液相色谱的几个基本概念和术语

    1.色谱图和峰参数色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elution profile)。基线(base line)--经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。噪音(noise)--基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。漂移(drift)--基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。色谱峰(peak)--组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种：前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少见。拖尾因子(tailing factor，T)，用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰，T>1.05为拖尾峰。峰底-基线上峰的起点至终点的距离。峰高 (peak height，h)-峰的最高点至峰底的距离。峰宽(peak width，W)-峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ半峰宽(peak width at half-height，Wh/2)-峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ标准偏差(standard deviation，σ)-正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之，σ大，峰形胖、柱效低。峰面积(peak area，A)-峰与峰底所包围的面积。

　　2.定性参数(保留值)死时间(dead time，t0)--不保留组分的保留时间。即流动相(溶剂)通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。死体积(dead volume，V0)--由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙(被流动相占据，Vm)、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程，其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰扩展，这3部分体积应尽量减小。 V0=F×t0(F为流速)保留时间(retention time，tR)--从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。保留体积(retention volume，VR)--从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积。又称洗脱体积。VR=F×tR调整保留时间(adjusted retention time，tR)--扣除死时间后的保留时间。也称折合保留时间(reduced retention time)。在实验条件(温度、固定相等)一定时，tR只决定于组分的性质，因此，tR(或tR)可用于定性。tR=tR-t0调整保留体积 (adjusted retention volume，VR)--扣除死体积后的保留体积。