平梁重心，降低其灵敏度。 载重灵敏度＝（）（小格/mg）  

我们在选购酸度仪时，首先要考虑应用场合，选择笔式pH计，便携式酸度仪，台式酸度计或是工业用pH计；其次是考虑测量需要的精度，选择合适自己使用的精度。 pH计广泛应用于工业、电力、农业、医药、食品、科研和环保等领域。该仪器也是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证中的必备检验设备。   我们在选购酸度计时需要考虑以下几点：  1. 根据应用场合分类可分为：笔式pH计、便携式pH计、实验室pH计和工业pH计等。笔式pH计主要用于代替pH试纸的功能，具有精度低、使用方便的特点。 便携式pH计主要用于现场和野外测方式，要求较高的精度和完善的功能。  实验室pH计是一种台式高精度分析仪表，要求精度高、功能全，包括打印输出、数据处理等等。  工业pH计是用于工业流程的连续测量，不仅要有测量显示功能，还要有报警和控制功能，以及安 装、清洗、抗干扰等等问题的考虑。   2. 据pH计仪器精度分类：可分为0.2级、0.1级、0.05级、0.01级,数字越小，精度越高。   3. 根据元器件类型分类：可分为晶体管式、集成电路式和单片机微电脑式，现在更多的是应用微电脑芯片，大大减少了仪器体积和单机成本；但芯片的开发成本很贵。 4. 据读数指示分类：可分为指针式和数字显示式二种。指针式pH计现在已很少使用，但指针式仪表能够显示数据的连续变化过程，因此在滴定分析中还有使用。  5. 看pH计有没有附带功能，比方说带标配RS232接口，还有一个很重的是温度补偿是自动 还是手动，自动温度补偿的pH计要比手动温度补偿的pH计要方便些，二者之间的价格你就明白了吧。 备注：pH计、酸度仪、酸度计这三个名称意思都一样，只是各地方或者厂家说法不一样！

低温恒温槽又叫低温恒温循环槽，是自带制冷和加热的高精度恒温源， 可在机内水槽进行恒温实验，或通过软管与其他设备相连，作为恒温源配套使用。泛用于石油、化工、电子仪表、物理、化学、生物工程、医药卫生、生命科学、轻工食品、物性测试及化学分析等研究部门，高等院校，企业质检及生产部门，为用户工作时提供一个冷冷受控，温度均匀恒定的场源，对试验样品或生产的产品进行恒定温度试验或测试，也可作为直接加热或制冷和辅助加热或制冷的热源或冷源产品特点1.精密恒温控制系统，整个量程范围的温度精确可控，最佳恒温波动度达到±0.02℃，适用于最低达-90℃的样品保存、分析测试和计量鉴定等。2.制冷系统采用德国丹佛斯压缩机，噪音低，制冷效率高。其它制冷关键配件也采用全进口配件，制冷系统具备高压保护器，确保制冷系统安全。3.采用全封闭磁力泵循环搅拌，温场均匀，绝无泄漏。4.任意编程的温度程序控制。各档程序数据长期记忆，由于停电或其他原因造成程序运行意外中断，恢复供电后程序将自动继续执行，充分保证试验工作的连续性。5.传感器开路、短路保护、双重温度保护等功能，确保仪器绝对安全运行。6.大容量液槽内胆、外壳、电热器和蒸发器等可能与工作介质接触的部件采用不锈钢材料，经久耐用、美观大方。7.可选配RS232，RS485及USB通讯接口。选择主要参数低温恒温槽的选择主要考虑温控范围，温控精度，泵循环、内循环搅拌，材质，制冷量等因素控温范围主要是指用户所需要恒温的温度点，通过温度点确认所需要的温控范围，譬如用户A需要恒温的温度点是-5℃、10℃、37℃，在选择温控范围的时候就需要将这些温度点考虑进去，温控范围需要包含这些温度点，一般这种建议选择温控范围-5﹣90℃或者-10﹣90℃，前者由于-5℃温控临界点相对于-10℃-90℃的低温恒温槽降温的速率会低一点，对降温时间有要求的可选择温控范围-10﹣90℃低温恒温循环槽温控精度即恒温在一个温度点时，它的波动度，这个主要看客户的要求，正常的低温恒温槽温控精度在±0.05℃，显示分辨率0.01℃，吉米诺低温恒温循环槽可实现波动度±0.05℃、±0.01℃、±0.0010℃三种温控精度的需求（常规需求），特殊温控精度的需求可咨询定制。泵循环、内循环搅拌泵循环和内循环搅拌为一个系统，即在开启泵循环的时候同时起到内训和搅拌的功能，在低温恒温槽的选型中，一般泵循环是带有内循环搅拌功能的，内循环搅拌功能是温度计量检定必备的功能；泵的好坏有时会决定温控范围，吉米诺低温恒温循环槽的温控范围是-90﹣90℃，采用的是磁力泵（主要由泵头、磁力传动器（磁缸）、电动机、连接底板等几部分零件组成。磁力泵磁力传动器由外磁转子、内磁转子及不导磁的隔离套组成当电动机带动外磁转子旋转时，磁场能穿透空气隙和非磁性物质，带动与叶轮相连的内磁转子作同步旋转，实现动力的无接触同步传递，将容易泄露的动密封结构转化为零泄漏的静密封结构。由于泵轴、内磁转子被泵体、隔离套完全封闭，从而彻底解决了“跑、冒、滴、漏”问题），使用磁力泵温控更精准，更均衡；泵循环量的多少是指泵流速的大小，例如泵循环17L/min，即泵每分钟循环17L，泵循环量和泵的扬程关系不大，泵扬程一般取决于用户使用仪器时的距离，特殊需求可提前告知，便于选择合适的泵；材质正常的低温恒温槽都内胆均采用不锈钢材质，不锈钢具有防腐防酸碱的功效，但优于国产不锈钢含碳量的不同，在用于强酸强碱实验的用户需要提前和厂家说清楚，对内槽需要做特殊处理，才能放心实验。制冷量是由压缩机决定的，不同的压缩机功率不同制冷量不同，需要提前做确定，制冷量决定制冷时间的长短。

电子天平是最新一代的天平，是基于电磁学原理制造的，有顶部承载式(吊挂单盘)和底部承载式(上皿式)两种结构。一般的电子天平都装有小电脑，具有数字显示、自动调零、自动校正、扣除皮重、输出打印等功能，有些产品还具备数据贮存与处理功能。电子天平操作简便，称量速度快。　　近年来，我国己生产了多种型号的电子天平，但由于电子天平的价格比机械天平高几倍至十倍，目前国内尚未普及。　　电子天平的一般操作方法:通电预热一定时间(按说明书规定);调整水平;待零点显示稳定后，用自带的标准砧码进行校准;取下标准砧码，零点显示稳定后即可进行称量。例如用小烧杯称取样品时，可先将洁净干燥的小烧杯置于称盘中央，显示数字稳定后按“去皮"键，显示即恢复为零，再缓缓加样品至显示出所需样品的质量时，停止加样，直接记录称取样品的质量。短时间(例如2h)内暂不使用天平，可不关闭天平电源开关，以免再使用时重新通电预热。     电子天平故障排除方法故障　　　　　　　　　　原因　　　　　　　　　排除方法显示器上无任何显示　　　无工作电压　　　　　　检查供电线路及仪器　　　　　　　　　　　　未接变压器　　　　　　将变压器接好调整校正之后，显示器　　放置天平的表面不稳定　确保放置天平的场所稳定无显示　　　　　　　　　未达到内校稳定　　　　防止振动对天平支撑面的影响　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　关闭防风罩显示器显示“H"　　　　   超载　　　　　　　　　为天平卸载天平显示“L"或　　　　   未装称盘或底盘　　　　依据电子天平的结构类型“Err 54"　　　　　　　　　 　　　　　　　　　装上称盘或底盘称量结果不断改变　　　   振动太大，天平暴露在　通过“电子天平工作菜单"采取　　　　　　　　　　　   无防风措施的环境中　   相应措施　　　　　　　　　　　   防风墨未完全关闭　　　完全关闭防风罩　　　　　　　　　　   　在称盘与天平壳体之间　　　　　　　　　　　　有杂物　　　　　　　   清除杂物　　　　　　　　　　　   吊钩称量开孔封闭盖板　　　　　　　　　　　　被打开　　　　　　　   关闭吊钩称量开孔　　　　　　　　　　　   被测物重量不稳定(吸收　　　　　　　　　　　　潮气或蒸发)　　　　　　　　　　　   被测物带静电荷称量结果明显错误　　　   电子天平未经调校　　　对天平进行调校　　　　　　　　　　　   称量之前未清零　　　　称量前洁零     电子天平使用注意事项　　一、电子天平的心脏一重力电磁传感器簧片(一般共有六一八片)细而薄，极易受损，且天平的精度越高，其重力传感簧片也越薄，所以在使用中应特别注意加以保护，不要向天平上加载重量超过其称量范围的物体，绝不能用手压称盘或使天平跌落地下，以免损坏天平或使重力传感器的性能发生变化，另外称量一个物体一般不要是较重的物体〕一般不要超过30秒钟搬动和运输时应将称盘及其托盘取下来。　　二、电子天平实际上是测量地球对置于称盘上的物体的引力即重力的仪器，而由于地球径纬度的不同，各地的重力加速度(9-9. 8m2/s)并不相同,在使用当地其称量准确度取决于是否进行了正确的校正和校正砝码的精度，假如您发现在广州经校正好的天平，在当地称重有一定误差，这并不表示天平有任何故障请按各型号电子天平说明书介绍的方法用计量部门认可的标准砝码进行校正即可进行准确称量。　　三、校正机构一般分三大类:　　全自动校正:内合标准砝码和电机伺服机构，只需按一个功能键即可在数十秒钟内完成校正，一般新型的万分之一克精度以上的电子天平均采用全自动校正机构;　　半自动校正:内装标准砝码但无伺服机构，在进入校正程序后，需要手动加载和卸下校正码;　　手动校正:天平内没有标准砝码和伺服机构需要手动进入校正程序并外加标准砝码进行校正一般精度较低的天平采用手动校正　　四、电子天平是一台对环境高度敏感的精密电子测量仪器，使用时应小心操作，安装台面应无明显振动，不要置于空调口，若这些条件不能满足，应采取一些改进措施如变更使用地点装上防风墨等同时注意要调整底角螺丝使水平指示器的气泡居中。天平未调好水平也是产生称量误差的原因之一。FA型系列电子天平常见故障及排除1.故障现象:天平开机自检无法通过，出现下列故障代码     "ECI":CPU损坏     "EC2":键盘错误     "EC3":天平存储数据丢失     "EC4":采样模块没有启动     原因:致命错误造成天平不能正常工作     解决方法:将天平送修2.故障现象:天平显示“L"　　原因:1)没有安敞秤盘；2)秤盘下面有异物；3)气流墨与秤盘碰在一起。　　解决方法:1)将秤盘安置在秤盘座上；2)轻轻拿起秤盘检查是否有异物在秤盘下，拿走异物；3)轻轻转动秤盘或气流罩查看是否有碰的现象，调整气流罩的位置。3.故障现象:加载天平显示“H"　　原因:1)秤盘上加载物体过重，超出最近量程；2)曾用小于校准砧码值的砧码或其它物体校准过天平，导致敞上正常量程内的重量显示超重。　　解决方法:1)只在量程范围内称量；2)用芷确的砧码重新进行校准。4.故障现象:开机显示“L"，加载显示“H"或开机显“H"，加载显示“L"　　原因:天平超出允许工作的温度环境。　　解决方法:天平芷常工作的温度环境20℃士5℃，每小时环境温度变化不大于1℃，将天平移置该环境温度条件场所。5.故障现象:天平显示“E1"，显示溢出，显示值己超过99999999　　原因:计件或百分比称重时，样品值过小。　　解决方法:1)计件时出现“E1"，首先取走秤盘上的物体，重新选择样品的件数，可选10样品的整数2倍、5倍、10倍等作为样品。记下当前样品的倍数，读数时读取显示值乘以倍数即可。6.故障现象:显示数据曾经随称重变化而正常变化，突然出现不再变化　　原因:曾经使用大于校正砧码值的物体用于天平校准，从而出现大于某一个显示值后显示不再增加。　　解决方法:重新校准天平。7.故障现象:按下"i/o"键后未出现任何显示　　原因:1)电源没插上;2)保险丝熔断；2)键盘出错，按键卡死。　　解决方法:1)插上电源；2)更换保险丝。请将电源线拔掉，用小螺丝刀将天平电源插座处的熔丝盒撬出，更换保险丝；3)拧松按键固定螺丝调整按键位置。8.故障现象:开机后仅在显示屏的左下角显示“。"，不再有其它显示。说明天平称重环境不稳定，天平始终无法得到一个稳定的称重。     原因:1)天平门玻璃未关好；2)秤盘下面或四周有异物；3)气流墨未安敞好，导致秤盘与气流墨有碰擦；4)天平四周有强振动、气流；5)天平的称重环境选择和称量可变动范围设置不当。　　解决方法:1)关好门玻璃；2)请轻轻拿起秤盘观察是否有异物，特别注意是否有细小异物；3)缓缓旋转气流墨或秤盘观察有无碰擦现象；4)选择坚固的安装台面，无振动，气流较小的使用环境；5)重新设置天平称重环境设置。

