分光光度计检测几种中草药总黄酮含量

    黄酮类化合物是指以黄酮为母体的一大类化合物，广泛分布于蔬菜、水果、牧草、和药用植物中，是许多中草药的有效成份。生物总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。

    天然黄酮类化合物多以苷类形式存在  ，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。黄酮苷固体为无定形粉末，其余黄酮类化合物多为结晶性固体。清除自由基、保护DNA、抗氧化作用、对造血系统和免疫系统具有保护作用。

     黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中，平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身体的一种补充。二十年前，科学家发现具有活化石之称的银杏树中含有相对较多的黄酮，主要从银杏叶中提取黄酮。

     紫外分光光度法检测总黄酮的含量是现在应用最为广泛的检测方法，本文以几种中草药为样品，使用UV1900紫外可见分光光度计（南京科捷分析仪器有限公司）对其中所含有的黄酮进行分析。

    UV1900紫外可见分光光度计采用全新设计的比例监测双光束学系统，具有优良的光学性能，使用方便，是实验室分析必备的基本仪器之一。全新设计的比例监测双光束光学系统，具有了优良的光学性能，高性能的全息闪耀光栅，确保了仪器的低杂散光。

    样品处理

    1.  艾纳香又称大风艾、大艾、冰片艾等，属菊科多年生木质草本植物，叶和嫩枝及根均可药用，性味温辛，具有清热利尿祛风消肿、温中活血、消炎镇痛、补虚壮阳之功效。可用于治疗寒湿泻痢、腹痛肠鸣、跌打刀伤和高血压等症。

     准确称取艾纳香药材粉末2g，至烧瓶中，加甲醇100mL，冷浸30min后，在水浴上加热回流60min，分取滤液，药渣加甲醇100mL，继续水浴加热回流30min，过滤，药渣用30mL甲醇洗涤，合并滤液，滤液置250mL量瓶中，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，待测。

    2.  准确称取干燥的蕨类样品粉末3g（用滤纸包裹捆扎）于索氏提取装置中，加70%的乙醇50mL，回流提取2h，取出提取液后用85%的乙醇溶液定容至50mL。吸取4mL提取液于盛有200mg层吸硅胶粉的小烧杯内摇匀，转移至600mg的硅胶层析柱，分别用70%、80%、90%和无水乙醇溶液依次洗脱，收集洗脱液，用85%的乙醇溶液定容至50mL，待测。

    3. 黑骨藤，属于萝藦科杠柳亚科植物，具有祛风除湿、活血通络、消痹止痛的功能。

     精密称取一定量黑骨藤茎，粉碎过30目筛，按1：20的固液比用50%乙醇浸泡后超声提取，提取条件：时间30min，温度70℃，超声频率40KHz。提取液经过滤、浓缩、定量后，待测。

    4.  杏香兔耳风又名金边兔耳草，菊科植物，具有清热补虚、凉血止血、利湿解毒的功效，广泛用于治疗感冒咳嗽、咽喉疼痛、肠炎痢疾、泌尿疾病、风湿痹痛、跌打损伤、活血止痛等。

     将杏香兔耳风于80℃干燥5h，粉碎过80目筛，精密称取5.000g样品，置于三角瓶中，加入50mL石油醚（镏程60~90℃），于70℃下水浴回流10h，除去样品中的脂肪，抽滤后挥干石油醚，滤渣置于三角瓶中，加入50mL蒸馏水，水浴回流2次，每次2h，然后静置，过滤，用蒸馏水冲洗，滤液定容至100mL。

    样品检测

     精密量取供试品溶液2mL，置25mL量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液1mL，10%硝酸铝溶液1mL，4%氢氧化钠溶液10mL，加水至刻度，放置15~20min左右显色后，于510nm波长处测定吸收值。

    结果计算

    将所测吸光值代入标准曲线方程即可计算出总黄酮含量。