制备干细胞因子冻干粉
将35ml干细胞富因子溶液置于50ml离心管中,离心,1000g的离心力离心10min,以去除细胞碎片及其他大颗粒杂质;所述干细胞富因子溶液,来源于间充质干细胞培养上清液,即间充质干细胞生长汇合度达到95%时收集其培养上清液;向上述离心后得到的溶液中按照4g/100ml的浓度加入葡聚糖凝胶,浸泡6h,此时无机盐分子会进入凝胶网孔,细胞因子等蛋白质及多肽则由于分子量过大被排阻在凝胶网孔之外;然后用80目筛网过滤去除吸附无机盐溶液溶胀后的凝胶,得干细胞因子浓缩液,分装至西林瓶,每支2~5ml,放入冷冻干燥机冷冻干燥,得到冻干粉,压盖 密封,于-20℃保存。
冻干配方
细胞保护剂渗透性细胞冷冻保护剂:可以渗透到细胞内,一般是一些小分子物质,主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。
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