使用New Brunswick S41i CO2 恒温摇床进行间充质干细胞扩增

2019-01-30 17:09

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资料摘要：

使用装载微载体的小型生物反应器如旋转培养瓶，扩增培养干细胞 (包括间充质干细胞) 被证明是成功的。而在本研究中我们使用了传统锥形瓶，为采用微载体进行间充质干细胞扩增开发了一种简单的替代方法。这种方法需要一台新型的内置摇床功能的 CO2 培养箱，例如：Eppendorf New BrunswickTM S41i CO2 培养箱。利用装载微载体的锥形瓶摇瓶和旋转培养瓶来对比脂肪间充质干细胞( ADMSCs) 的扩增效果。两个对照实验都使用含有 0.5g 微载体的干细胞培养液 40 mL，ADMSCs 接种密度都为 3×103 个细胞/cm2。细胞培养周期为 12 天，每日进行采样分析细胞生长状态、生物化学和代谢产物指标进行对比。细胞密度比较结果表明，脂肪间充质干细胞培养在对数生长期 (4 天)和平台期 (9 天) 中，在锥形瓶条件下扩增比在旋转培养瓶条件下细胞数量高 1.6-1.8 倍。日常代谢产物分析显示，培养早期旋转培养瓶中氨水平较高，但锥形瓶中没有此现象，这可能是由于搅拌子产生的剪切力造成的干细胞损伤所引起的。最后，通过 CD44 和 CD90 干细胞标记分析，间充质干细胞具有分化成脂肪细胞或骨细胞的能力，这证实了使用锥形瓶扩增的脂肪间充质干细胞具有较高的质量。

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