TSKgel UP-SW2000 色谱柱

本篇应用介绍了采用超高效尺寸排阻色谱法在分辨长度相差一个碱基的不同寡核苷酸样品的能力。采用了粒径2微米、12.5 nm孔径的硅基SEC色谱柱TSKgel UP-SW2000，此款色谱柱适用于分离小蛋白、肽和寡核苷酸。该色谱柱也可在UHPLC系统上用来分析寡核苷酸。配合使用东曹的多角度光散射检测器还能获取更多有关寡核苷酸和样品杂质的分子量信息。

本应用中使用粒径2 um的TSKgel UP-SW2000尺寸排阻色谱柱并配合Tosoh Bioscience的超高灵敏度光散射检测器LenS3使用，可对重组蛋白的绝对分子量及其聚集水平进行精确测量和表征。

β-内酰胺类抗生素是临床上常用药物之一，其在临床上最常见的不良反应是速发型过敏反应。目前研究成果揭示，引发β-内酰胺类抗生素速发型过敏反应的过敏原并非β-内酰胺类抗生素本身，而是期中存在的高分子聚合物。因此，在药典中对该类药品中高分子聚合物的含量有严格的要求。 目前在该类药品中高分子聚合物的分析方法主要采用的是分子排阻色谱（SEC）法。在2020 年版《中国药典》中规定了17 种β-内酰胺类抗生素需要进行高分子分子杂质的含量检测，均采用的是分子排阻色谱法。在之前的药典中，曾使用以葡聚糖为填料，装填到内径1.0-1.4cm、柱长30-40cm 的中低压色谱柱中，对样品进行分离检测。但在实际应用中，发现此方法有柱效低、重复性不好、峰形拖尾、分析时间较长等缺点，难以满足药物分子、高分子聚合物及不同聚合度高分子杂质之间的分离需要。 从2015 年版《中国药典》开始，部分样品逐渐以高效凝胶色谱柱代替之前的方法，以提高测试效率和准确性。2019 年10 月发布了相关国家标准《GB/T 38093-2019 β-内酰胺类抗生素高分子聚合物测定 凝胶色谱法》，标准中采用高效凝胶色谱柱对包括10 种β-内酰胺类抗生素研制和生产中内源性高分子聚合物进行测定。 本数据集是参照相关药典方法和国家标准GB/T 38093-2019，使用TSKgel 高效凝胶色谱柱，对β-内酰胺类抗生素样品进行测定的谱图汇总。希望对相关药物的分析测定工作有所帮助。

采用TSKgel UP-SW2000超高效液相尺寸排阻色谱柱，使用乙腈-水-三氟乙酸：（体积比：40：60：0.07）流动相，在紫外检测波长214 nm条件下，对注射用胸腺肽中胸腺肽α1进行分离和测定。供试品的分析结果显示，分子量大于10000道尔顿的组分所占比例为2.38%，满足标准不得超过5%的要求。对应胸腺肽α1对应峰面积百分比为1.84%，满足标准规定不低于1%的要求。

本应用介绍LC-MS同时分析5种抗流感病毒药物及其代谢物的分析实例。采用HILIC色谱柱TSKgel Amide-80(2.0 mmI.D.×150 mm,3 µm)在甲酸铵溶液和乙腈的梯度洗脱条件下进行分离。在分析环境水体中的抗流感病毒药物成分时，先通过阳离子交换或反相-阳离子交换混合模式的固相萃取浓缩100～1000倍后，使用本应用中的分析方法，可用来对环境进行监测。

在相同的流动相条件下，采用TSKgel UP-SW2000（2 μm,4.6 mmI.D.×30 cm）与G2000SWXL色谱柱分别对头孢匹胺进行对比分析，结果显示，UP-SW2000色谱柱的灵敏度与分离度均优于G2000SWXL。

在相同的流动相条件下，采用TSKgel UP-SW2000（2 μm,4.6 mmI.D.×30 cm）与G2000SWXL色谱柱分别对头孢洛林酯进行对比分析，结果显示，UP-SW2000色谱柱的灵敏度与分离度均优于G2000SWXL。

参照2020版《中国药典》第三部P343，使用TSKgel UP-SW2000和TSKgel G2000SWXL色谱柱分析人白介素-11注射剂样品，人白介素-11的理论塔板数均大于1500，满足药典要求。 15cm柱长的UP-SW2000色谱柱在分离度大于1.5的情况下，可实现快速分析样品。从不同进样量的角度观察，UP-SW2000色谱柱的灵敏度远高于G2000SWXL。