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高效液相色谱法测定食品中的激素含量
2016/02/22 14:46
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方案摘要：
产品配置单：
科捷仪器LC600C 梯度液相色谱仪
型号： KJ LC600C
产地： 江苏
品牌： 南京科捷
¥10万 - 20万
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方案详情：
食品中激素含量的测定——高效液相色谱法：样品中的激素经提取分离后，以高效液相色谱仪分离测定。利用保留时间定性，峰高或峰面积与标准比较定量。
测定方法步骤：
1 提取
取可食用部分，捣成匀浆，称取50g左右，置于250mL具塞锥形瓶中。加入内标物安眠酮20.00µg/mL贮备液1.0mL，再加甲醇-丙酮（1：1）混合液150mL，在振荡器上振荡提取30min，过滤，残渣用少量甲醇-丙酮（1：1）混合液洗涤数次，洗涤并入滤液中，于旋转蒸发器或K-D浓缩器中将溶剂蒸除。残渣用20mL甲醇溶解，经盛有无水硫酸钠的漏斗滤入250mL分液漏斗中，再用10mL甲醇分数次洗涤漏斗及内容物，洗液并入滤液中。加pH=5.2的醋酸钠缓冲溶液80mL左右，混匀后分三次用二氯甲烷（50mL、30mL、30mL）振摇提取，合并提取液，并用无水硫酸钠脱水，在水浴上挥干溶剂。残渣用甲醇溶解并定容至10.0mL，混匀后，以3000r/min速度离心5min，取上层清液供色谱分析用。
2 色谱条件：
色谱柱4.6mm×200mm；流动相：乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.01mol/L醋酸钠溶液（20:20:10:50）；流速1.0ml/min；测定波长270nm；进样体积10µL。
3 测定
取供色谱用的样品溶液10µL，注入液相色谱仪，以内标法定量。
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