液相色谱峰分叉了，怎么办？

液相色谱实验基本都会碰到分叉峰，很多时候，这都意味着硬件或者方法某些地方可能出现问题。今天我们就一起看看导致色谱峰分叉的原因，以及如何解决这个问题。

首先，我们需要判断这到底是一个峰，还是两个峰?

A图主峰前面有一个肩峰

这到底是峰形不好，还是另外一个化合物没分开呢?

判断方法：降低该成分在样品中的浓度

B图是降低该成分浓度后进样后得到的色谱图，如果这是一个峰那肩峰也应该响应变小，但是这个例子里，肩峰没有变小这应该是另外一个化合物。这时候，我们就要考虑如何改变方法，将这两个东西分开。

如果所有峰的峰形都不好

一般来说，一个样品都会出多个峰，绝大多数时候在每个峰上面都出现肩峰比如像下面这样:

这种情况一般都是管路连接、液相色谱柱柱头塌陷或者柱头的筛板被堵导致的。

如何解决液相色谱柱柱头筛板被堵的问题呢？

01反冲

柱出口放空，冲20-30ml流动相。虽然色谱柱上都有表明使用方向，但是对于硅胶基质的色谱柱基本都可以反冲。

将柱头污染物如泵密封圈的碎屑，样品中的污染等冲走，就能解决问题。

02更换或清洗筛板

现在估计做这个事情的人不多，但是如果有废的色谱柱，想练练也未尝不可。将筛板取下，用超声波清洗器清洗，晾干后安装；如果清洗后依然没有效果则需要更换新的筛板。

当然，还是要提倡大家注意样品上机之前的前处理和及时更换磨损的泵密封圈。有条件的还是用保护柱，大不了就换保护柱，也比换色谱柱成本更低。