为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出.1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：1）PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。2）组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需要提取DNA或RNA。3）用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。4）DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作，以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。5）大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。6）管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生，而且管子不能用力崩开，这样会产生气溶胶。7）任何时候都应该穿实验服和带手套，手套要经常更换，尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间，经常清洗。2、样品准备和RNA-PCR RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作，这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题，反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。3、前PCR区必须有专门用于准备各种反应的区域，这个区域必须保持干净，而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备，特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。4、PCR实验室试剂的操作1）所用的所有溶液都应该没有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）污染。2）所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的－新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压灭菌。3）在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂，在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。4）所用试剂都应该以大体积配制，实验一下看试剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。5）所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。6）新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。7）样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。5、在前PCR区建立PCR混合物1）可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃，在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。2）如果你的实验室使用多套引物，以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济，可以考虑分装保存够一天的PCR成分。3）作为一个规则，应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且，你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。4）阴性样品要与每组样品同时做，以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染，阴性对照应该包括核酸以外的所有试剂。5）当做阳性对照时，有两个理由决定了应该使用最少数量的核酸。6）由于必须有对照反应，对照模板的特点应该予以考虑。6、控制污染的方法已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染—使用UNG，这一技术能有效地消除由PCR产物引起的污染。另一种控制污染的方法是使用紫外线，这种方法不能完全消除污染问题，但可以将污染降低几个数量级。7、PCR仪的位置8、后PCR区PCR完成以后，需要分析样品并解释数据，应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必须是专门用于这一目的，决不能把实验室这一区域的试剂或仪器用于任何前PCR活动。 

电泳时胶回收切胶的注意事项：1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3. 关于防护，在一般有机玻璃后就足够了，戴上防护面具以保护眼睛，如果戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者对于胶有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用点marker和带刻度的尺子一起照相的方法来确定目的条带在胶上的位置进行切胶。 4. 按照正常程序点marker跑胶，然后切下有marker的胶，EB染色，紫外灯下与带刻度的尺子一起照相。由于要回收的带与marker间的相对位置已知，根据尺子来衡量未染色胶上目的带的位置即可。如果觉得很难判断，可以直接在marker边点少量的样，这样位置就容易确定了。凝胶成像分析系统的使用和注意事项：凝胶成像分析系统：可以应用在蛋白电泳凝胶，DNA凝胶，样品进行图象采集并进行定性和定量分析，样品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。（或UV,EB和有色及可见样品成像） 使用注意事项：? 注意开机顺序，先开凝胶成像系统，再打开电脑进入软件。? 紫外凝胶照相时要防止EB 污染仪器，凝胶成像系统的门不能用污染的手套接触，进行软件操作时同样不能被污染的手套接触。? 在使用紫外光源照相的过程中，不可以打开凝胶成像系统前面板。? 照相后经废胶取出，并用较软的纸擦拭干净。? 调焦时要轻，动作不要剧烈。?  环境电压 不稳定 时，请使用稳压电源。使用过程中如遇断电，请及时将仪器电源关闭，直至重新来电。?  使用时，请先打开仪器的电源开关，再打开电脑开关并打开软件（ Quantity One ）。?  保持观测室内环境干燥，及时将遗留在观测板上的水或其他液体檫干（可使用软质纸，一般卷纸即可）。?  观测用 EB （溴乙锭）染色的凝胶时，注意不要污染仪器表面。千万不要用手直接接触凝胶，或戴着接触过凝胶的手套去接触仪器的门和观测台的把手。?  使用仪器时，要将门及观测台关紧，否则将无法正常使用紫外灯。?  尽可能不要将电脑连接到因特网或局域网上，同时在电脑上安装杀毒软件（推荐使用正版软件），做到专机专用。?  较长时间不用仪器时，请将仪器用防尘罩盖上。?  为延长灯管的使用寿命，请观测好凝胶后及时关闭光源（仪器自身有 15 分钟的自动保护程序）。 

1)pH测试笔的保养及注意事项：此测试笔出厂时，已校准，可直接使用，下列情况须重新校准： 校准后已使用（或放置）很长时间； 电极使用特别频繁； 测量精度要求比较高； 做校正时，勿重复使用校正缓冲液； 当笔头有白色结晶时，此乃正常现象请勿紧张，可用清水浸泡一段时间； 滴几滴保存液或校正缓冲液在笔套里面，请勿使用蒸馏水或纯水来浸泡或保存测试笔； 测试笔玻璃电极敏感球泡中可能有小气泡，它将影响电极的正常测量，使用时应摇动电极，使气泡跑出敏感球泡； 玻璃电极易打破，使用时需小心； 显示值模糊或不显示或显示值比溶液的真实PH值高或低很多，则应更换电池； 2)更换电池的方法：将笔上面有开关的黑色板，轻轻拉出来，不要拉断电线，可看见4颗1.5V电池，拉出更换即可； 注意电池极性及选择相同型号的电池； 电极插入待测液或校正缓冲液时，不可超过测试笔上标示最大高度。 若电极放置时间很久,且敏感球泡暴露在空气中,因电极干燥,使得响应变慢且显示值不稳定.这时,应将电极浸入蒸馏水中活化几个小时; 为了改善性能,每星期至少一次将PH计电极插入蒸馏水中,每次几分钟; 蛋白质沉淀物(如测牛奶\乳酪等)要浸入胃蛋白酶和盐酸溶液中进行消除处理;这种溶液在使用前准备好,使用后,将电极浸入这种溶液几个小时,然后用清水冲洗干净,接着浸入蒸馏水几个小时; 油脂膜同样影响敏感球泡的测量,李除去这薄膜,用75%的醇溶液冲洗敏感球泡,再用滤纸擦干,用水冲洗好,然后浸入蒸馏水中几个小时; 2)pH校准将测试笔电极浸入PH值为6.86（25℃下）的混合磷酸盐标准缓冲液中，并轻轻摇动； 用小螺丝刀调整校正电位器直到显示值与标准缓冲溶液在环境温度下的PH值相符； 电极插入PH4.01的磷笨二甲酸氢钾或PH9.18的硼砂标准缓冲溶液中； 显示值与缓冲溶液的PH值相比应在误差允许范围内。 -. 操作步骤及方法 取下保护套； 先用蒸馏水清洗PH计的电极，并用滤纸将附在电极上的水分吸干； 接通位于电池仓上的开关； 将PH计电极插入被测液体，直到液体浸到略低于“浸没线”，条件允许，可使溶液浸到略高于“浸没线”的位置； 轻轻地搅拌溶液待数值稳定后，读取显示值； 使用完毕，清洗电极，关掉开关，套上保护套；

在实验室中我们经常性的遇到要让实验样品处于一种特定的环境温度下进行实验，低温恒温或高温恒温。在高温恒温中我们经常用的高温恒温油槽，因为油的沸点很高，如果是水中则可以使用恒温水浴箱、恒温水浴锅、低温恒温槽等仪器，这些仪器在水中的恒温效果是很显著的；如果需要低温恒温状态，一般都是采用低温恒温槽，不仅可以保持低温，而且随着技术的进步，在恒温状态下的精度也在慢慢提高，珀西瓦尔低温恒温槽的精度已达到0.005。 技术的进步，科技的发展，这些低温恒温槽也在翻天覆地的变化着，精度更高、控温更精准，因此在选择的时候也会遇到诸多的问题，不知道什么样的仪器才最适合自己使用，什么样的仪器质量才最可靠。一般我们在选择低温恒温槽的时候可以考虑以下几点，相信对你的选择会有或多或少的帮助。 1、在打开低温恒温槽网页或小册子时，你可以首先观察仪器的图片，一般仪器首先给你展示的、是它的面板设计，仪器虽说质量与面板设计并非成正比，但是一个好的仪器，生产商在研发时还是很在意的，就像衣服质量再好，难看也卖不出去，一看卖相而看材质 2、目前市场上大部分低温恒温槽都是采用304不锈钢材质的，外表采用简易铸钢结构，如果发现仪器不是使用304不锈钢内胆，或316不锈钢内胆，你就可以考虑简单的看看了，因为仪器一旦涉及强酸强碱介质，其他常用的不锈钢内胆无法承受。如无特殊需要外壳可选用建议铸钢材质，相比整机不锈钢结构节省成本。 3、仪器内是否添加其他物件，因为有些实验需要添加一些物件，如固定离心管的不锈钢试管架等，这些可以根据你的实验需要，进行询问。避免出现误买。4、是否有内外循环，这很重要，在低温恒温槽中，内外循环泵是仪器高精度恒温的重要保证，可查看仪器面板上是否有泵循环按钮或装置。 5、多向厂家咨询关于低温恒温槽这一块的知识和产品信息，多方面了解低温恒温槽的特点和性能是否满足自己实验室的需求，现在许多低温恒温槽除了外形，体积等一些东西不能变化，其他许多都是很灵活的。 6.还有一些仪器参数的细节上需要注意，切记不可马虎了事

1要选择合适的电子天平   选择电子天平，主要是考虑天平的称量和灵敏度应满足称量的要求，天平的结构应适应工作的特点。选择的原则是：既要保证天平不致超载而损坏，也要保证称量达到必要的相对准确度，要防止用准确度不够的天平来称量，以免准确度不符合要求；也要防止滥用高准确度的天平而造成浪费。 2正确安装   首先，要选防尘、防震、防潮、防止温度波动的房间作为天平室，对准确度较高的天平还应在恒温室中使用。其次，天平应安放在牢固可靠的工作台上，并选择适当的位置安放，以便于操作。天平安装前，应根据天平的成套性清单清点各部件是否齐全、完好；对天平的所有部件进行仔细清洁。安装时，应参照天平的说明书，正确装配天平，并校正水平，安装完毕后应再次检查各部分安装是否正常，然后检查电源电压是否符合天平的要求，再插好电源插头。 3预热   在开始使用电子天平之前，要求预先开机，即要预热半小时到一小时。如果一天中要多次使用，最好让天平整天开着。这样，电子天平内部能有一个恒定的操作温度，有利于称量过程的准确。 4校准   电子天平从首次使用起，应对其定期校准。如果连续使用，大致每星期校准一次。校准时必须用标准砝码，有的天平内藏有标准砝码，可以用其校准天平。校准前，电子天平必须开机预热1小时以上，并校对水平。校准时应按规定程序进行，否则将起不到校准的作用。 5正确操作   电子天平称量操作时，应正确使用各控制键及功能键；选择最佳的积分时间，正确掌握读数和打印时间，以获得最佳的称量结果。当用去皮键连续称量时，应注意天平过载。在称量过程中应关好天平门。电子天平使用完毕后，应关好天平和门罩，切断电源，罩上防尘罩。 二、电子天平的维护保养   1电子天平室内应保持清洁、整齐、干燥，不得在室内洗涤、就餐、吸烟等。   2电子天平应由专人保管和维护保养，设立技术档案袋，用以存放使用说明书、检定证书、测试记录，定期记录维护保养及检修情况。   3应定期对天平的计量性能进行检测，如发现天平不合格应立即停用，并送交专业人员修理。天平经修理、检定合格后，方可使用。   4应经常清洗秤盘、外壳和风罩，一般用清洁绸布沾少许乙醇轻擦，不可用强溶剂。天平清洁后，框内应放置无腐蚀性的干燥剂，并定期更换。   5电子天平开机后如果发现异常情况，应立即关闭天平，并对电源、连线、保险丝、开关、移门、被称物、操作方法等做相应的检查。总之，在对电子天平的维护保养中，使用人员应慎重，以保证设备的完好性。 

