细胞病理学检查仍是诊断的金标准之一，但对某些组织样本取样时标本内的反应性免疫细胞、坏死细胞、细胞碎片和纤维等, 常常影响对恶性细胞的辨别而导致细胞学检查敏感性较差。本文与大家分享一例通过常规体液病理检查险些漏诊的病例。通过多参数流式细胞术运用不同荧光标记的多种抗体组合对造血细胞表面或胞内抗原的表达状况进行检测。-   流式检测有何优势？-   组织样本取样、分析过程时需要注意什么问题？-   通过患者的哪些表现来判断诊断方法？本篇病例讨论将通过一例眼玻璃体液的流式分析原发性中枢神经系统淋巴瘤（PCNSL）案例，来与大家分享其中的一些细节：////病史介绍：患者：女性，42岁，已婚；既往史：曾因「脑部肿瘤」于 2011 年行开颅手术确诊原发中枢弥漫大 B 细胞淋巴瘤，2015-2016 先后行 8 次化疗，2016 年行造血干细胞移植术。2018 年 1 月以「左眼反复视朦 2 月」入院。入院时，病人无头痛、头晕，无发热，全身一般情况良好，未诉特殊不适；一般检查：T：36.5 ℃  P：88 次/分  R：20 次/分  BP：106/79 mmHg。心电图示：窦性心律，正常心电图。血常规、肝肾功能、凝血分析、术前四项未见明显异常；专科检查：视力：右：0.3 -2.00DS-0.5，左：0.08 矫正无助。眼压：右：12.6 mmHg，左：13.5 mmHg。双眼泪道冲洗通畅。双眼结膜无明显充血，角膜透明，KP(-)，前房深浅可，房水清，瞳孔圆，直径约 3 mm，对光反射灵敏，双眼晶体透明，右眼玻璃体液化混浊(+)，散瞳查眼底：视盘边清色正，C/D=0.3，视网膜血管走行未见明显异常，后极部网膜未见出血及渗出， 黄斑区细节不清。左眼玻璃体混浊，视盘边界尚清，鼻侧及上方周边网膜见散在大小不一类圆形灰黄色灶，未见明显出血。治疗经过：入院后行左眼玻璃体腔取材 + 前房穿刺放液术，玻璃体液及房水送检确诊左眼淋巴瘤眼内转移后，局麻下行 8 次左眼玻璃体腔注药术，注入甲氨蝶呤，术后自觉视力提高。其它检查：病理检查：-   「眼内」：见少量淋巴细胞及组织细胞等，部分细胞核稍大；细胞总数少，请结合临床；-   「鼻咽部软组织」：考虑为淋巴组织反应性增生，未见确切肿瘤组织累及。流式检查：1. 流式检测方案：贝克曼 LUCID  DURA 混合荧光抗体干粉管-   FMC7-FITC/CD10-PE/CD5-ECD/CD79b-C5.5/CD20-PC7/CD23-APC/CD19-APC750/IgM-PB/CD45-KO-   kappa-FITC/lambda-PE/CD38-ECD/CD25-PC5.5/CD11c-PC7/CD103-APC/CD19-APC750/CD22-PB/CD45-KO2. 检测标本：左眼玻璃体液 0.5 mL流式检测结果及诊断：扫描上方二维码查看两项诊断结果及病例详细分析注册学院，还可查看全部精彩病例及专家课程，并有机会获得精美礼品一份：作者介绍：谢闻悦 北京大学深圳医院检验科 副主任技师 主要从事血液肿瘤的流式细胞学检查。////责任编辑：杭璐▼ 点击阅读原文，马上开启病例充电之旅

时间：2020年7月2日14:00 - 14:45内容简介：Agencourt SPRI Reagents提供多种类型核酸提取及片段纯化筛选产品，以SPRI原理(Solid Phase Reverse lmmobilization)的核酸磁珠技术为基础 ，为生物技术公司 、制药公司 、政府部门和科研机构等客户提供完善的测序服务 ，帮助用户得到优良的实验结果。 主讲人简介：毕业于中国农业大学，多年高通量测序和医疗数据管理经验，带领完成NGS不同平台样本处理及流程优化，对实验自动化和试剂产品有深入使用和研究。

