2024/01/09 09:02
阅读:86
分享:方案摘要:
产品配置单:
microFAST SC 单细胞/单颗粒样品引入系统
型号: microFAST SC
产地: 美国
品牌: ESI
¥50万 - 60万
参考报价
联系电话
方案详情:
使用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定体外人视网膜色素上皮细胞(HRPEsv 细胞系)模型分泌的外泌体(<200 nm 细胞外囊泡)中的内源性Fe、Cu和Zn。将经2,2'-偶氮二(2-甲基丙脒)二盐酸盐 (AAPH) 诱导氧化应激 (OS) 条件处理的细胞的结果与未处理(对照)细胞进行比较,以评估两组之间金属成分可能存在的差异。为进行ICP-MS分析,研究测试了三种样品导入系统:一种微型雾化器和两种单细胞雾化系统(作为总消耗装置),发现其中一种单细胞系统(以批量模式运行)最适合本项测试。本研究分别基于差速离心法和聚合物试剂沉淀法,研究了从细胞培养基中分离外泌体的两种方案。透射电子显微镜测量结果显示,与差速离心法相比,沉淀法纯化的外泌体尺寸更小、更均匀(差速离心法:20-180 nm,沉淀法纯化:15-50 nm),颗粒浓度更高。不过,与差速离心法相比,聚合物沉淀法会显著升高Fe, Cu和Zn的本底。考虑到HRPEsv细胞系外泌体中被评估的内源元素浓度较低,放弃了基于聚合物的沉淀方法。在比较对照组和经OS处理的HRPEsv细胞样本中的金属含量时,Fe和Cu的结果在统计学上较为相近。然而,在OS条件下,Zn含量上升(对照组11 μg L-1 ,OS处理组:34 μg L-1),这表明OS诱导的分泌活动会消耗Zn,这是RPE细胞抗氧化能力的基础。
图4. 使用 MicroMist、Single Cell和microFAST三种进样系统时ICP-MS的56Fe+、63Cu+和64Zn+的检出限(实验参数见表2)。LoDs的计算考虑了每种分析物的校准图,即截距和校准斜率的三倍标准偏差之比。
表2. 使用不同的进样系统(MicroMist DC雾化器、Glass Expansion公司的单细胞系统和 Elemental Scientific公司的microFAST单细胞系统)分析来自HRPEsv细胞培养基的外泌体中痕量元素的ICP-MS操作条件。
The determination of endogenous Fe, Cu and Zn in exosomes (<200 nm extracellular vesicles) secreted by an in vitro model of the human retinal pigment epithelium (HRPEsv cell line) was carried out by inductively coupled plasma - mass spectrometry (ICP-MS). Results for cells treated with 2,2′-azobis (2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH) inducing oxidative stress (OS) conditions were compared with non-treated (control) cells in order to evaluate possible differences in the metal composition between both groups. Three sample introduction systems were tested for ICP-MS analysis: a micronebulizer and two single cell nebulization systems (as total consumption set-ups), being found one of the single cell systems (operating in bulk mode) as the most suitable. Two protocols for the isolation of exosomes from cell culture media were investigated based on differential centrifugation and precipitation with a polymer-based reagent. Transmission electron microscopy measurements showed smaller and more homogeneous sizes (15–50 nm versus 20–180 nm size range) together with a higher particle concentration for exosomes purified by precipitation compared to differential centrifugation. However, it was observed that the contribution of polymer-based protocol to the Fe, Cu and Zn blank was significant as compared to the differential centrifugation protocol. Therefore, considering the low concentrations of the evaluated endogenous elements in exosomes from the HRPEsv cell line, the polymer-based precipitation method was discarded. When comparing metal levels in samples from control versus OS-treated HRPEsv cells, results for Fe and Cu were statistically similar. However, upregulation of Zn was found during OS conditions (11 versus 34 μg L−1 in control and OS-treatment, respectively), showing Zn depletion through secretory activity induced by OS, underlying the antioxidant ability of RPE cells.
