导致色谱峰异常的可能原因

    常见引起色谱峰异常的因素有：

     1.色谱柱连接管路不正确；
     2.连接件卡进柱子后客户的处理；
     3.HPLC常用色谱柱接头；
     4.色谱柱活化不到位；
     5.不同品质试验用水导致鬼峰；
     6.柱温的应用

     色谱柱连接管路不正确：

      连接件卡住后客户的处理：

      HPLC常用色谱柱接头:

               样品：
               1.苯丙氨酸     2.5-苯基-3,6-二氧-2-哌嗪乙酸
               3.Asp-Phe      4.天冬甜素
 

色谱柱活化不到位：

新色谱柱和长时间不适用的色谱柱都建议活化

活化的重要性

1）运输或储存过程中不可避免干涸掉的填料尽可能尽可能的浸润，使填料恢复活性；
2）不同品牌溶剂之间的差异，可能引起噪音增加，漂移增大，尽可能的置换掉保存溶剂；
3）加大进样量或者连续多次进样的方式，屏蔽掉系统和柱子的活性点，避免对样品峰形产生影响。

活化的注意事项：

1）柱子中的保存液体与使用的流动相之间要互溶，如果不溶请使用中介流动相（异丙醇，或4-二噁烷等），由于中介流动相黏度大，请使用低流速；
2）使用厂家推荐的活化程序；

活化推荐步骤：

反相柱（流速：0.5ml/min，每个步骤时间：120min）：
100%甲醇（或乙腈）—60%甲醇（或乙腈）—20%甲醇（或乙腈）——60%甲醇（或乙腈）—100%甲醇（或乙腈）
正相柱（流速：0.5ml/min，每个步骤时间：120min）：：100%甲醇（或乙腈）：
正相条件使用：
正己烷—流动相
反相条件使用：
异丙醇—乙腈—60%乙腈
H型强阳离子交换磺化交联苯乙烯-二乙烯基笨共聚填充剂：
PH=2.5硫酸水溶液，85℃，0.5ml/min，12小时以上。

不同品质实验用水导致鬼峰：
 

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