2020年5月14日，国家药监局发布《开展化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价工作》。注射制剂一致性评价正式启动！2016年3月5日国务院办公厅发布《关于开展仿制药质量和疗效一致性评价的意见》2017年8月25日国家药监局发布《关于仿制药质量和疗效一致性评价工作有关事项的公告》2018年12月28日国家药监局发布《关于仿制药质量和疗效一致性评价有关事项的公告》2019年10月15日国家药监局公开征求《化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价技术要求（征求意见稿）》和《已上市化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价申报资料要求（征求意见稿）》意见2019年10月15日国家药监局发布《开展化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价工作》论起注射制剂，始终绕不开的话题之一便是不溶性微粒。早在上世纪30年代就有对不溶性微粒引起不良反应的相关报道，通过各方文献，我们已清楚静脉注射制剂中不溶性微粒对人体的危害，主要分为五种：静脉炎等炎症反应、肉芽肿、栓塞、肿瘤、过敏和热原样反应1。日常生活中，我们也会时常听说和看到致死病例的报道。因此，各个国家对不溶性微粒都有严格的质控要求，如我国药典ChP 0903，美国药典USP、、，日本药典JP 6.07 以及欧盟、韩国药典等都明确了对于静脉注射制剂中大于等于10μm和25μm不溶性微粒的数量限值。从制药企业角度讲，其能够自信于产品质量，实现稳步放行也是不溶性微粒说了算。可以说，不溶性微粒的准确、成功检测是实现产品上市的质量关键保障。2020年4月10日，国家药品不良反应监测中心发布了2019年国家药品不良反应监测报告，该报告全面整理了2019年全国药品不良反应情况，对监测中心收集到的151.4万份《药品不良反应/事件报告表》进行了全面的分析汇总。通过1999年-2019年的数据汇总，我们可以看到药品不良反应/事件报告数量呈增长趋势，从2012年开始，每年的报告数量都在120万份以上，且逐年增加。图1  1999年-2019年全国药品不良反应/事件报告数量增长趋势2对2019年151.4万份进行统计分析，按照给药途径，可以看到注射给药占了62.8%，这其中92.5%是静脉注射给药所造成的不良反应，而其他注射给药仅占7.5%。图 2  2019年药品不良反应/事件报告给药途径2因此，在国家法规、一致性评价和市场对注射制剂产品质量的高要求下，以及和国外的无缝对接需求，对我国制药企业的检测能力就提出了更高的标准和要求，而想要在激烈的注射制剂竞争中突出重围占领制高点，有一款放心的不溶性微粒检测仪便至关重要，而这就是HIAC 9703+专注服务于制药企业的初心和决心！我们知道，光阻法微粒分析仪源于HIAC，HIAC成功对微粒的准确、快速检测，影响并推动了药典对不溶性微粒检测的要求和发展，时至今日，各国药典规定的不溶性微粒检测第一法均为光阻法。HIAC 9703+秉承了光阻法的原理并集多检测模式、小体积测试于一身，内置各国药典测试程序，审计追踪完善齐备，可以让您轻松应对各国的严格要求，同时又能保证产品的高质量和检测的低成本。多 检 测 模 式-   自定义测试随时随地，随意参数测试！-   药典程序测试出口？国内？真正实现“全球通”！-   IST测试USP功能，轻松校验！小 体 积 测 试是否还在为单剂量体积无法满足药典要求而苦恼？是否还在羡慕美国药典有USP小体积测试推荐？-   小体积试管夹套件-   0.047’’ x 3.2’’取样针-   1mL注射器真正实现0.1-1000mL任一体积取样、1.3-150μm任一粒径测试分析！审 计 追 踪 完 善 齐 备-   所有测试、操作...“你”有做，“我”有计，丝毫不差。让您的审计追踪更轻松、更放心，也更合规！当然，测试结果的直接判定，有效的电子签名，让您在合规的道理上踏歌而行。不溶性微粒检测创始和传承HIAC 9703+为您值守终产品的产品质量！参考文献：1. 《小微粒 大祸害 -- 注射液中的不溶性微粒不容忽视》2. 《国家药品不良反应监测年度报告（2019年）》点击“阅读原文”获取详细产品信息~

