图示用游离态的cAMP刺激培养细胞,并用Epac FRET-生物传感器进行监测。在红色圆圈区域分析信号(平均到达时间tₐ)。随时间变化的图示见底部。由K.Jalink,B.van den Broek,NKI Amsterdam(NL)提供。
FALCON的计数速度足够快,可在活细胞中使用化学传感器和FRET生物传感器进行荧光寿命成像。无染色应用是分析活体材料中的内源性荧光。例如:癌细胞抑制细胞呼吸,倾向于无氧糖酵解(瓦博格效应),这会导致积累更高浓度的荧光NADH。即使没有活检,多光子显微镜也能在皮肤组织中进行深度成像。同样,寿命对比度要可靠得多,因为深层的显微镜会受到吸收和阴影效应的影响,从而使强度信号失真。
传统意义上,不同的荧光染料以其不同的颜色来区分。如果激发和发射相同,仍可通过寿命进行区分。发射强度和寿命可以作为颜色的函数独立记录。因此,可见荧光染料的数量是发射光谱和拟合寿命的乘积。