【热点回放】百事可乐被指使用致癌色素,据英国《金融时报》7月4日报道,美国监督机构——环境健康中心表示,在美国10个州购买的百事可乐含有4-甲基咪唑,这是一种与啮齿动物肺癌肿瘤有关的化学物质。目前国家风险评估中心正在对可乐焦糖色素含有的4-甲基咪唑是否会对人体产生影响进行评估,我国还将修订焦糖色素限量标准。据了解,在我国现行食品质量国标中,可乐中焦糖色素没有限量标准,只规定按生产需要适量使用。
4-甲基咪唑源于生产饮料所用的焦糖色素中,焦糖色素与其他人工合成色素相比,具备价格价廉、安全无毒等优点,被越来越广泛地应用于酱油、醋、可乐、冷饮等食品工业中。然而,因为焦糖色素在制造过程中往往要使用氨或铵盐,这种物质和其它原辅料发生反应,生成附带产物4-甲基咪唑。4-甲基咪唑为神经毒,能引起惊厥。长期食用会导致动物长肿瘤,有可能会对人体造成致癌风险。而据英国《每日邮报》报道,美国一公益组织检测全球多个国家的可口可乐中4-甲基咪唑的含量,发现美国355毫升可乐中4-甲基咪唑含量为4微克,中国为56微克,英国为135微克,巴西则高达267微克。
针对“可乐致癌”事件,赛智科技第一时间参考大量的文献方法,利用赛智科技全新高性能的LC-10Tvp型高效液相色谱仪,经实践检验可提供焦糖色素中4-甲基咪唑的HPLC检测方案,得出的结果准确可靠,检出限好,仅供广大用户参考。
LC-10Tvp高效液相色谱仪是赛智科技(杭州)有限公司为了快速地满足多样化的客户需求,在原有的STI501液相色谱仪的基础上经过优化,利用美国先进技术开发设计,国内加工生产的的一款新型的液相色谱仪。LC-10Tvp等度高效液相色谱仪可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
以下是高效液相色谱法对焦糖色素中的4-甲基咪唑的详细检测方法。
(本应用方案请勿转载,侵权必究)
1、仪器与试剂
1.1仪器、设备
LC-10Tvp高效液相色谱仪
Vertex 色谱柱:150mm×4.6mm×5μm
分析天平
旋转蒸发仪
分液漏斗250ml
振荡器
针头过滤器
微孔滤膜:0.45µm
1.2试剂
甲醇(色谱纯)
无水乙醇
三氯甲烷
三氯甲烷-无水乙醇萃取液(80: 20):移取80 mL的三氯甲烷及20 mL的无水乙醇混合均匀备用
碳酸钠
碳酸钠溶液(100 g/L ):准确吸取碳酸钠100 g于1 000 mL容量瓶中,用水定容至刻度
庚烷磺酸钠
磷酸二氢钾
磷酸
磷酸二氢钾缓冲液(0.05mol/L):称取磷酸二氢钾6.8g,庚烷磺酸钠1g于1000ml容量瓶中,加水900ml,用稀磷酸调pH至3.5,用水定容至1000ml。
4-甲基咪唑标准品:纯度>99 %o
4-甲基咪唑标准储备溶液:准确称取0. 1 000 g 4-甲基咪唑于100 mL的容量瓶中,用流动相溶解定容至刻度。4-甲基咪唑含量1. 0 mg/mL,作为贮备溶液。
2、试样溶液的制备
准确称取3g样品(精确至0. 001 g),加15mL水溶解,移入250 mL分液漏斗中,加100 g/L碳酸钠溶液15 mL,加三氯甲烷-无水乙醇萃取液60 mL,剧烈振摇5 min。静置分层后,将有机相移入另一分液漏斗中,水相再按同样方法萃取一次,合并有机相;用100 g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次,每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中,50℃浓缩至近干,取下,以水溶解残渣并定容至10ml,经0.45µm微孔膜过滤后供HPLC分析。
3、色谱条件
色谱柱:C18, 4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm
流动相:甲醇: 0. 05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液((pH 3.5,含0. 1%庚烷磺酸钠)=5: 95
波长:210nm
流速:1. 0 mL/min
4、样品测定
标准曲线:将4-甲基咪唑标准溶液配置成一系列标准溶液,分别进标准系列溶液各10µL,进行HPLC分析,然后以峰面积为纵坐标,以4-甲基咪唑的含量为横坐标,绘制标准曲线。
样品测定:吸取10 µL试样溶液进行HPLC分析,测定其峰面积,从标准曲线查得测定液中4-甲基咪唑的含量。
5、4-甲基咪唑的标准色谱图
更多检测方案请直接与赛智科技联系。
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