现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，首先必须对此有一定的认识和了解。下面将对几种常见的色谱填料极其各种的性能做各一个简要的介绍。（1）、硅胶填料硅胶填料主要应用正相色谱及反相色谱柱中，正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团(NH2,APS)和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷（Hexane）,氯仿（Chloroform）,二氯甲烷（Methylene Chloride）等。反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18（ODS）、C8（MOS）、C4（B）、C6H5（Phenyl）等。（2）、聚合物填料聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要优点是在PH值为1～14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性；大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。（3）、其他无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质，一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相，石墨化碳的表面即是保留的基础，不再需其它的表面改性，该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强，石墨化碳可用于分离某些几何导构体，又由于HPLC流动相中不会被溶解，这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC，氧化铝微粒刚性强，可制成稳定的色谱柱柱床，其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强，应用范围受到一定的限制，所以未能广泛应用，新型氧化锆填料也可用于HPLC，商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱，应用PH范围1～14，温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究，加之面临的实验难度，其重要用途与优势尚在进行中。二、怎样选择填料粒度目前，商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售，而目前分析分离主要用3um、5um和10um填料，填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小，填充柱的柱效越高；小于3um的填料应用，在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度，但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选择更小粒度的填料是很有用的，3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%；然而，3um的色相谱的背压却是5um的2倍。与此同时，柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱，以缩短分析时间，另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。三、如何保证良好的柱性能与柱寿命◆ 认证阅读色谱柱使用说明书；◆ 使用填充良好的色谱柱；◆ 尽量减少压力波动，避免机械及热冲击；◆ 使用保护柱及在线过滤器；◆ 经常以强溶剂冲洗色谱柱；◆ 充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与强保留成分；◆ 用稳定的固定相（C18最稳定）；◆ 在中等PH值操作（6~8），用有机缓冲溶液；◆ 色谱柱使用温度最好小于40℃；◆ 硅胶基质的的色谱柱，应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0；◆ 在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠；◆ 流动相中含有缓冲溶液，应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡，有机溶剂不能低于5%；◆ 过夜或贮存时，冲洗掉盐和缓冲液，用纯有机溶剂流动相保存（乙晴最好）。 

蠕动泵又叫恒流泵，也有叫软管泵或者蠕动软管泵。国内现在生产蠕动泵的厂家众多，但总结起来大于分类有基本型蠕动泵、流量型蠕动泵、分配型蠕动泵。基本型蠕动泵就是具备基本的流量输送功能和相关的外部控制接口，通常这类泵只显示转速，有一些基本的简单的间隙运转功能，这个功能的目的就是实现分配。但由于转速与流量之间需要自己去计算，所以使用的时候不太直观。流量型蠕动泵是指泵可以有较大的液晶显示屏，这个屏上可以显示转速和通过泵的单片机换算之后的流量显示，同时这种泵也具备常用的外部控制接口和功能。分配型蠕动泵指的是泵本身有较大的液晶显示屏，显示屏上有流量显示或者转速显示，还有分装瓶数、装量、灌装时间、间隙时间以及其他必要和非必要的一些参数显示。虽然分配型蠕动泵、流量型蠕动泵看起来有一些区别，但是这两种泵在硬件上基本上没有太大差异，其主要的还是程序的区别，但是市场上一些商家确在销售的时候流量型蠕动泵确比分配型蠕动泵价格要高得多，说白了这实际上就是一种产品经营的概念。如果用户认可这种概念对这种功能又比较需要，那么也无可厚非。驰唐蠕动泵公司生产的HL-2B型蠕动泵是一种智能型的蠕动泵，这种泵同时具备流量型蠕动泵、分配型蠕动泵的功能，以流量型的价格可以得到两种功能同时具备的泵，这可以大大的节约用户的购买成本，提高仪器的使用效率。注1：量显示的说明：蠕动泵的流量显示都是通过转速换算后显示出来的，并不代表当前输送的真实流量，并不是流量计检测或者称重传感器称重的实际结果，因此蠕动泵显示的流量是将泵每一圈的流量通过系数换算后显示在界面上的结果。注2：蠕动泵每转一圈的流量相对精确恒定因此又叫恒流泵，这种恒流泵每转一圈的流量误差比较小，因此增加一圈就会增加相同的流量，所以我们通过每圈流量计算的方式就知道单位时间内的流量大小。

实验原理带电荷的蛋白质，在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同，但大都在pH7以下，若将血清置于pH8.6的缓冲液中，则这些蛋白质均带负电，在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同，所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋白质分子小而带电荷多者，泳动速度快;反之，则泳动速度慢。因此可将血清蛋白质依次分为清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五条区带，经染色可计算出各血清蛋白质含量的百分数。以醋酸纤维薄膜(CAM)为支持介质，电泳分离后经染色处理，可展示出清晰的蛋白质电泳图谱。由于染色时染料与蛋白质的结合与蛋白质的量成正比，因此将各蛋白质带剪下，分别用一定量的NaOH稀溶液洗脱下来，即可进行比色，测定出各蛋白质区带的相对含量。也可用一定量的有机溶剂使CAM溶解制成透明膜而用光密度计进行扫描定量。醋酸纤维薄膜电泳具有微量、快速、简便及分辨率较高等优点，广泛应用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、同工酶的分离和测定。实验试剂1.巴比妥—巴比妥钠缓冲液(pH8.6，m=0.06)。称取巴比妥2.21克和巴比妥钠12.36克，溶于500毫升蒸馏水中，加热溶解。待冷至室温后，再加蒸馏水稀释至1000毫升。2.染色液(1)丽春红S染色液：称取丽春红S O.4g、三氯醋酸6g，用蒸溜水溶解并稀释至100ml。(2)氨基黑10B染色液：称取氨基黑(C22H13O12N6S3Na3)10B 0.1g,溶于20ml无水乙醇中，加冰醋酸5ml,使其溶解。另取磺基水杨酸2.5g，溶于少量的蒸馏水中，加入前液将两液混合摇匀，再以蒸馏水补足至100ml。称取丽春红S0.4克及三氯醋酸6克;用蒸馏水溶解，并稀释至100毫升。3.漂洗液。(1)3%(V/V)醋酸溶液：适用于丽春红S染色的漂洗。(2)甲醇45ml、冰醋酸5ml、蒸馏水50ml混匀，适用于氨基黑10B染色的漂洗。4.透明液 取无水乙醇75毫升和冰醋酸25毫升混匀备用。5. 洗脱液(1)0.1mol/L NaOH溶液：用于丽春红S染色的洗脱。(2)0.4mol/L NaOH溶液：用于氨基黑10B染色的洗脱。6.40%(V/V)醋酸溶液。实验设备 电泳仪、电泳槽、分光光度计或光密度仪。实验材料 醋酸纤维薄膜、培养皿、滤纸、镊子、点样器、直尺、铅笔、剪刀等。实验步骤1、电泳槽的准备将巴比妥-巴比妥钠缓冲液加入电泳槽中(两侧槽内注入等量的缓冲液)，调节两侧内的缓冲液，使其在同一水平面，液面与支架的距离约为2～2.5cm。支架宽度到恰好适合CAM的长度，用3～4层滤纸或4层纱布搭桥。2、CAM准备取醋纤薄膜(2厘米*8厘米)在CAM的无光泽面(涂有醋酸纤维素)距一端1.5cm处用直尺和铅笔轻划一线(与CAM的长轴垂直)，作点样标记，将膜条编号后将无光泽面朝下浸入巴比妥-巴比妥钠缓冲液中，待充分浸透后取出(一般约需求20～30min)，夹于洁净的滤纸中,吸去多余的缓冲液.3、点样用血清加样器将3-5ul无溶血的新鲜血清均匀地点在划线处，样品应与膜的边缘保持一定距离，以免电泳图谱中的蛋白区带变形。待血清渗入膜后移开点样器。点样应注意，要适量、均匀和垂直，并避免弄破薄膜。4、平衡将已点样的薄膜加样面朝下，点样端置于阴极端，将膜条紧贴于电泳槽支架的盐桥上并保持平直，桥的另一端垂入缓冲液中，盐桥将膜的两端与缓冲液连通，加上槽盖平衡5min后通电电泳。5、电泳正确联接电泳槽与整流器对应的正负极，点样侧接负极，另一侧接正极。开启电源通电。调节电压10V～15V/cm膜长,电流0.4～0.6mA/cm膜总宽，电泳40-60分钟(通常夏季需45min,冬季需60min)，待电泳区带展开3.5cm～4cm时即可关闭电源。6、染色通电完毕，立即取出薄膜直接浸入丽春红S或氨基黑10B染色液中，染色5～10分钟。7、漂洗至少准备3～4个漂洗皿，装入漂洗液。从染色液中取出薄膜条并尽量沥去染色液，按顺序投入漂洗液中反复漂洗，直至背景漂白为止。此时清晰可见5条色带。待干。8、定量(1)洗脱比色法 取六支试管，分别标明“A、α1、α2、β、γ、空白”。将漂洗净的薄膜剪下各区带放入相应的试管内，另从空白背景剪一块平均大小的膜条置于空白管中，根据染色不同按以下方法洗脱。①氨基黑10B染色洗脱：6支试管于清蛋白管内加入0.4mmol/L NaOH溶液6ml,其余5管各加3ml，振摇数次，置37℃水浴20分钟，使色泽完全浸出。用620nm波长，以空白管调零，读取各管的吸光度，其中清蛋白管吸光度×2。②丽春红S染色洗脱：洗脱液用0.1mmol/L氢氧化钠溶液，加入量同上。10分钟后，于清蛋白管内加入40%(V/V)醋酸0.6ml，其余5管各加入0.3ml，以中和部分氢氧化钠，使溶液色泽加深。如出现沉淀，可离心取上清液比色。用520nm波长，以空白管调零，读取各管的吸光度，其中清蛋白管吸光度×2。(2)光密度扫描法① 透明：将已漂净吹干的CAM条浸入透明液中3～5分钟，取出平铺于洁净干燥玻片上(应无气泡)，直立片刻除去过多的透明液。于90～100℃烘箱内烘烤5～10分钟，取出冷却至室温。此法透明的CAM，各蛋白区带鲜明，薄膜平整，可直接扫描或作永久保存。若用十萘氢或液体石醋透明，应将漂洗过的薄膜烘干后进行透明，透吸后的薄膜不能久藏，易发生皱折。② 扫描定量：将已透明的薄膜放入全自动光密度计或其它光密度扫描的光路，选择波长520nm，描记各蛋白区带峰，并计算各蛋白成分的相对含量。9、计算定量计算时，先计算各光密度值的总和：再计算血清各部分蛋白质所占的百分率吸光度总和(T)=2A+α1+α2+β+γ(吸光度)血清各蛋白组分的相对百分数=Ax/AT×100%Ax表示各球蛋白组分 (2A+α1+α2+β+γ)的吸光度。A%=2A/ T×100% β=β/ T×100%α1%=α1/ T×100% γ%=γ/ T×100% α2%=α2/ T×100%各组分蛋白质含量(g/L)=(各组分蛋白百分数(%)×血清总蛋白g/L)/10010、临床意义(1)血清蛋白醋纤薄膜电泳的正常参考值为：蛋白质组分 g/L 占总蛋白百分比(%)白蛋白 35～52 57.0～68.0α1球蛋白 1.0～4.0 1.0～5.7α2球蛋白 4.0～8.0 4.9～11.2β球蛋白 5.0～10.0 7.0～13.0γ球蛋白 6.0～13.0 9.8～18.2(2)临床意义电泳图谱可为临床疾病诊断提供依据。肾病型可见于急慢性肾炎、肾病综合征、肾功能衰竭等，图型表现为Alb降低，α2和β升高;肝硬化型可见于慢性活动性肝炎、肝硬变等，图型表现为Alb降低，β和γ增高，可出现β与γ难以分离而连接在一起的“β-γ”桥，此现象是由于肝脏纤维增生导致IgA增高所致;急性反应时相型常以α1、α2增高为特征;慢性炎症型则以Alb降低，α2、γ增高较为常见;M蛋白血症主要见于多发性骨髓瘤，病人有大量单克隆蛋白质(主要是IgG或IgA)，电泳时可在β和βγ之间出现一条峰形狭窄的区带，称M区带。注意事项1.通电时，不得接触槽内的缓冲液或CAM，以防触电。2.每次电泳时应交换电极以使两侧电泳槽内缓冲液的正负离子相互交换，以使缓冲液的PH维持在一定水平。3.电泳缓冲液的液面要保持一定的高度，过低可能会出现γ球蛋白的电渗现象(γ球蛋白向阴极移动)，同时电泳槽两侧的液面应保持在同一水平，否则，通过薄膜时有虹吸现象，将会影响蛋白质分子的泳动速度。4.电泳失败或图谱不理想的常见原因(1)电泳图谱不整齐或蛋白各组分分不佳：点样过多;点样不均匀、不整齐;薄膜过湿，样品扩散;点样速度太慢，薄膜表面局部干燥或薄膜未完全浸透或温度过高致使膜面局部干燥或水分蒸发;缓冲液变质;电泳时薄膜放置不正，歪斜、弯曲，与电流方向不平行;样品不新鲜;电流过低;CAM质量不好，薄膜结构过分细密，透水性差，导电差等。(2)染色后白蛋白中间着色浅：染色时间不够或染色液陈旧;白蛋白含量过高，可减少血清用量或延长染色时间。(3)电泳速度慢：电流过低;供给薄膜的缓冲液不足，连接薄膜与缓冲液的滤纸或纱布过薄;温度过低;薄膜结构过分细密，透水性差，导电差;缓冲液水分蒸发，致使离子强度增大。(4)薄膜透明不完全：透明液陈旧;浸泡时间不足;烘箱温度未到90℃即把薄膜放入。5.染料问题：各种染料对血清各组分有不同的亲和力，大多数染料对白蛋白的亲和力大于球蛋白。如氨基黑10B对球蛋白的结合力为白蛋白的80%，因此常导致白蛋白结果偏高，球蛋白偏低。用丽春红S染色，效果优于氨基黑10B。丽红是一种指示剂，PH12.5时呈紫色。在酸性溶液中它的最大吸收峰在523nm左右，呈对称性。在血清蛋白正常浓度范围内，丽春红S能与各蛋白质组分成正比例结合，而氨基黑10B则对白蛋白染色过深，区带中容易出现着色不全的小点，不够理想。6.样品要求点在粗糙面(无光泽面)，否则样品很难吸入膜内。电泳时最好将点有样品的一面朝下，以防电泳过程中水分蒸发，影响电泳结果。7.标本应新鲜，不得溶血。溶血标本会使β球蛋白假性升高，因血红蛋白电泳位置在β球蛋白区域内。