下载本篇解决方案:
更多
MPx深海多金属结核成像
快速洗脱激光剥蚀(LA)系统[imageGEO193和imageBIO266]与飞行时间质谱(LA-ICP-TOF-MS)的结合,已经将元素成像能力提升至每秒超过1000像素。样品室单脉冲响应(SPR)和质谱仪的循环时间是近年来得到显著发展的重点领域,例如TwoVol3、DCI2等。然而,无缺陷成像的总分析时间受到许多其他因素的影响,如精度、激光触发与瞬态数据的相关性、仪器通信的稳健性,以及两种仪器的优化工作周期。在这里,我们详细介绍了首个收集的百万像素元素成像图(>15 MPx),其收集速率远远超过了“黄金障碍”每小时100万像素的标准:1.6 MPx/小时 - 使用3微米分辨率的imageGEO193。
地矿
2024/06/28
多功能集成色谱-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法 快速测定饮用水中砷形态
为准确快速测定饮用水中砷形态,采用多功能集成色谱(prepFAST IC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用,ICX-As35 阴离子色谱柱为分析柱,通过仪器注射器推动改变 1 mmol/L 碳酸铵(pH=9.7)和100 mmol/L 碳酸铵(pH=9.2)洗脱液的混合比,进行浓度梯度洗脱,在 105 s 内快速分析出甜菜碱(AsB)、亚砷酸盐[As(Ⅲ)]、二甲基砷(DMA)、砷胆碱(AsC)、一甲基砷(MMA)和砷酸盐[As(V)]六种 As 的形态,建立饮用水中六种砷(As)形态的多功能集成色谱串联 ICP-MS 分析方法。。在 0~100 μg/L 六种 As 的形态线性关系良好,相关系数均大于 0.999,检出限为 0.02~0.03 μg/L。方法采用加标回收进行准确性评估,纯水和末梢水低、中、高浓度样本的加标回收率为 89.2%~103%,不同浓度砷形态的相对标准偏差(RSD)均优于2.0%。方法灵敏度高、准确可靠、分析效率高,适用于生活饮用水中砷形态的快速测定,提供了工作效率。
环保
2024/06/28
适用于单个流体包裹体 LA-ICP-MS 分析的多元素流体包裹体标样合成及飞秒激光分析方法的建立
单个流体包裹体成分 LA-ICP-MS 分析在精准示踪成矿物质来源和精细刻画成矿过程方面具有独特优势,但目前流体包裹体标样的研究还较缺乏,制约了该分析方法的发展和应用。 本文通过高温加热-淬火法,结合金刚石磨片打磨和 HF 酸蚀,在石英中合成了数量多、大小适中且多为规则状 / 椭圆状的适用于 LA-ICP-MS 分析的多元素( B、Na、K、Mn、Co、Rb、Sr、Mo、Cs、W)流体包裹体标样。 合成的流体包裹体标样冰点相对标准偏差(RSD)小于 2%,显示均一性很好。 193 nm 激光和飞秒激光对该标样进行对比分析,结果显示 193 nm 激光获得的元素含量相对误差绝大多数( >85%) 在±20%以内,RSD 变化在 5% ~17%之间,测试准确度和精度与国际同行实验室相当。 飞秒激光获得的元素含量多数( >80%) 相对误差在±30%以内,RSD 变化在 11% ~ 25%之间,准确度和精度比 193 nm 激光略差,但与国际同行实验室相当甚至更优,表明飞秒激光分析方法是可行的。 飞秒激光能够极大地提高流体包裹体分析成功率和效率,具有广泛的应用前景,值得开展深入研究。
地矿
2024/06/25
精准施力丨空间金属组学推荐方案(空间金属组学I单细胞应用)
相较于传统的cyTOF和组织成像技术,该套质谱流式和质谱成像方案,具有更高的检测通量(Li-U),适用于各类生物样品,应用于空间金属组学研究,全面分析元素分布成像和深度解析组织结构。其展现出的强大的创新能力,可广泛用于肿瘤、免疫、单细胞高通量分析的研究,为人类健康与疾病研究带来前所未有的突破!
生物产业
2024/03/26