色谱仪常见使用问题的详细解答

问：色质联用中毛细柱的选择应注意什么问题? 　　答：1、柱效要高 　　2、热稳定性好 　　3、化学惰性强 　　具体选择应注意 　　1、柱极性。根据分析样品选择不同极性的柱子进行分析 　　2、柱子内径。内径大小决定柱容量 　　3、液膜厚度。分析样品温度一不一样，对膜厚有不同要求，温度高液膜要厚，温度低液膜要薄 　　4、柱长度。柱越长，柱效越高，分离效果越好，但也存在吸附问题，柱子过长，分析时间长，因此要根据样品考虑柱子长 　　度 　　5、外涂层(柱体)的选择 　　6、另外还有仪器型号、分析对象等因素 问：为什么进样器内的玻璃衬套会对色谱行为造成影响? 　　答：进样器内的玻璃衬套主要有下列作用： 　　1、提供一个温度均匀的汽化室，防止局部过热。 　　2、玻璃的惰性不如不锈钢好，减少了在汽化期间样品分解的可能性。 　　3、易于拆换清洗 ，以保持清洁的汽化室表面，一些痕量非挥发性组分会逐渐积累残存于汽化室，高温下会慢慢分解，使基 　　流增加，噪声增大，通过清洗玻璃衬套可以消除这种影响。 　　4、可根据需要选择管壁厚度及内径适宜的玻璃衬套，以改变汽化室的体积，而不用更换整个进样加热块。从以上几个方面 　　可以知道玻璃衬套对色谱行为造成影响的原因。 问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 　　答：1、样品量不足：解决办法为增加样品量 　　2、样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 　　3、样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器 　　4、检测器衰减太多：调整衰减即可。 　　5、检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数 　　6、检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。 　　7、检测池中有气泡：解决办法为排气。 　　8、记录仪测压范围不当：调整电压范围即可。 　　9、流动相流量不合适：调整流速即可。 　　10、检测器与记录仪超出校正曲线：解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。 　　问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决? 　　答：原因可能有： 　　1、泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理； 　　2、比例阀失效，更换比例阀即可。 　　3、泵密封垫损坏，更换密封垫即可。 　　4、溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法； 　　5、系统检漏，找出漏点，密封即可。 　　6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。