蛋白酶解和水解的新技术－CEM单模微波技术在蛋白质组学中的应用

CEM公司的研究专家发现,在特定控制的单模微波技术基础上，微波对于大量的酶蛋白，可起到解旋的作用。
1．单模微波蛋白酶解和水解的技术原理
□ 酶在微波中的稳定性由于螺旋的存在会迅速降低，而二硫键是共价的，所以蛋白的结构具有稳定性。微波可以加强用胰蛋白酶酶解蛋白的能力，胰蛋白酶在最高55℃的微波条件下，就可得到最好的活化。
□ 用单模微波进行胶体内酶消解仅仅只需5分钟，而按照传统方法则需要16小时才能完成。
□ 蛋白混合物可以使消解能力更加高效。
□ 微波蛋白水解用于氨基酸分析，分析每个蛋白质里的氨基酸量需要水解过程。所有的缩氨酸链都可断裂为自由的氨基键。
□ CEM上述反应运用DISCOVER单模微波仅需15分钟即可完成，传统气相水解进行条件：盐酸、110℃、18－72小时。

2．DISCOVER单模微波蛋白酶解和水解的技术优势

□ 单模微波可保证所有实验的重复性结果。
□ 高酶解效力，特别适用于大豆疏水蛋白。
□ 最快消解时间仅仅只需15分钟。
□ 产量－每15分钟即可酶解14个样品。
□ 使用配有密闭盖的标准1.5ml移液试管。
□ 溶液内消解或胶体内消解均可。
□ 加热时间短，样品量少到只需35µL。
□ 酶：蛋白比   1：50－1：10 范围内都可操作。

3．CEM研究人员在DISCOVER单模精确微波的技术基础上的实验结果

   在蛋白质组学的蛋白识别技术中，质谱分析进行识别之前，需要对蛋白质进行分离，其中的瓶颈是需要进行20个小时的样品前处理。
   鉴定过程：蛋白质分离－样品准备（需要20小时）－质谱分析－蛋白质鉴定
   其中样品制备：＜化学修饰＞ 还原/烷化（2小时）； ＜酶解＞ 胰岛素/蛋白内切酶等（18小时）

   酶解是在选择的位置进行蛋白质的分割，用以建立蛋白图谱。 胰蛋白酶是最通用的酶，从赖氨酸和精氨酸残基裂解肽键。

◇用微波进行胶体内消解仅仅只需5分钟，而按照传统方法则需要16小时才能完成。
◇蛋白混合物可以使消解能力更加高效。

4.产品组件

酶消解可选配件如下
□908115    14位酶水解托盘－包括169170（容器）＋169175（移液试管50PK）
□162810    搅拌棒50PK
□BR861003  图钉
□541130    敞口容衰减器
□541455    调压器
□BR221221  ¼聚乙烯管材
□541175    温度配件（必须）

 
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