在符合GMP的生产过程中许多关键步骤都需要质量控制 （QC）：制药生产中使用的原材料在生产加工之前必须经过质量控制环节；整个生产过程需要一个质量控制标准操作程序（SOP），以确保污染的可能性降至最低；终产品必须经过质量控制，以确保其符合原药品生产企业的规范和质量标准。原料QC · 生产QC · 终产品QC对于制药企业来说，需要一步一个脚印、踏实稳健地做好整个流程的监督和质控工作，才能真正保障我们“舌尖上的安全”！企业能否在重要节点上应用最适合、最稳健的检测分析仪器，是保证其产品质量的关键之一，而产品质量可以说是其维持长久和市场领先地位的“固本之举” ，尤其是在我国一致性评价、4+7带量采购等国家政策实施和落地的大环境下，更是如此！贝克曼库尔特公司作为生命科学领域内著名的分析仪器生产厂家，早在改革开放之初便进入中国，并始终致力于为我国化药/生物制药客户提供高效的、前沿的颗粒计数和粒度表征应用解决方案，这其中不乏影响行业发展的高光技术。如60年代发明光阻法微粒分析仪的HIAC不仅提供了一贝克曼库尔特公司作为生命科学领域内著名的分析仪器生产厂家，早在改革开放之初便进入中国，并始终致力于为我国化药/生物制药客户提供高效的、前沿的颗粒计数和粒度表征应用解决方案，这其中不乏影响行业发展的高光技术。种快速、准确检测微粒数目的方法，更重要的是影响并推动了药典对不溶性微粒检测的要求和发展，时至今日，各国药典规定的不溶性微粒检测第一法均为光阻法。而这也是HIAC一直专注的！除了静脉用注射制剂，冻干粉、粉针剂、滴眼液以及会给终产品带来微粒风险的药包材等都已将光阻仪器作为第一选择，并严格把守着终产品质量QC的放行大门。当然，高质量的终产品离不开各个环节上的控制，而这其中，水（注射用水、清洗水）和空气（洁净室洁净度）是各工艺都绕不开的，它们就好比人类生存必须的水和空气，缺一不可，同时还需要严格把控。ANATEL是专门用于制药领域的TOC分析仪，在世界范围内享有极高的声誉。凭借完全氧化和动态终点探测技术以及行业内丰富的经验，ANATEL为制药用户在WFI、CIP过程中的水质进行严格的质量把关。坚固耐用的设计、高度的可靠性、优越的性能、法规符合度以及有效降低用户的使用成本等，无处不体现ANATEL TOC分析仪的价值。洁净室（区）尘埃粒子检测的行业标杆MET ONE，一直致力于药厂各级洁净室（区）空气中悬浮粒子的稳定测试。多通道、多流速、多型号的MET ONE满足各级洁净室（区）的测试需求，简单的操作模式、快速取样、可靠稳定的长寿命激光、智能热插拔锂电池等保证了低损耗、高稳定、长续航的仪器性能。这些故事，虽然只是一个个缩影，但尽显贝克曼库尔特在制药行业的专注，也体现出贝克曼库尔特为客户提供高效颗粒计数和粒度表征应用解决方案的初心和决心。下一期我们将详细为您介绍不溶性微粒检测创始和传承者HIAC 9703+如何值守终产品的产品质量，敬请期待！贝克曼库尔特公司颗粒计数和粒度表征产品部分成员-------------------------------------------------------------------------------------------------------------制药用水总有机碳ANATEL PAT700 在线监测制药用水的总有机碳（TOC）和电导率-------------------------------------------------------------------------------------------------------------洁净室尘埃粒子MET ONE 3400 采用光散射法测定洁净室尘埃粒子数目-------------------------------------------------------------------------------------------------------------细胞计数Multisizer 4e 应用库尔特原理实现细胞数目、体积、浓度的准确测量，并可获知质量和表面积分布-------------------------------------------------------------------------------------------------------------细胞活率Vi-CELL BLU 应用台盼蓝染色的全自动细胞浓度、活率测试-------------------------------------------------------------------------------------------------------------制剂粒径LS 13 320 XR采用光散射法简单、快速测定原料药、制剂粒度分布-------------------------------------------------------------------------------------------------------------注射制剂放行测试HIAC 9703+采用光阻法自动检测注射制剂不溶性微粒数，提供合格/不合格报告-------------------------------------------------------------------------------------------------------------贝克曼库尔特，服务健康中国2030！*本产品仅用于科研，不用于临床诊断。点击“阅读原文”获取详细产品信息~