1、动口再动手：对于电动搅拌器出现故障时，不应急于先动手，应先询问产生故障的前后经过及故障现象。对于生疏的设备，还应先熟悉电路原理和结构特点，遵守相应规则。拆卸前要充分熟悉每个电气部件的功能、位置、连接方式以及与周围其他器件的关系，在没有组装图的情况下，应一边拆卸，一边画草图，并记上标记。2、先外部后内部：应先检查设备有无明显裂痕、缺损，了解其维修史、使用年限等，然后再对机内进行检查。拆前应排除周边的故障因素，确定为机内故障后才能拆卸，否则，盲目拆卸，可能将设备越修越坏。3、机械后电气：只有在确定机械零件无故障后，再进行电气方面的检查。检查电路故障时，应利用检测仪器寻找故障部位，确认无接触不良故障后，再有针对性地查看线路与机械的运作关系，以免误判。4、先静态后动态：在设备未通电时，判断电气设备按钮、变压器、热继电器以及保险丝的好坏，从而判定故障的所在。通电试验，听其声、测参数、判断故障，最后进行维修。如在电动机缺相时，若测量三相电压值无法着判别时，就应该听其声，单独测每相对地电压，方可判断哪一相缺损。5、先清洁后维修：对污染较重的电气设备，先对其按钮、接线点、接触点进行清洁，检查外部控制键是否失灵。许多故障都是由脏污及导电尘块引起的。6、先电源后设备：电源部分的故障率在整个故障设备中占的比例很高，所以先检修电源往往可以事半功倍。7、先故障后调试：对于调试和故障并存的电气设备，应先排除故障，再进行调试，调试必须在电气线路速的前提下进行。8、先普遍后特殊：因装配配件质量或其他设备故障而引起的故障，一般占常见故障的50%左右。电气设备的特殊故障多为软故障，要靠经验和仪表来测量和维修。我们在实验中出现电动搅拌器损坏时，切不可焦急，应当冷静应对，通过以上我们讲解的8点进行相应处理，先判断故障原因，再对症下药，定能事半功倍，此外我们在日常使用时也要注意电动搅拌器的保养，尽可能的延长设备使用寿命。

1、按仪器说明书的规程操作　　验收仪器时，不仅要清点所有零部件是否齐全，还要检查仪器说明书是否齐备，并妥善保存这些资料。在独立操作仪器之前，一定要认真阅读有关说明书，并严格按规程操作。这是做好仪器分析的前提条件，而且一旦仪器出了问题，也好与厂商交涉。 2、准备一份色谱柱测试标样　　色谱柱性能是保证分析结果的关键。新买的色谱柱，首先要用测试样品评价其性能。如果用色谱柱厂商提供的测试条件测试而结果不合格时，就可要求退货或换货。更重要的是，此后的使用过程中色谱柱性能会变化，当分析结果有问题时，可以用测试标样测试色谱柱，并将结果与前一次测试结果相比较，这有助于确定问题是否出在色谱柱，以便于采取相应的措施排除故障。 3、使用纯度合乎要求的载气　　载气一定要用高纯级的，以避免干扰分析和污染色谱柱或检测器。要知道一根色谱柱的价格是一瓶高纯氮气或氢气价格的20倍以上。如果因为要省钱而用普通气体作载气，可能是丢了西瓜拣了芝麻。检测器用辅助气体最好也用高纯级的。虽然在灵敏度要求不高时，可用普通气体，但其代价可能是检测器被污染。及时更换色谱柱密封垫。 4、及时更换石墨密封垫石墨密封垫漏气是GC最常见的故障之一。一定不要在不同的柱上重复使用同一密封垫，即使同一根柱卸下重新安装时，最好也要换新密封垫，这样能保证更高的工作效率。如果装上色谱柱后发现漏气而再更换密封垫，就要花费更多的时间，即使旧垫仍能使用，也要比原来多拧紧一些，弄得不好就会拧断毛细管色谱柱。　　5、定期更换气体净化器填料变色硅胶可据颜色变化来判断其性能，但分子筛等吸附有机物的净化器就不好用肉眼判断了。所以须定期更换，最好3个月更换一次。如果硅胶与分子筛装在一起，则更换硅胶时也要更换分子筛。 6、使用性能可靠的气体减压器　　新的减压器在使用时一定要试漏，在长期的使用过程中也要经常检漏，这是发现问题的一个好习惯。如果不注意这个问题，轻则造成气体浪费，重则出现安全问题，到时悔之晚矣。 7、定期更换进样衬垫　　进样口衬垫漏气是GC常见故障之一。另外，衬垫的老化降解也会给分析带来干扰。比如其碎屑掉进汽化室内也可能导致鬼峰。至于多长时间换一次衬垫，则要看所分析的样品性质和分析条件而定。常规实验室一般每天更换一个进样衬垫。无论如何，一个衬垫的连续使用时间不要超过一周。 8、及时清洗注射器　　保持注射器清洁能避免样品记忆效应的干扰。更换样品时要清洗，用同一样品多次进样时也要用样品本身清洗注射器。一支注射器暂时不用时(比如下班)，更要彻底清洗，否则残留其中的样品可能将针芯粘牢，造成注射器报废。使用自动进样器的用户也应注意此问题，最好是经常更换和清洗注射器。 9、定期检查并清洗进样衬管　　仪器长期使用后，进样衬管内会有焦油状物质，这是样品中的不挥发成分造成的。此外还会有颗粒状物质积存(隔垫碎屑，样品中的固体物质)这些都会干扰分析的正常进行。因此要定期检查，及时清洗。注意，在衬管中填充一些经硅烷化处理的石英玻璃毛，既可提高样品的汽化效率，又能防止隔垫碎屑进入色谱柱造成堵塞。 10、更换零部件要逐一进行　　修理仪器时，不要一次更换多个部件，那样会造成故障原因的判断失误。应该一次更换一件，经测试后再更换另一件。这样可能更便于准确地判断故障原因，同时避免不必要的开支。 11、做好仪器使用和分析记录并定期归档　　这是仪器的履历，应逐日记录，包括操作者、分析样品及条件、仪器工作状态等等。一旦仪器出现问题，这是查找原因的重要资料。

在实验室中我们经常性的遇到要让实验样品处于一种特定的环境温度下进行实验，低温恒温或高温恒温。在高温恒温中我们经常用的高温恒温油槽，因为油的沸点很高，如果是水中则可以使用恒温水浴箱、恒温水浴锅、低温恒温槽等仪器，这些仪器在水中的恒温效果是很显著的；如果需要低温恒温状态，一般都是采用低温恒温槽，不仅可以保持低温，而且随着技术的进步，在恒温状态下的精度也在慢慢提高，珀西瓦尔低温恒温槽的精度已达到0.005。技术的进步，科技的发展，这些低温恒温槽也在翻天覆地的变化着，精度更高、控温更精准，因此在选择的时候也会遇到诸多的问题，不知道什么样的仪器才最适合自己使用，什么样的仪器质量才最可靠。一般我们在选择低温恒温槽的时候可以考虑以下几点，相信对你的选择会有或多或少的帮助。1、在打开低温恒温槽网页或小册子时，你可以首先观察仪器的图片，一般仪器首先给你展示的、是它的面板设计，仪器虽说质量与面板设计并非成正比，但是一个好的仪器，生产商在研发时还是很在意的，就像衣服质量再好，难看也卖不出去，一看卖相而看材质2、目前市场上大部分低温恒温槽都是采用304不锈钢材质的，外表采用简易铸钢结构，如果发现仪器不是使用304不锈钢内胆，或316不锈钢内胆，你就可以考虑简单的看看了，因为仪器一旦涉及强酸强碱介质，其他常用的不锈钢内胆无法承受。如无特殊需要外壳可选用建议铸钢材质，相比整机不锈钢结构节省成本。3、仪器内是否添加其他物件，因为有些实验需要添加一些物件，如固定离心管的不锈钢试管架等，这些可以根据你的实验需要，进行询问。避免出现误买。4、是否有内外循环，这很重要，在低温恒温槽中，内外循环泵是仪器高精度恒温的重要保证，可查看仪器面板上是否有泵循环按钮或装置。5、多向厂家咨询关于低温恒温槽这一块的知识和产品信息，多方面了解低温恒温槽的特点和性能是否满足自己实验室的需求，现在许多低温恒温槽除了外形，体积等一些东西不能变化，其他许多都是很灵活的。6.还有一些仪器参数的细节上需要注意，切记不可马虎了事

 手提式紫外分析仪短波紫外线灯（254nm），手提式紫外分析仪检测灯利用紫外光对物质进行荧光分析检定，目前已得到广泛应用。手提式紫外检测灯，是目前国内比较理想的小型紫外线分析仪器，本仪器由于采用了电子集成块起动光源，所以小巧方便，随开随用，产品面世以来，得到了广大用户的一致好评。嘉鹏ZF-5手提式紫外检测灯它可以用来检测核酸电泳胶中的DNA-E·B谱带和CsC1密度梯度离心管中的DNA条带。同时手提式紫外检测灯也使用于：生物遗传工程，分子遗传学，医学卫生，生物制品，药物研究，卫生防疫，染料化工，石油化工，纺织行业，公安政法部门，文物考古部门，凡需要进行荧光分析检定的部门都可使用。254nm短波手提式紫外分析仪（紫外线分析仪）荧光分析原理     普通处于基态的物质分子受到激发光（即紫外线）照射后，吸收了激发的能量，物质分子处于激发状态。激发态分子的能量一部分消耗于振动，于是分子处于振动能级，从振动能级回到基态时多余的能量依其它的形式放出来即为荧光，而不同物质能发出不同波长的荧光，人们可以根据不同光色的荧光和荧光的强弱来判断不同的物质和含量多少。这就是荧光分析。本仪器采用波长254nm（短波）的单色光源。利用低压汞灯在波长254nm处有强大的能量发射。使用透紫外线滤片，将可见光滤去从而得到高能量紫外单色光，以供荧光分析。365nm长波手提式紫外分析仪（长波紫外线分析仪）荧光分析原理     本分析仪采用低压水银蒸气放电，低压水银灯主要发射的是254nm短波紫外线采用光量子转调法，在灯管内壁涂上一层特性荧光材料，使它吸收254nm短波紫外线而在365nm附边形成较宽的紫外光谱带从而它具有低压汞灯功耗小，随关随开，随开随用的特点，经过滤色片滤去可见光，得到高能量长波紫外线。

