大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 高效液相色谱法

大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 高效液相色谱法

本标准规定了大米中氯虫苯甲酰胺残留量的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定。

本标准的方法检出限为0. 01 mg/kg。

2规范性引用文件

    下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

    GB/T 6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义

    GB/T 6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与

再现性的基本方法

    GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

    试样用乙腈和盐酸混合溶液提取后，经中性氧化铝柱层析净化，用高效液相色谱紫外检测器检测，外标法定量。

4试剂与材料

4.1  水为GB/T 6682规定的一级水。

4.2乙腈。

4.3丙酮。

4.4石油醚：60～90℃。

4.5  乙腈：色谱纯。

4.6浓盐酸。

4.7氯化钠。

4.8无水硫酸钠：用前在650℃下灼烧4h后备用。

4.9  中性氧化铝：100～200目，用前130℃处理4h，如水5%减活，备用。

4. 10盐酸溶液：2.0 mol/L。

4. 11  氯虫苯甲酰胺标准品：纯度≥99%。

4. 12  0.45 μm微孔过滤膜

4. 13标准溶液

    一一氯虫苯甲酰胺标准储备液：准确称取氯虫苯甲酰胺0. 0100 g，置于10.0 mL容量瓶中，乙腈

溶解并定容至刻度，配置成浓度为1000 mg/L储备液，于0--5℃下避光保存。

一一氯虫苯甲酰胺标准工作液：取1000 u g/mL氯虫苯甲酰胺储备液，用乙腈稀释，配成质量浓度分别为8.0 mg/L、4.0 mg/L、2.0 mg/L、1.0mg/L、0.5 mg/L和0.25 mg/L的标准工作溶液，待用。标准工作液需现配现用。

5  主要仪器和设备

5.1  高效液相色谱仪：配紫外检测器。

5.2旋转蒸发仪。

5.3真空泵。

5.4水浴恒温振荡器。

5.5氮吹仪

5.6  电子天平：感量0.1g和0.1 mg。

6分析步骤

6.1  样品的采集、贮存及试样制备方法

    将不少于1000 9大米（已脱壳）混匀，四分法取样，放入食品加工机粉碎，过20目筛，制成试样，放入试样瓶中密封，做上标记，并置于-20℃条件下保存，待测。

6.2试样处理

6.2.1  提取

    准确称取25g（精确至0.1g）制备好的试样于锥形瓶中，向锥形瓶中加10 mL盐酸溶液和20 mL水浸泡20 min，再加80 mL乙腈(4.1)浸泡过夜，振荡提取1 h，过滤，残渣用40 mL乙腈(4.1)分两次洗涤，合并滤液于分液漏斗中，加5.0g氯化钠，振摇3 min，静置分层，弃去下层水相，乙腈相经无水硫酸钠(4.7)干燥后，用旋转蒸发仪于35℃永浴下浓缩至近干，待柱层析净化。

6.2.2净化

    在玻璃层析柱中依次装填2.0 cm高无水硫酸钠、5.0 g中性氧化铝(4.8)、2.0 cm高无水硫酸钠，层析柱先用20 mL石油醚+丙酮（1:1，体积比）预淋洗，弃去，然后转移样品液至柱上，用50 mL石油醚+丙酮（1:1，体积比）洗脱，重复一次，收集洗脱液，用旋转蒸发仪于35℃水浴下浓缩至近干，氮吹仪用氮气吹干，乙腈(4.4)定容至2.0 mL，过0.45μm滤膜，供高效液相色谱仪测定。

6.3测定

6.3.1  高效液相色谱条件

    a)  色谱柱：C18柱，  5 μm，250 mm×4.6 mm（内径）或相当者；

    b)  柱箱温度：35℃；

    c)  流动相：乙腈+水（1:1，体积比）；

    d)  流速：0.8 mL/min;

    e)  检测波长：220 nm;

    f)  进样体积：10 μL。

6.3.2液相色谱测定

    取氯虫本甲酰胺标准工作溶液系列(4.12.2)及试样溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪进行分析，用外标法定量。

6.4平行试验

    按以上步骤，对同一试样进行平行测定。

6.5空白实验

    除不称取试样外，均按上述步骤测定。

7结果计算

试样中的氯虫本甲酰胺含量按公式(1)计算：

式中：

R——样品中氯虫本甲酰胺残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

C——从标准曲线上得到的待测样液中氯虫本甲酰胺的浓度，单位为毫克每升(mg/L)；

V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；

m——称取的试样量，单位为克(g)。

注：计算结果应扣除空白值。

8  方法的准确度和精密度

8.1  准确度

    本方法在0. 01 mg/kg～l.0 mg/kg之间添加浓度的回收率在80%～110%之间。

8.2精密度

    本标准精密度数据是按照GB/T 6379.1和GB/T 6379.2的规定确定的，获得重复性和再现性的值是以95%的可信度来计算，本标准方法的精密度数据参加附录B。

应用领域

    在环境分析中可应用于环芳烃、农药 残留分析等。在食品分析中可应用于食品营养成分分析、食品添加剂分析、食品污染物分析等。生命科学中的应用中可在分子水平上研究生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学及生化领域的分子量物质纯化、分离和测定等。医学检验中的应用中科测定体液中代谢物、药代动力学研究、临床药物监测等的分析测定。无机分析中的应用中，可以用于阴、阳离子的分析等。

仪器介绍

     美国原装进口，美国兰博拥有几十年的色谱仪生产经营，此款仪器具有高压力 高精度  高流速  高稳定性、双检测器系统、超高高性价比等特点，捍卫了全球液相色谱领导者地位。

Series4020

主要特点

 1. 任选一个活多个不同类型的检测器：示差折光、PDA、荧光检测器、蒸发光检

   测器。      

2. 独立工作的四台高压泵组成的四元高压梯度输液系统，

3. 无可比拟的梯度精度使复杂样品的分析轻松面对，游刃有余。

详细参数请来电或留言咨询！