近年来，生物药快速发展并在治疗一些疾病方面显示出明显的临床优势，随着原研生物药专利到期及生物技术的不断发展，以原研生物药质量、安全性和有效性为基础的生物类似药的研发，对于提高生物药的临床可及性和降低研发成本具有重要的意义。2019年中国共有4款“国产”生物类似药获批上市1，还有多款处于上市申请和临床三期阶段的生物类似药，国内生物类似药行业蓬勃发展。生物药物区别于化学药，由于其复杂的结构和生产工艺，很难做到和原研药完全一致，因此在生物类似药的申报中，需要对其各项特性指标进行全面表征和测定，确保其在质量、安全和有效性上与原研药保持一致。而聚集体的检测作为一项关键指标，在进行生物类似药一致性评价时非常重要。FDA在生物类似药指导原则中给出了一些原则性建议，并在实际案例中给出了具体建议。在指导原则中，他们提出，为了充分评估产品的理化性质和生物活性需要应用多种分析方法来评估同一属性。同时他们提到，建议使用分析型超速离心技术（AUC）与尺寸排阻色谱（SEC）等方法共同检测分析抗体药物聚集体。抗体药物聚集体可根据不同的方式划分为：可溶性/非可溶性；共价/非共价；可逆/不可逆；天然/变性；亦可分为：1.  快速可逆的非共价结合的低聚物（二聚体、三聚体等）。2.  不可逆非共价结合的低聚物。3.  共价结合的低聚物（如：二硫键连接的）。4.  可逆非共价结合的大的聚集体。5.  粒径在50-3000nm的大的聚集体。6.  可见的不可逆的聚集体。那么如何精准检测出蛋白药物中这些形形色色的聚集体呢？当前实验室常用的分析方法是SEC-HPLC，它用于的检测溶液中的共价结合的低聚物；但是针对一些非共价结合的低聚物，往往“爱莫能助”。分析型超速离心机（AUC），在蛋白药物聚体的检测方面有它独特的优势。它直接检测最终溶液状态下抗体药物，不需要标准品和标记物，也不需要与基质相互作用，检测结果更精准，已成为FDA检测蛋白药物非共价聚集的“金标准”。以阿达木单抗类似物为例，安进公司研发的ABP501成为首个FDA批准的Humira类似物。在其提交的上市申请中，使用分析型超速离心技术对阿达木单抗类似药ABP501进行了聚集体的定性和定量分析。同时检测ABP501、美国市场Humira与欧洲市场Humira，根据AUC图谱确定其相似性。另外，根据AUC数据结果，证明单体、聚体溶液中百分含量接近，从而确定类似药与原研药的一致性。精准检测，贝克曼库尔特公司的Optima AUC已从欧美走向中国，为抗体药物的研发、质控与审核保驾护航。参考文献：1.新浪医药新闻《盘点中国TOP10生物类似药》2.Liu, Jennifer, et al. “Assessing Analytical Similarity of Proposed Amgen Biosimilar ABP 501 to Adalimumab.” BioDrugs, vol. 30, no. 4, 2016, pp. 321–338.*本产品仅用于科研，不用于临床诊断。点击“阅读原文”获取详细产品信息~

经过小贝上一期的推送，相信大家已经了解到了离心技术尤其是超速离心技术在新冠疫苗研发中的重要性。大家可能有所不知，我们熟悉的超速离心技术还有一位“孪生兄弟”——分析型超速离心技术（Analytical Ultracentrigation，AUC）。1925年瑞典科学家Svedberg发明这一技术，并于第二年制造出第一台分析型超速离心机。经过近百年的应用与发展，目前分析型超速离心技术已广泛应用于生命科学与生物制药领域（想进一步了解这一技术的朋友请移步→AUC技术简介）。随着新冠疫情逐渐平稳，新冠战役已经进入了下半程——新冠疫苗与药物的研发，其中AUC充分发挥其“可直接检测溶液中样品状态”等优势，在小分子药物筛选、分子机制的研究以及抗体与疫苗的质控中均发挥了重要作用。