蠕动泵可以叫恒流泵，属于恒流泵的一种，因为输送精度最高可以达到0.5%，因此起到恒流的作用。具体分析如下：蠕动泵的原理是由转轮挤压着泵管并转动从而推动管内的流体向前移动从而产生流体流动的，就象用两根手指夹挤一跟充满液体的软管一样，随着手指的移动，管内形成负压，液体随之流动。因此蠕动泵是一种容积泵，泵管内的液体被泵头的转轮推动着流出来，转轮离开后，泵管会稳定的回弹吸入新的液体。我们的蠕动泵头每转一圈会产生一个恒定不变的流量，单位时间内转速每增加一圈，流量也会相同的增加一圈。因此蠕动泵在规定的转速内产生的流量就是恒定的，由于蠕动泵具有这一特性，因此用户常常将蠕动泵称做恒流泵。蠕动泵属于恒流泵的一种，因为有很多种泵都可以实现恒流的功能，比如隔膜泵、柱塞泵、螺杆泵等，所以蠕动泵只是恒流泵的一种。 蠕动泵作为恒流泵具备如下优点：1,洁清无污染：流体只通过和接触蠕动泵软管。2,精度高：恒流、重现精度高达0.5%，流量可精确调节。3,低剪切力：是输送剪切敏感，侵蚀性强流体的理想工具。4,耐腐蚀能力：可以输送各种流体、如有机溶机、腐蚀性液体。5,可空转、干运转：也可以输送空气或气液固三相混合输送。6,具备自吸能力：可以自吸，无需灌泵，无需排空。7,具务截止阀功能、不会虹吸、无密封件、有截止阀和单向阀功能。8,可双向输送功能：改泵泵转轮的方向就可以实现反抽和回吸功能。9,维护简单：只需更换蠕动泵软管，无阀门和密封件的更换。10,可以耐受较高的温度：蠕动泵可以连续输送80摄氏度的液体。 在选择恒流泵的时候根据用户的输送需要，如果仅仅需要恒流泵的稳定输送功能，那会有很多种泵可以选择，选择一款适合自己工艺又最经济的产品才是适合自己需要的产品。

在检定(测试)中我们发现，对天平进行首次计量测试时误差较大,究其原因，相当一部分仪器，在较长的时间间隔内未进行校准，而且认为天平显示零位便可直接称量。（需要指出的是，电子天平开机显示零点，不能说明天平称量的数据准确度符合测试标准，只能说明天平零位稳定性合格。因为衡量一台天平合格与否，还需综合考虑其它技术指标的符合性）。因存放时间较长，位置移动，环境变化或为获得精确测量，天平在使用前一般都应进行校准操作。校准方法分为内校准和外校准两种。德国生产的沙特利斯，瑞士产的梅特勒，以及本厂出产的AL 系列分析天平平均有校准装置。如果使用前不仔细阅读说明书很容易忽略“校准"操作,造成较大称量误差。         如何对天平进行外校准。方法：轻按CAL键当显示器出现CAL-时，即松手，显示器就出现CAL-100其中“100"为闪烁码，表示校准砝码需用100g的标准砝码。此时就把准备好“100g"校准砝码放上称盘，显示器即出现"－－－－"等待状态，        经较长时间后显示器出现100.000g，拿去校准砝码，显示器应出现0.000g，若出现不是为零，则再清零，再重复以上校准操作。（注意：为了得到准确的校准结果最好重复以上校准操作步骤两次。）      方法如下:           天平置零位，然后持续按住“CAL"键直到CALint出现为止，下述情况将在校准时显示：           天平置零           内部校准砝码装载完毕           天平重新检查零位           天平报告校准过程           天平报告校准完毕           天平自动回复到称重状态  有的人认为在电子天平量程范围内称量的物体越重对天平的损害也就越大。这种认识是不完全正确的。一般衡器最大安全载荷是它所能够承受的、不致使其计量性能发生永久性改变的最大静载荷。电磁力自动补偿电路原理，当秤盘加载时（注意不要超过称量范围），电磁力会将秤盘推回到原来的平衡位置，使电磁力与被称物体的重力相平衡，只要在允许范围内称量大小对天平的影响是很小的，不会因长期称重而影响电子天平的准确度。

1.色谱柱断裂熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许破裂它就会断裂。聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。最后在薄弱处发生断裂。通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成出现薄弱处。通常锋利的尖或边划管线时会造成划痕。色谱柱挂钩和标签、GC 柱温箱的金属边、色谱柱切割器以及实验室实验台上的各种物品都带有锋利的尖或边。色谱柱自身断裂的情况很少。色谱柱制造业试图找出所有有缺陷的管线并避免在已制好的色谱柱中使用这些管线。 直径较大的色谱柱更容易断裂。也就是说在处理0.45-0.53 mm 内径的管线时要比处理0.18-0.32 mm 内径的管线更加谨慎以防断裂。已断裂的色谱柱并非不能用。如果已断裂的色谱柱保持在高温下连续运行或运行多个温度程序，则将十分容易损坏。已断裂色谱柱的后半段暴露在高温的氧中会迅速损坏固定相。而色谱柱的前半段因有载气通过仍会保持完好。如果已断裂的色谱柱未经加热而是仅在高温或含氧的环境下暴露很短时间，则后半段将不会受到任何严重损坏。可以通过安装接头来接上已断裂的色谱柱。任何合适的接头都可重新连接色谱柱。一支色谱柱上不能装入超过2-3 个接头。多个接头会造成死体积（拖尾峰）问题。 2.热损坏超出色谱柱的温度上限会造成固定相和管表面的加速损坏。这样会造成色谱柱的过分流失，活性组分形成拖尾，以及/或降低柱效（分离度）。幸好热损坏是一个很慢的过程，因此，在色谱柱严重损坏之前还有一段很长的时间可在高于温度极限的条件下使用。当有氧存在时会大大加速热损坏。对有泄漏或载气中氧含量较高的色谱柱进行过度加热可快速并永久地损坏该柱。将GC 的柱温箱最高温度设定为色谱柱温度极限或稍高于该温度极限是防止热损坏的最佳方法。这样可避免色谱柱意外的过热。即使色谱柱受到热损坏，仍然可使用。把色谱柱从检测器上卸下来。在色谱柱的恒温温度极限下，将其加热8-16 小时。把色谱柱接到检测器的一端截去10-15 cm。按正常情况安装色谱柱并进行老化。色谱柱将不能恢复到原来的性能，但仍可使用。在热损坏之后色谱柱的寿命会缩短。 3.氧损坏氧是许多毛细管GC 柱的大敌。在室温或近于室温的温度下，不会损坏色谱柱，但随柱温的升高色谱柱将被严重损坏。通常，对于极性固定相，在较低的温度和氧浓度条件下，就可发生严重损坏。长时间暴露在氧气中会出现氧损坏的问题。短时间暴露在氧中（如注射空气或快速取下隔垫螺母）不会有什么问题。 载气流路（例如气路、接头、进样器）中的泄漏往往是暴露在氧中的源头。随着色谱柱的加热，会很快地损坏固定相。这样会造成色谱柱的过度流失，活性组分形成拖尾，以及/或降低柱效（分离度）。其征兆与热损坏相似。不幸的是发现氧损坏之时色谱柱已经受到严重的破坏，在不太严重的情况下，色谱柱仍可使用，但性能有所下降。在严重的情况下，色谱柱将完全不能使用。 让系统避免和氧接触和避免泄漏是不受到氧损坏最有效的方法。良好的维护GC 系统包括定期检查气路和压力表的泄漏、定期更换隔垫、使用高质量的载气、安装和更换氧捕集阱、在气体钢瓶完全用完之前就更换。 4.化学损坏有相当少的化合物能损坏固定相。不挥发性化合物（高分子量或高沸点）进入色谱柱通常会降低色谱柱的性能，但不会损坏固定相。使用溶剂冲洗色谱柱通常可消除残留并恢复色谱柱的性能。要避免进入色谱柱的主要化合物是无机酸和碱。酸类包括盐酸、硫酸、硝酸、磷酸等。碱类包括氢氧化钾、氢氧化钠 和氢氧化铵。大多数这些酸和碱不易挥发，会积聚在色谱柱前端。如果不清除它们，将会损坏固定相。这样会造成色谱柱的过分流失，活性组分形成拖尾，以及/或降低柱效（分离度）。其征兆和热损坏及氧损坏相似。盐酸和氢氧化铵是这一类化合物中危害最小的。这两种物质易溶于样品中的水。如果水不停留或几乎不停留在色谱柱中，HCl 和NH4OH 在色谱柱中停留的时间就会很短。这就消除或降低了这些化合物所造成损坏的可能性。因此，如果样品中含有HCl 或NH4OH，使用不保留水的环境或色谱柱，即可相对减小这些化合物对色谱柱的危害。只有全氟酸是可以损坏固定相的有机化合物。这些示例包括三氟乙酸、五氟丙酸和七氟丁酸。它们需在高浓度（例如1% 或更高）时才有破坏作用。大多数问题发生在不分流进样或大口径直接进样的过程中，其中大量的样品会沉积在色谱柱前端。由于化学损坏多发于色谱柱的前端，因此把色谱柱的前端修整或切割掉1/2-1 米通常可以消除所有色谱方面的故障。在更为严重的情况下，可能需要切割掉5 米或更长的一段。使用保护柱或保留间隙柱会将对色谱柱的损坏降至最小，但是，需要经常修整保护柱。酸或碱常常会破坏熔融石英管线的脱活表面，从而引起活性化合物的峰形变坏。 5.色谱柱被污染在毛细管GC 中色谱柱被污染是很普遍的问题。不幸的是它和各种常见的问题相似，因此常常被错误地判断为其他故障。通常，受污染的色谱柱虽然没有损坏，但却不能再使用。有两种基本的污染物：不挥发性污染物和半挥发性污染物。不挥发性污染物或残留物不会洗脱出来，而会积聚在色谱柱内。这样色谱柱即成为涂渍了残留物的色谱柱，因而影响了溶质在溶入固定相和洗出固定相的正确分配。而且残留物还会与活性溶质相互作用，从而引起峰的吸附问题（例如拖尾峰或峰面积减少）。活性溶质是指含有羟基(-OH) 或氨基(-NH) 以及某些硫醇基(-SH) 和醛的物质。积聚在色谱柱内的半挥发性污染物或残留物，最终会被洗脱出去。但需要几个小时甚至几天才完全从色谱柱中洗脱。与不挥发性残留物一样，它们也会引起峰形和峰面积出现问题，此外，通常还会引起很多基线问题（不稳定、偏离、漂移、鬼峰等）。污染物的来源有许多，其中进样是最主要的来源。萃取自基质复杂的样品。如生理体液和组织、土壤、废水、地下水和类似的基质均含有大量的半挥发性和不挥发性物质。即使采用了仔细并彻底的萃取方法，样品中还是会含有少许这些物质。进行几次直到几百次进样后，积聚的残留会引发问题。进样技术如柱上进样、不分流进样、和大口径柱直接进样均会将大量样品进到色谱柱中，因此采用这些进样方法常常会造成色谱柱的污染。 有时，污染物来源于气路和捕集阱、密封垫圈和隔垫颗粒中的材料，或任何与样品接触的物质（样品瓶、溶剂、注射器、移液管等）。如果突然出现污染问题，但在前几个月或前几年类似的样品均未导致出现任何问题，则说明问题来自于这些种类的污染物。 最大限度地减少半挥发性和不挥发性样品残留是减少污染问题的最佳方法。然而是否存在污染物以及存在哪些污染物通常是不为人知的。严格和彻底的净化样品是防止出现污染问题的最佳方法。使用保护柱或保留间隙柱通常可以减轻色谱柱污染所引发问题的严重程度或推迟这些问题的出现。如果色谱柱已被污染，则最佳方法是使用溶剂冲洗色谱柱以去除污染物。建议不要使用长时间加热（通常称为烘烤色谱柱）的方法来处理受到污染的色谱柱。因为烘烤色谱柱可能会把某些污染物残留变成不能溶解的物质而无法通过溶剂清洗将它们从色谱柱中去除。如果出现这种情况，通常就无法再恢复色谱柱了。有时可将色谱柱切割为两段，后半段可能仍可使用。在色谱柱的恒温极限下烘烤色谱柱时，时间应不超过1-2 个小时。

