Megazyme L-天冬酰胺/谷氨酰胺/氨快速检测试剂盒

1.简介

在以下两种主要应用中，L-天冬酰胺和氨的简单快速检测具有重要意义：

细胞培养：L-天冬酰胺是细胞培养基的主要成分，但是将其加入增长培养基中存在两个主要问题。首先，L-天冬酰胺不稳定，能够自然分解为L-天冬氨酸和游离铵离子。其次，产生的铵离子具有细胞毒性。为解决这一问题，应在使用培养基前加入L-天冬酰胺，并且培养过程中应经常检测铵离子的浓度。

该试剂盒采用先进的重组酶，检测快速（20min），并且L-天冬酰胺和氨的检测非常简单。L-谷氨酰胺在细胞培养中具有重要作用，使用这种方法也可以检测其含量。该说明书中介绍了手工检测和微孔板检测两种方法。Megazyme还可以提供其他组织培养快速检测试剂盒，用于检测氨（K-AMIAR），L-谷氨酰胺/氨（K-GLNAM）和D-葡萄糖（K-LATE）。

丙烯酰胺前体物质：众所周知，L-天冬酰胺、铵离子、D-果糖和/或D-葡萄糖在160℃加热时，可形成天冬酰胺致癌物，他对人类健康的影响引起了人们的广泛关注。含有这种物质的食物包括薯片和炸土豆条、烤土豆和其他油炸、焙烤食品，如面包、谷物早餐和咖啡。天冬酰胺酶可以将L-天冬酰胺转化为L-天冬氨酸，因而在降低丙烯酰胺水平方面具有重要作用。但是，如果使用天冬酰胺酶进行处理，需要确认游离的L-天冬酰胺成功转化为L-天冬氨酸。该试剂盒（K-ASNAM）在这一应用中非常理想，与Megazyme D-果糖/D-葡萄糖试剂盒（K-FRUGL）配合使用，可以有效检测丙烯酰胺的四种主要前体物质，而且简单、成本低。

该试剂盒还可以检测其他样品中的L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺和氨。该方法首先转化/定量检测L-谷氨酸盐，否则氨基酸将干扰检测。

2．产品性能

l   特异性：可特异性检测样品中的L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺和游离铵离子，不与D-同分异构体发生反应。如果样品中存在异抗坏血酸（D-阿拉伯糖型抗坏血酸），则可以被同时测定（但反应速率非常慢），测定异抗坏血酸与AAO总量时，孵育时间需要延长到约20分钟。

l   灵敏性：检测灵敏度为0.005个吸光度值差异。这相当于样品最大体积为1.50mL时，L-抗坏血酸在样品溶液中浓度为0.088 mg/L（或样品体积为0.10mL时，浓度为1.31mg/L）。

l   检测限：检测限为0.175 mg/L（在样品最大体积为1.50mL，吸光值差异为0.010时得到）。

l   检测范围：氨的线性检测范围为0.2-7.0μg，L-天冬酰胺或L-谷氨酰胺的线性检测范围为0.5-50μg。重复检测同一样品溶液，可能会有0.005-0.010的吸光值差异。相当于样品体积为1.00mL时，氨的浓度约0.316-0.633，L-谷氨酰胺的浓度约为0.271-0.5427，或L-天冬酰胺的浓度约为0.247-0.4949mg/L。若样品在制备过程中被稀释，结果计算时应乘以稀释倍数F；如果样品的重量被称量，如10g/L，差异应控制在0.02 -0.05 g/100g。