固相萃取-高效液相色谱法检测饲料中喹乙醇的添加量

固相萃取-高效液相色谱法检测饲料中喹乙醇的添加量

　　喹乙醇又称喹酰胺醇，商品名为倍育诺、快育灵，抗菌促进生长剂，具有促进蛋白同化作用，提高饲料转化率，使猪增重加快。对革兰氏阴性菌有抑制作用；对革兰氏阳性菌有一定的抑制作用；对四环素、氯霉素等耐药菌株仍然有效。由于喹乙醇有中度至明显的蓄积毒性，对大多数动物有明显的致畸作用，甚至使动物中毒死亡，对人也有潜在的三致性，即致畸形，致突变，致癌。在美国和欧盟喹乙醇都被禁止用作饲料添加剂。《中国兽药典》（2005版）也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。

　　利用固相萃取法可以降低试样提取液中杂质的含量，本实验选用中性氧化铝净化试样提取液。不仅节约了实验成本，还减少了有机溶剂的使用，使实验环境更加安全健康。

　　仪器介绍

　　LC600B等度液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）检测器采用24位AD转换器，支持开机进行自检，查看氘灯状态，设定氘灯状态。具有专利技术的缓冲器使输液泵获得极高的流量、压力稳定性、极小的死体积。采用双柱塞往复泵，串联泵，一个为主吸附柱塞，一个为辅助柱塞，达到流量的稳定。选用7725i美国进口六通阀，手动进样。自动数据分析功能保证整个样品分析，智能反控软件可做到一键操作。广泛应用于研究开发、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。

　　实验方法

　　样品处理：

　　1.提取 准确称取5g左右精研磨的动物饲料粉末置于250mL具塞锥形瓶内，加入50mL 70%甲醇溶液振荡提取30min，取上清液于10000rpm离心10min，得到提取液；

　　2.净化 制备中性氧化铝柱：长30cm的玻璃层析柱，内径10mm，下端放入一小团玻璃纤维，上面填充4g中性氧化铝。向柱中加入20mL流出液，收集随后的流出液，过0.45μm滤膜收集滤液，作为待测液。

　　分析条件：

　　色谱柱     C18柱250mm×4.6mm，5μm

　　检测器     紫外检测器

　　流动相     15%甲醇水溶液（乙酸调PH=3.0）

　　流速         1.0mL/min

　　检测波长         370nm

进样量     20μL

色谱图

见附件