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恒温培养箱在食品微生物学检验 菌落总数测定中的作用
2023/02/27 16:40
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方案摘要：
产品配置单：
WIGGENS Celshak CRC CO2培养箱专用振荡器/摇床
型号： CRC
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥2.31万
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WIGGENS WH-10P Pro 系列低温培养箱
型号： WH-10P
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥2万 - 5万
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WIGGENS WHT-150恒温恒湿箱
型号： WHT-150
产地： 德国
品牌： WIGGENS
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WIGGENS WCI-850T 三气培养箱
型号： WCI-850T
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥10万 - 20万
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WIGGENS WCI-180 CO2培养箱
型号： WCI-180
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥5.78万
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WIGGENS WSI-50 常温型可叠加振荡培养箱
型号： WSI-50
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥4.6万
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WIGGENS WCI-1200超大型二氧化碳培养箱
型号： WCI-1200
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥19.8万
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方案详情：
恒温培养箱
在食品微生物学检验 菌落总数测定中的作用
（根据中华人民共和国国家标准GB 4789.2-2022）
1、 原理
菌落总数指标主要用来评价食品清洁度，反映食品在生产加工、储存、运输等过程中被微生物污染的程度及卫生质量的重要指标。近年来在市场简单管理总局发布的食品监督抽检微生物不合格中，菌落总数指标不合格占比居于首位。菌落总数即为食品检样经过处理，在壹定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
2、 使用仪器
1. 恒温培养箱
2. 冰箱：2℃～5℃
3. 天平：感量为0.1g
4. 恒温装置
5. 均质器
6. 振荡器
7. 无菌吸管
8. 无菌锥形瓶
9. 无菌培养皿
10. pH计或pH比色管或精密pH试纸
11.菌落计数器
WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器 WIGGENS WH-650 恒温培养箱
WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器 WIGGENS HG400 pro拍打式均质器
3、 分析步骤
1. 样品稀释
（1）固体和半固体样品：称取25g样品置于盛有225魅力，无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌介质杯中，使用WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器8000r/min ~10000r/min均质1min-2min，或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用WIGGENS HG400 pro拍打式均质器拍打1min-2min，制成1:10的样品匀液。
（2）液体样品:以无菌吸管吸取25ml样品置于225ml，无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌锥形瓶中，充分混匀，或放入225ml，稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min，制成1:10的样品匀液。当结果要求为每g样品中菌落总数时，按第一步操作。
（3）用1ml无菌吸管吸取1：10样品匀液1ml，沿管壁缓慢注于9ml稀释液的无菌试管中，在振荡器上振荡混匀，制成1:100的样品匀液。按操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1ml无菌吸管或吸头。
（4）根据对样品污染状况的估计，选择1~3个适宜稀释度的样品匀液，吸取1ml在 无菌培养皿中，各两个，同时分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌培养皿内做空白对照。
（5）及时将15ml~20ml冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基（可放置于48℃±2℃ WIGGENS WH-650 恒温培养箱中保温）倾注培养皿，并转动培养皿使其混合均匀。
2.培养
水平放置待琼脂凝固，平板翻转36℃±1℃培养48h。水产品30℃±1培养72h±3h。
3.菌落计数
（1）可用肉眼观察，必要时用WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。
（2）选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板技术菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。
(3)其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分步又很均匀，可计算半个平板后*2代表一个平板菌落数。
（4）当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数器
四、得出结论
五、注意事项
1.菌落总数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
2.使用仪器时，注意使用规范，严格按照实验手册和实验室规范进行操作。
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