光谱分析法是根据物质发射的电磁辐射或电磁辐射与物质相互作用而建立起来的一类分析化学方法。这些电磁辐射包括从g射线到无线电波的所有电磁波谱范围，而不只局限于光学光谱区。电磁辐射与物质相互作用的方式有发射、吸收、反射、折射、散射、干涉、衍射、偏振等。 光谱分析法可分为光谱法和非光谱法两大类。 光谱法是基于物质与辐射能作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。按照电磁辐射和物质相互作用的结果，可以产生发射、吸收和散射三种类型的光谱。  一、发射光谱法物质通过电致激发、热致激发或光致激发等激发过程获得能量，变为激发态原子或分子M* ，当从激发态过渡到低能态或基态时产生发射光谱。通过测量物质的发射光谱的波长和强度来进行定性和定量分析的方法叫做发射光谱分析法。 发射光谱的类型： 1.线光谱当辐射物质是单个的气态原子时，产生紫外、可见光区的线光谱。通过内层电子的跃迁可以产生X射线线光谱。 2.带光谱带光谱是由许多量子化的振动能级叠加在分子的基态电子能级上而形成的。 3.连续光谱固体加热至炽热会发射连续光谱，这类热辐射称为黑体辐射。通过热能激发凝聚体中无数原子和分之振荡产生黑体辐射。 被加热的固体发射连续光谱，它们是红外、可见及长波侧紫外光区分析仪器的重要光源。根据发射光谱所在的光谱区和激发方法不同，发射光谱法分为： 1. g 射线光谱法 天然或人工放射性物质的原子核在衰变的过程中发射a和b粒子后，往往使自身的核激发，然后该核通过发射g射线回到基态。测量这种特征g射线的能量（或波长），可以进行定性分析，测量g射线的强度，可以进行定量分析。 2. X射线荧光分析法原子受高能辐射激发，其内层电子能级跃迁，即发射出特征X射线，称为X射线荧光。用X射线管发生的一次X射线来激发X射线荧光是最常用的方法。测量X射线的能量（或波长）可以进行定性分析，测量其强度可以进行定量分析。 3. 原子发射光谱分析法用火焰、电弧、等离子炬等作为激发源，使气态原子或离子的外层电子受激发发射特征光学光谱，利用这种光谱进行分析的方法叫做原子发射光谱分析法。波长范围在190 - 900nm，可用于定性和定量分析。 4. 原子荧光分析法气态自由原子吸收特征波长的辐射后，原子的外层电子从基态或低能态跃迁到较高能态，约经10-8 s，又跃迁至基态或低能态，同时发射出与原激发波长相同（共振荧光）或不同的辐射（非共振荧光），称为原子荧光。 发射的波长在紫外和可见光区。在与激发光源成一定角度（通常为90°）的方向测量荧光的强度，可以进行定量分析。 5. 分子荧光分析法某些物质被紫外光照射后，物质分子吸收了辐射而成为激发态分子，然后回到基态的过程中发射出比入射波长更长的荧光。测量荧光的强度进行分析的方法称为荧光分析法。波长在光学光谱区。 6. 分子磷光分析法物质吸收光能后，基态分子中的一个电子被激发跃迁至第一激发单重态轨道，由第一激发单重态的最低能级，经系统间交叉跃迁至第一激发三重态（系间窜跃），并经过振动弛豫至最低振动能级，因此，由此激发态跃迁回至基态时，便发射磷光。 根据磷光强度进行分析的方法成为磷光分析法。它主要用于环境分析、药物研究等方面的有机化合物的测定。 7. 化学发光分析法由化学反应 提供足够的能量，使其中一种反应的分子的电子被激发，形成激发态分子。激发态分子跃回基态时，就发出一定波长的光。其发光强度随时间变化，并可得到较强的发光（峰值）。 在合适的条件下，峰值与被分析物浓度成线性关系，可用于定量分析。由于化学发光反应类型不同，发射光谱范围为400 - 1400nm。 二、吸收光谱法当物质所吸收的电磁辐射能与该物质的原子核、原子或分子的两个能级间跃迁所需的能量满足△E = hv的关系时，将产生吸收光谱。 吸收光谱法可分为： 1. Mōssbauer（莫斯鲍尔）谱法由与被测元素相同的同位素作为g射线的发射源，使吸收体（样品）原子核产生 无反冲的g射线共振吸收 所形成的光谱。光谱波长在g射线区。 从Mōssbauer谱可获得原子的氧化态和化学键、原子核周围电子云分布或邻近环境电荷分布的不对称性以及原子核处的有效磁场等信息。 2. 紫外-可见分光光度法利用溶液中的分子或基团在紫外和可见光区产生分子外层电子能级跃迁所形成的吸收光谱，可用于定性和定量测定。 3.原子吸收光谱法利用待测元素气态原子对共振线的吸收进行定量测定的方法。其吸收机理是原子的外层电子能级跃迁，波长在紫外、可见和近红外区。 4. 红外光谱法利用分子在红外区的振动- 转动吸收光谱来测定物质的成分和结构。 5. 顺磁共振波谱法在强磁场作用下电子的自旋磁矩与外磁场相互作用分裂为磁量子数Ms值不同的磁能级，磁能级之间的跃迁吸收或发射微波区的电磁辐射。在这种吸收光谱中不同化合物的耦合常数不同，可用来进行定性分析。根据耦合常数，可用来帮助结构的确定。 6. 核磁共振波谱法在强磁场作用下，核自旋磁矩与外磁场相互作用分裂为能量不同的核磁能级，核磁能级之间的跃迁吸收或发射射频区的电磁波。利用这种吸收光谱可进行有机化合物结构的鉴定，以及分子的动态效应、氢键的形成、互变异构反应等化学研究。 三、Raman散射频率为n0的单色光照射到透明物质上，物质分子会发生散射现象。如果这种散射是光子与物质分子发生能量交换的，即不仅光子的运动方向发生变化，它的能量也发生变化，则称为Raman散射。 这种散射光的频率（νm）与入射光的频率不同，称为Raman位移。Raman位移的大小与分子的振动和转动的能级有关，利用Raman位移研究物质结构的方法称为Raman光谱法。

低温恒温槽应用领域：广泛用于石油、化工、电子仪表、物理、化学、生物工程、医药卫生、生命科学、轻工食品、物性测试及化学分析等研究部门，高等院校，企业质检及生产部门，为用户工作时提供一个热冷受控，温度均匀恒定的场源，对试验样品或生产的产品进行恒定温度试验或测试，也可作为直接加热或制冷和辅助加热或制冷的热源或冷源。对半导体制造装置发热部的冷却，单晶片洗净转载、印刷机、自动夹座安装装置、喷涂装置、离子镀装置、蚀刻装置、单晶片处理装置、切片机、包装机、显影剂的温度管理、露光装置、生磁部分的加热装置等。对激光装置发热部分的冷却：激光加工、熔接机的发热部分、激光标志装置、发生装置、二氧化碳激光加工机等。低温恒温槽常见问题：1、机器零配件老化现象机器表现：制冷速度越来越慢解答问题：检查设备排气口和散热器是否正常工作！低温恒温槽槽内水循环使用简单，日常做好定期维护和保养工作是必不可少的，精密仪器很多常见的故障都是因为平时保养工作做不到位而引起的。水循环的电功率和制冷剂从负载中带走的热量都需要从前置通风罩处的散热器中排出，如果前置通风罩上吸满灰尘和柳棉等就会妨碍热量的散发，导致制冷效果将大打折扣。桂戈技术人员经验告知：通常在正常的使用条件下制冷量下降都是因为通风散热效果太差或环境温度太高引起的。2、机器噪音变大机器表现：机器正常，但是，开机后声音比以前大了！解答问题：此问题也是日常维护保养没有做到位而引起的，原理很简单，大家都知道，水槽是用来装水的，水里面多多少少都会有杂质，蒸馏水在加到水箱后也不可能一丁点杂质都没有，很多实验的时候机器做水循环，一般操作温度都设置在20℃，这个温度特别适应微生物的繁衍，时间长了之后这些微生物会堵塞水路的过滤器而造成回水不畅，水泵就会有较大的噪音产生！另外，微生物也可能是制冷量变小的罪魁祸首，在微生物大量繁殖后，会附在换热器的表面，导致传热效果变差，制冷量变小!桂戈技术人员建议：请做好机器的日常维护工作，定时清洗槽内，在长期不使用的情况下保持槽内的干燥!3、类似漏水，其实是温差导致的结露现象问题表述：很多客户反映低温恒温槽有漏水现象，机器在做水循环的时候，时不时地滴水在地面解答问题：我司产品严格按照出厂标准测试，一般情况下不会出现漏水现象，此问题，也经技术人员测试，机器在使用过程中，主要是环境的温度较高，槽内温度较低，导致水路中的水泵、水管接头、外接水管处容易凝结露水，并非水路漏水现象！实验室需要保持洁净，这种现象，在使用低温恒温槽做水循环的时候可以打开实验室的空调降低室内温度或者是使用除湿器都可以避免结露现象！

一、用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?答：关于漂移问题：1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题1、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定。2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。 二、色质联用中毛细柱的选择应注意什么问题?答：1、柱效要高2、热稳定性好3、化学惰性强 具体选择应注意：1、柱极性。根据分析样品选择不同极性的柱子进行分析。2、柱子内径。内径大小决定柱容量。3、液膜厚度。分析样品温度一不一样，对膜厚有不同要求，温度高液膜要厚，温度低液膜要薄。4、柱长度。柱越长，柱效越高，分离效果越好，但也存在吸附问题，柱子过长，分析时间长，因此要根据样品考虑柱子长度。5、外涂层(柱体)的选择。6、另外还有仪器型号、分析对象等因素。 三、液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?答：1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子。 四、从那些方面可以简单判别毛细管柱子的热稳定性好坏?答：1、分配容量(或容量因子)K，好的柱子在高温运行后，分配容量K不应有明显的下降，否则，说明柱子的热稳定性不好。2、理论塔板数n，热稳定性好的柱子经受高温后，理论塔板数应基本保持恒定。3、柱子的极性。热稳定性好的柱子，高温前后极性变化不大，具体表现为保留指数I值没有大的变化。4、噪声。热稳定性好的柱子在高温下使用后，噪声不能增加。5、柱子的去活层，毛细管柱子涂固定液前内部一般要用去活性试剂去活以增加惰性。质量好的毛细管柱子高温后，去活层不应该变化，表现在对强极性样品或酸碱性样品的吸附性不能增加。 五、为什么进样器内的玻璃衬套会对色谱行为造成影响?答：进样器内的玻璃衬套主要有下列作用：1、提供一个温度均匀的汽化室，防止局部过热。2、玻璃的惰性不如不锈钢好，减少了在汽化期间样品分解的可能性。3、易于拆换清洗 ，以保持清洁的汽化室表面，一些痕量非挥发性组分会逐渐积累残存于汽化室，高温下会慢慢分解，使基流增加，噪声增大，通过清洗玻璃衬套可以消除这种影响。4、可根据需要选择管壁厚度及内径适宜的玻璃衬套，以改变汽化室的体积，而不用更换整个进样加热块。从以上几个方面可以知道玻璃衬套对色谱行为造成影响的原因。 六、毛细管色谱分流进样时，非线性分流的主要原因是什么?答：1、进样器温度太低，样品汽化不完全，发生分级分流。2、进样器温度太高，某些组分可能发生热分解，也有的样品可能发生催化分解，或样品部分地被吸附在进样器内表面上。3、在分流点以前样品没有混合均匀或混合不充分。4、系统的进样垫，柱接头等地方漏气。 七、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法答：1、样品量不足：解决办法为增加样品量。2、样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子。3、样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器。4、检测器衰减太多：调整衰减即可。5、检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数。6、检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。7、检测池中有气泡：解决办法为排气。8、记录仪测压范围不当：调整电压范围即可。9、流动相流量不合适：调整流速即可。10、检测器与记录仪超出校正曲线：解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。 八、做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?答：原因可能有：1、泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理。2、比例阀失效，更换比例阀即可。3、泵密封垫损坏，更换密封垫即可。4、溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法。5、系统检漏，找出漏点，密封即可。6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。 九、做PGS/MS分析时，如何防止焦油状污染物进入毛细柱?答：聚合物，尤其是一些含氮、硫及卤素的高分子裂解时，常有焦油状物质产生。为防止这种焦油状物质进入毛细柱造成污染而使柱性能下降，可采用保护预柱，即在裂解器与毛细柱之间接一填充预柱，通过控制预柱温度而使焦油状物质滞留在预柱内，预注可置于GC气化室内，这样既容易控制温度，又减少系统的死体积，当然，预柱填料需经常更换。 十、我最近更换了另一种牌号的ODS柱，虽然分离情况仍可以，但保留时间不能重现，为什么?答：这是因为被分析物可能具有形成氢健的能力。尽管过去几年来，填料的制造技术有了极大的提高，但不同的厂商的ODS填料表面硅醇基的浓度不同。正是这些硅醇基可能与样品发生相互作用。因此，同一被分析物中的各组分在不同牌号的ODS柱上的相对保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物，如三乙基胺(TEA)，将会使硅醇基的成键能力饱和，从而保证不同牌号柱子上的相对保留时间具有较好的重现性。 十一、我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么?答：柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查。2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，(此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动性)。这时，如果柱压仍不下降，再检查。4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。 十二、高温毛细柱的使用寿命一般为多长?答：毛细柱寿命除决定于柱子本身的性能外，在很大程度上取决于使用情况，比如使用温度、样品状态，进样量等，如果在其使用温度范围内，样品干净，色谱柱不被污染的情况下，柱子寿命一般在2-3年之间。 十三、如毛细管柱被污染，柱效和分辨率降低，有何方法使它恢复?是否可通过老化来解决?答：根据柱污染程度可采取不同的方法来解决，如果污染不严重，污染物沸点不是太高，可通过老化来解决，但老化温度不可超过柱子的最高使用温度，且一般要较长时间(8-30小时)，如果污染较严重，或通过老化仍不能使柱性能恢复，那就必须采用溶剂清洗，通常是用5倍柱容积的溶剂(如正戊烷，二氯甲烷等)通过色谱柱。当然，清洗溶剂用的越多，对柱性能的损坏越大，清洗完后，在通载气老化一定时间，如果柱性能恢复，便可继续使用。必须指出：只有交联柱才能清洗，对于非交联柱，清洗柱会彻底失效，因为固定液被洗掉了，至于清洗用溶剂的选择，可参考说明书。 十四、BPX70毛细管柱是否可用于GC/MS分析?答：完全可以，BPX70为极性柱，使用温度范围宽(25-260℃)，程序升温可达290℃，流失低，适合于分析脂肪酸甲酯的各种位置和几何异构体，药物异构体，碳水化合物等。因BPX70为交联住，故用于GC/MS很稳定，污染后可清洗再生。

