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小肠上皮细胞多胺含量检测
2015/11/25 15:25
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方案摘要：
产品配置单：
科捷仪器LC600C 梯度液相色谱仪
型号： KJ LC600C
产地： 江苏
品牌： 南京科捷
¥10万 - 20万
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方案详情：
多胺是一类低分子非蛋白质含氮化合物，主要有腐胺、精脒和精胺。它们广泛分布在生物组织内，具有多种生物学功能。多胺对肠粘膜上皮细胞的正常生长发育及损伤后修复发挥着重要作用，是上皮细胞不同功能调节复杂信号通路的中心焦点。胃肠上皮细胞构成胃肠粘膜的保护屏障，胃肠粘膜损伤后存在着修复过程，多胺对其修复过程中的细胞迁移、分化、增殖起关键性作用。益气健脾中药可通过鸟氨酸脱羧酶和多胺机制，促进其修复过程中细胞迁移、分化、增殖等环节。
目前，多采用化学衍生原高效液相色谱法测定生物样品中的多胺。常见的衍生化试剂有邻苯二甲醛、丹酰氯或苯甲酰氯等，对于苯甲酰氯衍生化条件的考察与优化，以及ICE-6细胞中同时测定腐胺、精脒和精胺的检测方法则未见报道。
因此建立苯甲酰氯柱前衍生-高效液相色谱法测定细胞内多胺含量，观察阳性对照药精脒对ICE-6细胞划痕损伤后多胺含量的影响，为病理生理及药理研究中检测该细胞多胺提供参考。
检测仪器：液相色谱系统；培养箱。
检测条件：色谱柱（250mm×4.6mm，5μL）；检测波长：234nm；柱温：25℃；流动相：甲醇：水（55：:4）；流速：1.0mL/min；进样量：20μL。在建立的色谱条件下测定，各成分峰分离良好，腐胺、精脒和精胺的保留时间分别为7.2、13.7、27.6 min。
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