@站酷海洛AUC助力新冠病毒蛋白结构解析蛋白质的结构很大程度上决定了它的性质与功能，了解新冠病毒S蛋白聚集状态、三维结构以及其与其他蛋白的相互作用，将为新药研发人员对小分子药物的设计与筛选、单克隆抗体与疫苗的研发提供重要帮助。厦门大学研究团队使用分析型超速离心技术（AUC）表征了S蛋白不同状态下的溶液中聚集状态，证明S蛋白以三聚体形式存在于溶液中，并在此基础上解析得到S蛋白三聚体的冷冻电镜结构，为小分子药物筛选与疫苗研制提供了坚实的结构基础。AUC助力新冠治疗药物筛选疫情发生以来，研究人员一直致力于寻找有效的病毒抑制剂。新冠病毒中的主要蛋白酶Mpro是一个非常重要的潜在药物靶点，对于抑制病毒复制起着关键作用。德国科研团队与中国长春吉大天元化学技术股份有限公司共同对这一蛋白酶结构展开了研究，研究成果发表在顶级学术期刊《Science》杂志上。他们使用AUC检测不同浓度下Mpro的聚集状态，发现其在溶液中存在单体-二聚体的平衡状态。另外，他们解析得到了新冠病毒Mpro的二聚体晶体结构，并依据其三维结构开发了一种α-酮酰胺抑制剂作为SARS-CoV-2 Mpro的有效抑制剂，帮助推动相应治疗方法的形成。AUC技术表征抗体药物在新冠药物的研究中，除了“老药新用“、筛选抗病毒药物的基本思路之外，单克隆抗体等大分子生物药的研发也是应急攻关的热点。相比于小分子药物，单克隆抗体药物机理清晰，特异性强，副作用较低。与此同时，如果抗体药物质量不佳注射到人体后将起不到相应的治疗作用，这使抗体药物的质控显得尤为重要。目前君实生物、礼来、信达等多家生物制药公司已加入新冠病毒抗体药物研发大军。在抗体药物质控中，Optima AUC分析型超速离心机提供了独一无二的在溶液中检测蛋白性质的系统，可直接分析溶液中抗体的异质性，不需要标准品与基质，更准确表征真实生理状态下的抗体药物，加速药物开发、制剂筛选与质量控制。同时，分析型超速离心技术还可以用来检测抗体偶联药物（ADC）的结合效率以及纳米粒子药物复合体的包装和融合。疫苗质控中的AUC除了筛选有效药物之外，疫苗的研发也是为防控新冠疫情主攻的方向之一，我国也展开了灭活疫苗、核酸疫苗、重组疫苗等多条技术路线的研发。在疫苗的质控中，AUC可以用于表征产品在最终溶液中的特性以及批次一致性。厦门大学研究团队此前使用AUC技术检测了VLP病毒样颗粒HEV疫苗的体外组装过程。另外利用AUC技术分析表征了HPV疫苗在溶液中状态以及批次间一致性。总而言之，无论是小分子药物的筛选、抗体药物的研发与质控以及新冠疫苗的研究都少不了分析型超速离心机（AUC）的身影。除此之外，AUC还可用于病毒载体质控、检测蛋白间相互作用等研究中。参考文献：1.Li T, Zheng Q, Yu H, et al. Characterization of the SARS-CoV-2 Spike in an Early Prefusion Conformation[J]. bioRxiv, 2020.2.Zhang L, Lin D, Sun X, et al. Crystal structure of SARS-CoV-2 main protease provides a basis for design of improved α-ketoamide inhibitors[J]. Science, 2020, 368(6489): 409-412.3.Yang C, Pan H, Wei M, et al. Hepatitis E virus capsid protein assembles in 4M urea in the presence of salts[J]. Protein Science, 2013, 22(3): 314-326.4.Pan H, Li Z, Wang J, et al. Bacterially expressed human papillomavirus type 6 and 11 bivalent vaccine: characterization, antigenicity and immunogenicity[J]. Vaccine, 2017, 35(24): 3222-3231.*本产品仅用于科研，不用于临床诊断。点击“阅读原文”获取详细产品信息~