实验目的】（1）了解核酸琼脂糖凝胶电泳的原理，学会其具体的操作程序。（2）对提取的DNA进行检测，掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳，核酸分子是两性解离分子，在pH8.0时，DNA分子带负电荷在电场中向正极移动。采用琼脂糖凝胶介质作为电泳支持物，长度不同的DNA分子由于受凝胶阻遏作用大小不一，迁移速度不同，从而达到有效分离DNA的目的。【仪器、材料、试剂】（一）仪器1．电泳装置：电泳仪、水平电泳槽、梳子、制胶槽2．紫外观察：凝胶成像系统3．高速离心机（二）材料1．琼脂糖2．三羟甲基氨基甲烷（Tris）3．硼酸4．乙二胺四乙酸（EDTA）5．溴酚蓝6．蔗糖7．溴化乙锭（EB）8．DNA Marker（λDNA）9．称量纸、容量瓶、瓷盘、一次性手套、取液器、三角瓶、量筒（100mL）、Tip头（10uL）、胶带（三）试剂配制www.bbioo.com]1．5×TBE（pH8.0）（电泳缓冲液） 1000 ml配制方法：称取Tris 54g、硼酸 27.5 g，再加入20ml的0.5mol/LEDTA加三蒸水定容至1000ml摇匀后，转到准备好的输液瓶中，贴上标签，高压灭菌后，降至室温，4℃保存备用。2．凝胶加样缓冲液（6×）（指示剂） 100 ml称取溴酚蓝0.25 g、蔗糖40 g然后加入三蒸水定容至100ml摇匀后，4℃保存备用。【实验步骤】（一）、制胶1．称取0.4g（适量）琼脂糖置于三角瓶中，加入50ml 0.5×TBE缓冲液。2．微波炉加热，煮沸、振摇，反复加热、振摇2-3次，使琼脂糖充分融化。3．胶带将胶床两端粘好，底部粘严，以防凝胶渗漏，插好梳子。4．待胶冷却至60℃左右时，将融化的琼脂糖小心地倒入胶床中，速度要快，让 胶自然冷却至完全凝固（约需要20-30分钟）。5． 小心向上方拔出梳子，避免前后左右摇晃，以防破坏胶面及加样孔，去掉制胶槽两边的胶带，小心将胶和胶床放入电泳槽中，样品孔在阴极端。6． 向电泳槽中加入0.5×TBE电泳缓冲液，液面高于胶面约1-2mm。（二）、上样电泳1、取2μl上样液（溴酚蓝指示剂）于Parafilm上，加2μl水与2μl样品DNA反复吹吸，混匀。2、Tip头垂直伸入液面下胶孔中，小心上样于孔中。3、接通电源，打开高压开关，电泳开始以正、负极铂金丝有气泡出现为准。4、根据指示剂迁移的位置，判断是否中止电泳。切断电源后，再取出凝胶。5、凝胶取出后于含EB的溶液中染色20分钟。（三）、凝胶紫外观察：染色后的凝胶取出于紫外监测仪或凝胶成像系统中观察，照相，保存，记录结果。【注意事项】 1. 琼脂糖融化时，档位不宜太高。2. 制胶和加样过程中要防治气泡的产生。3. EB具有强诱变性，可致癌。必须戴手套操作，严格注意防护。4. 加样时，Tip头不宜插入样品孔太深，也不要穿破胶孔壁，否则样品渗漏或DNA带型不整齐。5. 电源接通时，应核实凝胶的方向是否正确。6. 电泳仪有电压显示，并不一定标志电泳槽已接通，应观察电极气泡出现情况。负极的气泡比正极多一倍，表示电泳已开始。7． 溴化乙锭可插入到DNA分子的双链中，在紫外光的照射下，插入溴化乙锭的DNA呈橙红色荧光，所以溴化乙锭可以作为荧光指示剂指示DNA含量和位置。 

　随着分子生物学，遗传工程研究和应用的发展，离心分离技术也?shy;历了数代更换，由低速离心机，高速离心机，超速离心机到超速冷冻离心机，超大容量冷冻离心机。在这里给您介绍些离心机在临床使用过程中常见的故障，排除方法及维护注意事项，希望对你的工作有所帮助。　　一.在使用过程中常出现电机不能起动的现象：　　1、主电源指示灯亮，这时应检查炭刷磨损程度，如炭刷磨损超过总量的三分之一，应及时更换新的炭刷。　　2、主电源指示灯不亮时，检查指示灯保险丝及室内配电板保险丝是否熔断，同时检查电源线是否接触良好，如保险丝断则应更换保险丝并保持电路畅通。　　3、还应检查真空泵表及油压指示值，如油压过高而主机也不能启动，必须检查各油路是否堵塞，特别是节流小孔是否畅通，如不畅通应清洗使之畅通。　　4、轴承损坏或转动受阻，轴承内缺油或轴承内有污垢较多而引起摩擦阻力增大，电机达不到额定转速，应及时清洗或更换轴承　　5、整流子表面有一层氧化物，甚至烧成凹凸不平或电刷与整流子外缘不吻合也可使转速下降，应清理整流子及电刷，使其接触良好。　　6、如转子线圈中短路或断路，可用万用表检查，重新绕制线圈。转子在使用时可因金属疲劳、超速、过应力、化学腐蚀、选择不当、使用中转头不平衡及温度失控等?shy;因而导致离心管破裂，样品渗漏，转子损坏。　　对于以上情况主要要求操作者熟练掌握操作程序，正确选用合适的离心管和离心转子，注意严格控制每一步操作操序，尽量减少人为的不必要的损伤，在转子的安全系数及保证期内使用。　二.电源问题：　　1、电源不通是导致冷冻机启动及制冷效果差的?shy;因之一，与电机不转的故障相同，应分别检查电源及保险丝。　　2、电压过低，安全装置故障也可使冷冻机不能启动，电压过低可能是电网电压低；配电板配线过多；电源线过长(理想长度为3米)等。电源线容量不够，不仅使电压降低，还会造成意外事故。当电源电压降到180—190VJ时，冷冻机不能启动，影响制冷效果。　　3、通风性能不好，如仪器安装在日光直射或通风不良处，散热器效果差，或散热器盖满灰尘，也中会影响制冷效果。　　4、离心管重量不平衡，放置不对称；转子孔内有异物，使负荷不平衡；转轴上端固定螺帽松动，转轴磨擦或弯曲；电机转子不在磁场中心会产生噪音；转子本身损伤等都可导致机体震动剧烈、响声异常。　　以上大部分均系不正确操作所致，在找出原因后，正确操作即可消除不正常现象。在工作过程中，如出现任何异常现象均应立即停机，不得强行运转，以免产生不必要的损失。　　三.下面简介离心机的维护及注意事项：　　1、离心机的安装应根据离心机的性能选择合作的地点放置，对一般低速离心机(台式)可放在平稳、坚固的台面上(它的底座都装有橡皮吸脚，借助于大气力压力及仪器本身的重量，紧贴于台面)；　　2、大容量低速离心机和高速离心机和高速冷冻离心机要相应地安放在坚实的地面上，水平放置。选择合适的转头离心机工作前，应将负荷平衡，重量误差越小越好，否则会引起剧烈震动，损坏离心转子及转轴。　　3、离心器支架离心器分离支架必需安置离心管后运作，严禁空架运转。

离心是在离心力的作用下，利用被离心样品物质的沉降系数、浮力、密度的差别，进行分离、浓缩、提取制备样品以及分析测定生物大分子分子量和纯度。按其工作方式可分为离心过滤、离心沉降(或澄清)及离心分离。   离心机的设计原理是利用驱动转头旋转时所产生的离心场力加快样品粒子的沉降速度，把样品中不同沉降系数或浮力密度差的物质分离开。决定离心力大小的因素除转速(Revolved per minute，r/min)和离心(转头)半径外，还与粒子在旋转运动中所受到的力(重力、浮力、摩擦力)之作用影响有关，离心力方向与重力呈垂直，故常用相对离心力(Relative centrifugal force，rcO表示，即相对于重力作用在旋转粒子上的离心力，用重力加速度g(980cm/s )作为量值，也称为“g-Force”，表达式为：RCF=o)~/980。  离心技术的关键是如何根据样品粒子和介质的性质以及转子的技术参数来确定离心力、转速和离心时间设置。粒子(细胞、细胞器及大分子的统称)的沉降或分离速率取决于离心力、粒子的大小、形状和密度以及沉降介质的密度和粘度。   根据用途、转速、功能配置可将医学实验室常用离心机几大类型，不同转速的离心机产生不同的离心力，具有不同的用途。   低速机型设计有较大容量(Large capacity centrifuge，≥12L)，主要用于细胞、血清、血浆以及批量样品的分离制备，另在生物制药领域发挥着较大作用；高速离心机(High speed cen—trifuge)主要用于某些亚细胞器结构、核酸、蛋白质、质粒、细菌的分离和制备；而超速离心机(Ultracentrifuge)．~0适应于病毒、核酸及蛋白质的分离纯化，进一步的分析研究还可采用分析型超速离心机。   近年来，有一种称之为“通用实验室离心机(Universal lab—oratory centrifuge)”的机型进入医学实验室，在性能上顺应了分子生物学、细胞生物学等相关领域实验技术的需要，倍受实验室工作者的关注。其特点是兼顾了低速机和高速机、微量和较大容量的性能，但体积小、重量轻、耗电小、操作简便；常见机型最高转速≥13000r/min，个别机型超过20000r/min，起始转速可低到100r/min；最大rcf一般可达20000~g以上，个别机型达到60000xg；离心容量最大可达3000ml。

