2024/07/05 09:50
阅读:14
分享:方案摘要:
产品配置单:
喆图 -60度高低温试验箱 THS-6050MJ
型号: THS-6050MJ
产地: 上海
品牌: 喆图
¥11.68万
参考报价
联系电话
喆图陶瓷纤维马弗炉120 L 120-12T
型号: 120-12T
产地: 上海
品牌: 喆图
¥6.89万
参考报价
联系电话
喆图熔喷布磨具烘箱THG-S70A
型号: THG-S70A
产地: 上海
品牌: 喆图
¥2.2万
参考报价
联系电话
喆图 石墨加热板 EH35-3020
型号: EH35-3020
产地: 上海
品牌: 喆图
¥5000
参考报价
联系电话
喆图水浴恒温振荡器WYC-110X50
型号: WYC-110X50
产地: 上海
品牌: 喆图
¥1.98万
参考报价
联系电话
喆图厌氧培养箱触摸屏ZAI-350Pro-II
型号: ZAI-350T
产地: 上海
品牌: 喆图
面议
参考报价
联系电话
喆图ZRQ-800人工气候培养箱
型号: ZRQ-800
产地: 上海
品牌: 喆图
¥7.23万
参考报价
联系电话
方案详情:
免疫沉淀是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术。本文描述了使用水浴恒温振荡器进行免疫沉淀实验的过程、方法和结果分析。实验旨在从细胞裂解物中分离特定的蛋白质复合体。
一、实验材料:
细胞培养物、裂解缓冲液、蛋白酶抑制剂、特异性抗体、蛋白A/G珠、PBS(磷酸盐缓冲液)、BCA蛋白定量试剂盒、SDS-PAGE凝胶。
二、实验步骤:
1.收集并裂解细胞,加入蛋白酶抑制剂防止蛋白降解。
2.细胞裂解物在4°C下以14,000g离心20分钟,收集上清液。
3.取一定量的上清液,加入特异性抗体,于4°C的水浴恒温振荡器中以低速振荡过夜,以形成抗原-抗体复合物。
4.次日,加入预先平衡的蛋白A/G珠,继续在4°C下振荡2小时,以捕获抗原-抗体复合体。
5.以低速离心收集珠,弃去上清液,用预冷的PBS洗涤珠3次以去除未结合的蛋白。
6.最后一次洗涤后,用样品缓冲液重悬珠,进行煮沸处理以洗脱免疫沉淀的蛋白。
7.将洗脱的蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳进行分析。
三、实验数值
细胞裂解条件:4°C,14,000g,20分钟。
抗体孵育时间:4°C,过夜(约16小时)。
蛋白A/G珠孵育时间:4°C,2小时。
洗涤次数:3次,每次500μL PBS。
煮沸条件:95°C,5分钟。
五、实验结果
实验结果显示,通过SDS-PAGE凝胶电泳,成功检测到目标蛋白条带,表明免疫沉淀过程有效。对照组(无抗体)未显示出明显的蛋白条带,证实了特异性抗体的结合。
六、结果分析
免疫沉淀实验的成功关键在于抗体的特异性和亲和力。本实验中,使用特异性抗体能够有效地从细胞裂解物中捕获目标蛋白。水浴恒温振荡器的使用确保了抗体与抗原在4°C下充分接触,减少了非特异性结合,提高了沉淀效率。通过SDS-PAGE凝胶电泳分析,目标蛋白的条带清晰,表明免疫沉淀步骤成功。
七、结论
本实验通过使用水浴恒温振荡器成功完成了免疫沉淀实验,为研究蛋白质相互作用提供了一种有效的方法。实验结果的准确性和重复性证明了实验设计的合理性和操作的精确性。
下载本篇解决方案:
更多
电热恒温培养箱培养真菌毒素的方法步骤
在进行恒温培养箱培养真菌实验时,要保持培养箱内的清洁卫生,避免污染和杂菌滋生。同时,要根据不同的真菌种类和生长条件,选择适宜的培养基和生长环境。
食品/农产品
2024/07/25
电热恒温水槽在秸秆营养成分分析实验中的应用
本文介绍了利用电热恒温水槽进行秸秆营养成分分析的实验方法。实验旨在评估秸秆中的营养成分,为秸秆的综合利用提供科学依据。
农/林/牧/渔
2024/07/24
恒温恒湿培养箱在木材老化和耐久性测试中的应用
本文描述了一项使用恒温恒湿培养箱对木材在不同温湿度条件下老化和耐久性进行测试的实验。实验目的在于评估和比较木材在模拟自然环境中的耐久性表现。
农/林/牧/渔
2024/07/24
干热灭菌两用箱延长鱼片灭菌保质期实验
本实验研究了使用喆图干热灭菌两用箱TPH-70A对鱼片进行灭菌处理以延长其保质期的效果。通过设定不同的温度和时间参数,评估了灭菌对鱼片微生物数量和保质期的影响。
农/林/牧/渔
2024/07/24