利用压力循环技术(PCT)和ProteoSOLVE溶解剂破坏秀丽广杆线虫的坚硬表皮

2008-08-05 16:21

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资料摘要：

没有任何其他的多细胞生物像线虫一样在细胞和分子水平上研究的那么深入。然而，线虫类坚硬的外表皮阻止了细胞溶解并且阻止蛋白质学和糖蛋白质学的研究步伐。表皮主要由壳质和胶原质组成，其中胶原质富含N端和C端半胱氨酸，而且这两种氨基酸常以二硫键相连。一些酶类比如几丁质酶和胶原酶能够用于弱化表皮。但是，除非这些酶固定不变，否则这些酶会产生一些外生蛋白，这些蛋白会在下游分析中依然存在。另外，酶诱导的细胞溶解会给细胞质、膜蛋白及其他非水溶性蛋白的提取带来麻烦。ProteoSOLVE溶解剂可以最大程度的破坏线虫表皮并增加蛋白产量，该溶解剂若结合压力循环技术(PCT)可获得与其他技术相比更多的蛋白量。

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