一、试验仪器 PCR仪和紫外凝胶成像系统（紫外分析仪或手提紫外等）以及移液器都可能影响PCR检测的质量。PCR仪是控制PCR反应温度变化的，其温度和控制时间的准确程度可能会影性PCR检测质量。移液器取液的准确程度影响反应体系是否能达到最佳反应环境。紫外分析系统对检测敏感性有明显的影响。紫外分析系统有3种类型仪器：紫外分析仪、紫外凝胶成像系统、手提紫外灯。紫外分析仪直接用眼睛观察琼脂糖凝胶上DNA扩增带。紫外凝胶成像系统是在计算机上通过摄像系统对琼脂糖凝胶上DNA扩增带进行观察。手提紫外灯可以在电泳过程中直接对琼脂糖凝胶上DNA扩增带进行观察，使用方便，分辨率比较低。依据这些仪器的分辨率由高到低顺序是紫外分析仪、紫外凝胶成像系统、手提紫外灯。紫外分析仪有时能看到弱阳性扩增带，在紫外凝胶成像系统上却看不到。手提紫外灯只有在阳性扩增带比较亮时才能看到，建议为保证检测质量最好不用手提紫外灯，可用于临时的电泳结果观察。 仪器的质量控制应该通过实验室质量认证来实施，定期进行仪器的效验。没有质量认证的实验室可以定期请仪器生产厂家进行效验和保养，确保所有仪器处于正常的工作状态。 二、试验试剂与耗材 在PCR检测质量控制中，试剂的选择具有十分重要的作用，也是实验人员最为关注的检测质量控制因素。试剂一定选择质量和信誉好的厂商，一但选定后最好不要轻易改换。如果必须改换时应与原产品进行严格比对试验，包括敏感性、特异性、试剂保存期等试验。并且经常要注意不同批次产品质量的差异。比如说TaqDNA聚合酶，不同厂家生产的质量是有差异的，尽管都是标出相同活性单位，但其标定方法和保存液的成分以及运输过程的不同常常导致实际活性单位是有差异的，有时由于其活性低，使得弱阳性样品漏检；有时由于其活性过高出现非特异扩增。这与ELISA检测中酶结合物的作用相似。其实影响PCR检测结果的试剂很多，可以这样说，PCR检测用的所有试剂都可能影响检测效果。控制试剂的质量是作好PCR检测前提。我们认为：最好是选择PCR试剂盒来控制试剂质量。 评价一种PCR试剂盒，除了考虑它的敏感性、特异性、稳定性、操作简便程度外，还应包括：试剂盒提供的试剂覆盖整个PCR检测试验的程度。如果试剂盒提供了整个PCR检测试验的试剂，表明该试剂盒对PCR检测试验的试剂具有了全程控制性能。相反，PCR检测的试剂的质量控制程度比较低，意味着检测质量可控程度低。例如：溴化乙锭仅仅起荧光染料的作用，如果在阳光下长时间的照射下失效了，在紫外灯下发荧光效能降低，可能会造成一些弱阳性样品的漏检，出现假阴性。其它试剂出现问题也是一样影响检测质量。试剂盒在生产过程中，有一套试剂生产质量控制体系。每一试剂组分都经过灵敏度、敏感性、特异性质量控制的检测，在有效期内能确保每种试剂的质量。因此，选择试剂盒进行PCR检测是比较理想的控制方法。在PCR检测中，最好全部使用试剂盒提供试剂，对PCR检测质量控制有益。 实验耗材也是影响PCR检测质量的因素之一。PCR反应管薄厚以及传导热量性能等直接影响PCR检测效果。在热盖PCR仪上一般不需要加入矿物油，但有些PCR反应管盖子不严密，导致扩增过程中反应液水份蒸发，严重影响检测灵敏度。PCR反应体系是微量的，移液器的Tip头生产质量不好时，有时致使液体残留量多或洪吸作用强，导致试剂盒中试剂量不够，配置PCR反应体系不准，造成检测质量下降。 在每次PCR检测时，一定设立阴性对照样品和阳性对照样品。阴性对照样品检测为阴性时，表明试验全部过程的试剂没有受到污染；阳性对照样品检测为阳性时，表明DNA提取（RNA提取、RNA反转录）、DNA扩增和电泳鉴定工作体系正常。在阴性对照样品和阳性对照样品检测结果成立的前提下，才能对检测样品进行判定。因此，每次试验都应设立表明DNA提取（RNA提取、RNA反转录）、DNA扩增和电泳鉴定对照，只有设立试验全程的对照，才能证明试验结果成立。这一点对PCR和RT-PCR检测试验是非常重要的。 阳性对照在试剂盒中是必须有的组分。设立阳性对照有3种类型：第一种是用检测的病原微生物作为阳性对照。这样的直接对照优点是直观、准确、本次试验完整条件对照，可以说明此次试验是否成立。缺点是对检测过程中增加了PCR污染的指数。另外，不能表明每个检测样品对照成立。第二种是设立一种与检测病毒无关微生物作为阳性对照。优点是降低了PCR污染的危险性，并且提高了试剂盒的生物安全性。缺点是仅是参考阳性对照，不够直接、完全反映本次试验成立，也不能表明每个检测样品对照成立。可适合怕污染的实验室或要求生物安全等级高的病原微生物的检测。第三种是在每个反应管内设立参考对照，除了阳性扩增带之外，又设立一条扩增带，指示每个反应管内检测情况。检测为阳性时出现两条不同大小扩增带，阴性时出现一条扩增带。这种对照设立技术要求高，成本也高些，对照效果是最理想的，可以排除每个检测样品操作失误或试剂出现问题对检测造成的影响。由于在一个反应管内对两条模板同时进行扩增，相互之间多少有一定的干扰，因此，对病原微生物检测灵敏度或多或少有一定影响。此种对照方式可能会成为PCR对照的发展趋势。 三、人员操作 我们多名实验室人员曾经对相同样品同时进行检测，检测结果确实存在差异。经常检测人员比其他实验人员检测的灵敏度高10~100倍。说明PCR检测的试验确实有一定的操作技术需要熟悉和训练，不同的人员对检测结果有一定的影响。加强人员的操作技能的训练是必须的，需要实验技术人员对PCR检测有一个熟练的过程。 PCR污染控制是PCR检测操作人员必须非常注意一项内容。实验室设置上分配液区、模板提取区、扩增区、电泳区。物流应按分配液区、模板提取区、扩增区、电泳区顺序，严禁倒流。人员操作也应非常注意，比如注意经常打扫卫生消毒、对移液器要定期进行清洗、消毒。及时试验操作简便、快速、准确等。 

电子天平应如何正确操作呢?在操作时又该注意些什么呢?以下将由上海巴玖技术人员为您详细说明。电子天平操作规程：1.首先应了解电子天平工作的环境温度为10℃~30℃，相对湿度2.开机前先检查仪器电压转换开关是否与使用电压一致，电压选定后转换开关不能随意切换。然后调整水平调节脚螺旋，使水泡位于水准器中心。3.新机使用前、搬迁后或连续使用30天后，应按说明书中的方法对天平进行校准。4.每次称重前，应先将天平预热1小时，开机后必须等显示器归零后方可进行称量。称量时，必须等显示器左下角的“0”标志熄灭后才可读数。5.称量时被测物品必须轻拿轻放，避免仪器受到撞击和振动。应避免被测物品溢出，使仪器受到腐蚀及影响称量准确性。不允许称量超过允许量程以上物品，以免对仪器造成损害。称量加热物品时，必须冷却至室温方可称量。6.称量结束后，显示器归零后方可关机。天平如长时间不用应拨出电源插头，在拨出电源时，天平的称盘上必须保持空载。电子天平操作注意事项：1、电子天平称量前应检查是否正常，是否处于水平位置，玻璃框内外是否清洁。2、称量物不能超过天平负载，不能称量热的物体。有腐蚀性或吸湿性物体必须放在密闭容器中称量。3、同一化学试验中的所有称量，应自始至终使用同一架天平，使用不同天平会造成误差。4、每架天平都配有固定的砝码，不能错用其他天平的砝码。5、保持砝码清洁干燥，砝码用镊子夹取，不能用手拿，用完放回砝码盒内。6、称量完毕，应检查天平梁是否托起，砝码是否已归位，指数盘是否转到"0"，电源是否切断，边门是否关好。最后罩好 天平，填写使用记录。7、经常保持天平内部清洁，必要时用软毛刷或绸布抹净或用无水乙醇擦净。8、天平内应放置干燥剂。称量不得超过天平的最大载荷量。

紫外分光光度计组成：   各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。  1.光源 在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。         热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。 2．单色器 单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5、信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。 紫外分光光度计基本原理： 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息，可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即A= kcl    式中比例常数k与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。 紫外分光光度计应用： 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。 

免疫荧光技术基本原理免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术，因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合，用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体，但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用，所以人们习惯称为荧光抗体技术，或称为免疫荧光技术。以荧光抗体方法较常用。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比，荧光免疫法无放射性污染，并且大多操作简便，便于推广。国外生产的TDM用试剂盒，有相当一部分即属于此类，并且还有专供TDM荧光偏振免疫分析用的自动分析仪生产。由于一般荧光测定中的本底较高等问题，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难。近年来发展了几种特殊的荧光免疫测定，与酶免疫测定和放射免疫分析一样，在临床检验中应用。1．原理　免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法：将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。间接法：如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应，使之形成抗原—抗体—抗体复合物，再用水洗去未反应的标记抗体，干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体，则表明抗原标本是已知的，待检血清为第一抗体，其它步骤的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋白抗体，同于血清球蛋白有种的特异性，如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应，因此，制备标记抗体适用于鸡任何抗原的诊断。2．技术分类：⑴ 荧光抗体技术(荧光显微镜技术)抗原抗体反应后，利用荧光显微镜判定结果的检测方法。⑵ 免疫荧光测定技术：抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法-（1）荧光物质1）荧光色素许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：(1)异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490495nm，最大发射光波长520530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下：有两种同分异结构，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好，在冷暗干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感，②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。(2)四乙基罗丹明（rhodamine，RIB200）为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。结构式如下：最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。(3)四甲基异硫氰酸罗丹明（tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC）结构式如下：最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。（2）其他荧光物质1）酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。2）镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3 ）、铽（Tb3 ）、铈（Ce3 ）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3 应用最广。螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。" j/ I" J: F; N（3）常见荧光素：1）FITC2）RB2003）TRITC24）镧系：Eu、Tb5）PE6）其它常见荧光素的特性：1）FITC：黄色结晶粉末，吸收光：490~495nm，发射光：520~530nm，明亮的黄绿色荧光。2）RB200： 橘红色粉末, 吸收光570nm，发射光 595~600nm，橘红色荧光。3）TRITC： 紫红色粉末，吸收550nm，发射光 620nm，橙红色荧光。4）镧系：Eu、Tb5）PE：吸收光490~560nm，发射光 595nm，红色荧光。6）其它：酶作用后产生荧光物质。酶作用后产生荧光物质：酶 底物 产物 激发光 发射光MUG MU 360 450MUP MU 360 450HRP HPA 二聚体 317 414（4）合适荧光素的选择1）具有与蛋白质形成共价键的化学基团。2）荧光效率高，标记后下降不明显。3）荧光色泽与背景色泽对比鲜明。4）标记后能保持生物学活性和免疫活性5）标记方法简单、快速。6）安全无毒 

相对于之前离心机的功能和特点，现在生产的智能化离心机功能更多，更智能化，近几年来离心机技术的快速发展让离心机技术有了更完善和优质的功能。下面湘立科学仪器就为大家介绍关于新型智能化高速离心机相比传统的离心机有哪些新功能。·温度制冷当转子高速旋转时，空气摩擦生热，转子温度会上升，试管中的样品温度也会升高。由于生物学样品对温度敏感。一般要求离心实验中温度保持4℃。没有电脑控制的智能化技术，是不可能做到±1℃的精度。因此，用制冷机对离心腔冷却，而达到冷却转子、冷却样品温度的目的。但测量旋转中的转子的实际温度极为困难，国内外都采用在离心腔底部离转子较近处理设温度传感器，间接测量转子温度。这里T样品=T腔+T补偿。T补偿又与转子的类别、转速及运行时间有关。·无刷电机直接驱动离心机是由电机带转子高速旋转的。过去的电机是带碳刷的直流电机，离心机运转时碳刷磨损，带来火花与噪声甚至振动，且有寿命，届时要更换碳刷万能再行运转。更严重的是碳刷的磨损带来碳粉尘的污染，不仅污染离心机，还会污染周围环境，这种污染对卫生行业是不合适的。·显示数字技术模拟技术典型的表现形式为拧旋钮选择操作参数(如转速、温度与时间等)，以表盘的指针来显示数据。其缺点为:选择参数与数据的读数值受操作人与读数人的人为干扰多，控制精度差。而且每次操作都要这样，重复性差。有的离心机虽数字显示(如旋钮选值而数字显示)，虽在读数上有改进，但取值原理未变仍属模拟技术;数字显示典型的表现形式为界面友好、键盘操作、数字化显示、可编程操作的全电脑控制，其核心为智能化控制，是由电脑来实现的。离心机操作所需要一切参数(如转速、温度、时间、加减速率档等)，键盘操作输入，并以数字显示出来，因此选择操作参数与读取数误差极小。又由于是可编程操作，可把一组操作参数编成号码，可存取使用。有了以上功能。高速离心机更加智能化，离心效果更好，未来离心机的功能也将会更加完善，离心机厂家将开发更多新型功能。离心机技术也会更加完善。