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【飞诺美色谱】可乐中纽甜的分析报告
可乐中纽甜的分析报告
AF10117
应用及技术服务部
摘要：本实验重现了《食品中纽甜的测定方法 高效液相色谱法》(GB/T 23378-2009)，样品经混
合提取液提取，采用两款不同的固相萃取柱 Cleanert® S C18、Cleanert® S C18-N 分别对提取液净
化，Venusil® XBP C18(L)色谱柱（4.6 × 250 mm，5 µm，150 Å）分离，离子对缓冲溶液和乙腈
作为流动相洗脱，以紫外检测器检测，外标法进行定量。结果表明：当纽甜的加标量为 25.0 mg/kg
时， Cleanert® S C18、Cleanert® S C18-N 两款固相萃取柱的回收率均在 90% ~ 100%，可以满足
检测要求。
关键词：高效液相色谱法(HPLC)；纽甜；Cleanert® S C18；Cleanert® S C18-N；Venusil® XBP C18(L)
前言
纽甜是一种新型的二肽类功能性甜味剂，是阿斯巴甜的衍生物，甜味纯正，甜
度高，约是蔗糖甜度的 8000 倍。纽甜属于高效甜味剂，且具有无苦味及其他后味、
低热量、相对稳定等特点。我国卫生部在 2003 年批准纽甜作为新的食品添加剂品种。
国家标准 GB 2760-2014“食品安全国家标准 食品添加剂使用标准”规定了纽甜在
各类食品中的最大允许添加量，较国家标准 GB 2760-2011 中纽甜在各类食品中按生
产需要添加更加严格。
图 1. 纽甜的结构式
因此通过有效的实验技术手段，对食品中的纽甜进行监控，对确保消费者食品
消费的安全具有重要意义。
谱法。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪、紫外检测器；博纳艾杰尔 12 位固相萃取真空装置。
试剂材料
某品牌可乐；
混合提取液：分别移取 0.8 mL 甲酸与 2.5 mL 三乙胺，加水溶解并稀释至 1000
mL；
离子对试剂缓冲液：称取 2.0 g 辛烷磺酸钠，加适量水溶解，加入 1.0 mL 磷酸，
加水稀释至 1000 mL；
纽甜标准溶液：称取 0.010 g 纽甜对照品，加混合提取液溶解并稀释至 10 mL，
制成每 1.0 mL 中含纽甜 1.0 mg 的溶液；
一次性无菌注射器；尼龙针式过滤器(0.45 µm，直径 13 mm)；
Cleanert® S C18 固相萃取柱：500 mg/6 mL；
Cleanert® S C18-N 固相萃取柱：500 mg/6 mL；
高效液相色谱柱：Venusil® XBP C18(L)；5 µm，150Å；4.6 × 250mm；
样品制备
样品提取
准确称取经超声除气后的 2g 可乐样品置于 50 mL 具塞塑料离心管中，加入 10
mL 混合提取液，振摇 2 min，混匀，超声 15 min，待上样。
样品净化
Cleanert® S C18(或 Cleanert® S C18-N)固相萃取柱（500 mg/6 mL）使用前依次用
5 mL 甲醇、10 mL 水活化平衡，将上述上样液过固相萃取柱，然后用 5 mL 混合提
取液洗柱，弃去全部流出液；最后以 5 mL 甲醇洗脱，收集全部洗脱液。将洗脱液在
40℃氮吹浓缩至约 2 mL，用混合提取液定容至 5mL，混匀，过滤，待检测。
注：上样液、洗脱液以 1mL/min-2ml/min 的流速通过固相萃取柱
液相条件
色谱柱：Venusil XBP C18（L）；5 µm，150Å；4.6 × 250 mm；
流动相：离子对试剂缓冲液︰乙腈=60︰40(v\v)；
流 速：1.0 mL/min；
波 长：218 nm；
柱 温：30℃；
进样量：50 µL；
结果与讨论
实验结果
由表 1 可知，采用固相萃取法净化结合高效液相色谱法，外标法定量，经两款
不同固相萃取柱净化，纽甜的加标回收率均在 90% ~ 100%之间，满足检测要求。
结论
本实验依据《食品中纽甜的测定方法 高效液相色谱法》（GB/T 23378-2009）
建立了食品中纽甜的检测方法，并用外标法结合液相色谱法对可乐中纽甜含量进行
了测定。当纽甜的加标量为 25.0 mg/kg 时，Cleanert® S C18、Cleanert® S C18-N 两款
固相萃取柱的回收率均在 90% ~ 100%之间，符合要求。
附：相关产品
产品名称 规格描述 包装数量 订货号
Venusil® XBP C18(L) 5 μm,150 Å, 4.6 × 250 mm 1 支 VX952505-L
Cleanert® S C18 500 mg/6mL 30 支 S185006
Cleanert® S C18-N 500 mg/6mL 30 支 S185006N
氮吹仪 15 位 1 台 NV15-M
固相萃取真空装置 12 位 1 台 VM12
1.5 mL 样品瓶
短螺纹透明带书写处
32 × 11.6 mm
100/pk 1109-0519
1.5 mL 样品瓶盖
9 mm 中心孔蓝盖，红色橡
胶/米色 PTFE 隔垫
45°Shore A; 1.0 mm
100/pk 0915-1819
针式过滤器(Nylon) 单膜，13 mm，0.45 µm 200 个/包 AS021345
一次性注射器 2 mL 无针头 100 支/包 LZSQ-2ML
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