液相色谱仪检测牛黄上清丸中大黄素甲醚蒽醌类化合物的含量

液相色谱仪检测牛黄上清丸中4种蒽醌类化合物的含量

　　牛黄上清丸，中成药名。为清热剂，具有清热泻火，散风止痛之功效。用于热毒内盛、风火上攻所致的头痛眩晕、目赤耳鸣、咽喉肿痛、口舌生疮、牙龈肿痛、大便燥结。由人工牛黄、薄荷、菊花、荆芥穗、白芷、川芎、栀子、黄连、黄柏、黄芩、大黄、连翘、赤芍、当归、地黄、桔梗、甘草、石膏、冰片等组成。其中大黄主要含蒽醌、二蒽酮类及其衍生物，蒽醌类具有止血、抗菌、泻下、利尿的作用，能刺激肠道神经丛，促进肠蠕动。但是蒽醌成分具有肝毒性和肾毒性,还有一定的致癌作用。

　　本实验采用高效液相色谱仪检测牛黄上清丸中4种蒽醌类化合物的含量

　　仪器介绍

LC-600A智能全控液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，具备多元高压洗脱、波长扫描等功能；广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。

　　（1）往复式并联泵设计，流量精度高，压力脉动小，延长密封圈和活塞杆的使用寿命；

　　（2）隔膜式脉冲阻尼器与电子脉动抑制技术同时控制压力脉动保障最低的基线噪音；

　　（3）整体性单向阀，结构简单，密封性好；

　　（4）柱塞杆自动缩进，方便更换密封圈；

　　（5）可选配柱后清洗功能，适用于使用含缓冲盐的分析条件。

　　（6）平行双锥孔设计的流动池，大幅提高信噪比，检测效果更佳；

　　（7）开机自检功能，通过图谱上486.6nm和656nm这二点的位置，以判断波长示值误差的准确性，保证极优的波长精度，保障仪器最佳状态；

　　（8）控制电路采用多微处理器结构，分别管理信号采集、数据处理，系统控制和通信。在做等度分析时，可以方便地通过全汉字的液晶屏与七个功能键，设置波长、滤波常数、输出量程，运行时间等参数。并且可以实现开关氘灯，光谱扫描，启动分析程序等功能；

（9）全数字交换系统，避免了色谱信号需要多重摸-数转换带来的信号畸变与干扰。

样品处理：

准确称取1.0g试样，置于100mL具塞提取瓶中，加入25mL甲醇，于超声波发生器中提取2h。将提取液经0.45μm滤膜过滤后，转移至液相色谱进样小瓶中，作为待测样品。

　　色谱条件：

 见附件

色谱图示：

牛黄上清丸中4种蒽醌类化合物的液相色谱图

1.大黄酸；2.大黄素；3.大黄酚；4.大黄素甲醚