有效药物与疫苗是防控新冠疫情的制胜武器。疫情发生以来，国内外多家科研机构和制药公司兵分多路，与时间赛跑，全力以赴开发有效抗病毒药物与疫苗。贝克曼库尔特生命科学事业部作为一家以“服务健康中国2030”为愿景的公司，一直关注疫情发展，全力支持前线的同时，旗下的多款产品助力新冠治疗药物与疫苗研发，如之前提到的Biomek自动化工作站、Vi-Cell系列细胞计数和活力分析仪（请参考《浅谈加速新冠治疗药物与疫苗研发的两种途径》）。而离心技术作为生命科学领域的一项基础技术，贯穿整个药物与疫苗研发、生产、质控的过程。贝克曼离心机全线产品满足新冠病毒药物与疫苗研发中对于仪器的需求，并提供技术支持与保障。我国目前新冠疫苗的研发按照灭活疫苗、重组蛋白疫苗、腺病毒载体疫苗、减毒流感病毒载体活疫苗、核酸疫苗五条技术方向稳步推进。不同类型的疫苗各有其优缺点，在研发上也各具特点。图1：新冠疫苗研发路径灭活疫苗灭活疫苗是一种经典的疫苗形式，是指病原微生物经培养、增殖，用理化方法灭活后制成的疫苗。目前我国两款新冠病毒灭活疫苗获得国家药品监督管理局许可，启动临床试验，分别由国药集团中国生物武汉生物制品研究所、北京科兴中维生物技术有限公司开发。制备灭活疫苗的工艺流程包括病毒培养、灭活病毒、纯化病毒、加入佐剂等几个关键环节。一般通过动物器官培养、鸡胚培养或细胞培养来得到病毒样品。收获病毒颗粒后进行灭活，并进行纯化精制，从而获得高纯度的目标病毒。图2：基于细胞培养的灭活疫苗典型开发流程贝克曼离心机产品线提供了一系列高性能的离心机和转头,以便研究人员选择符合其疫苗生产相关步骤需求的离心系统。基于细胞与鸡胚的疫苗生产流程中，Avanti JXN-26智能型高效离心机可配备最大容量为6 升的JLA-8.1000定角转头与连续流转头，满足大体积样品的分离与更高的离心效率。病毒经灭活、过滤富集后，借助超速区带离心 - 在蔗糖溶液中按照颗粒的大小和形状可将病毒与其他颗粒分离。回收的病毒颗粒可使用去垢剂溶解和分离外膜，然后再次借助离心分离进行澄清和去除杂质。Optima XPN超速离心机配合Type45 Ti定角转头、SW-32 Ti水平转头以及Ti-15区带转头可轻松胜任反复的离心需求保证对样品颗粒进行快速高效的分离纯化，以用于后续疫苗制剂的生产。图3：Avanti JXN-26高效离心机及6升大容量定角转头重组蛋白疫苗重组蛋白疫苗是指体外表达新冠病毒的S蛋白，提纯制成疫苗，然后诱导机体产生抗新冠病毒抗原表位的抗体，从而阻止病毒侵染细胞或中和杀死病毒。在借助体外表达系统如哺乳动物细胞、大肠杆菌等表达S蛋白时，大量细胞的收集同样必不可少，同样是贝克曼Avanti JXN-26智能型高效离心机可以大展身手的重要步骤之一。腺病毒载体疫苗与流感病毒载体疫苗腺病毒载体疫苗与流感病毒载体疫苗都是病毒载体疫苗，以改造过的腺病毒或流感病毒为载体，搭载新冠病毒的S基因进入体内，使人体产生对S蛋白的免疫记忆，从而达到将病毒“拒之门外“的效果。目前由军事科学院军事医学研究院陈薇院士和康希诺生物联合研发的全球首个重组新冠病毒疫苗已于进入二期临床试验。小贝在之前的推文中也讲到，由于病毒颗粒沉降系数较小，需要使用超速离心技术来进行分离（请参考《病毒分离需要什么样的离心机》）。核酸疫苗核酸疫苗包括mRNA疫苗和DNA疫苗，是将编码病毒蛋白的遗传物质注入人体内，利用人体细胞合成目标蛋白来诱发相应免疫力。由于裸露的核酸物质直接进入体内会被降解，通常利用载体将其注入体内，脂质纳米粒（LNPs）载体是核酸疫苗常用的载体之一。在药物制备中，使用超速离心技术去除游离药物、进行产物浓缩、测定药物包封率已基本成为以LNPs为载体的核酸疫苗制备的常规流程。贝克曼针对疫苗研制提供了一系列离心解决方案，从疫苗的研发、生产到质控的整个过程满足对于仪器的需求。Avanti JXN-26为病毒培养中细胞的收集提供更大的容量、更快的速度、更好的温度控制、更稳定的真空系统和更加简单易用的界面，帮助研究人员实现更好的高通量分离。而作为病毒分离专家的Optima X系列以其安全可靠、操作方便、专业设计、卓越性能满足高效分离纯化病毒的需求，成为病毒载体分离的品质之选。图4：用于疫苗生产的离心机和转头推荐 福 利 来 啦 扫描下方二维码或点击文末的“阅读原文”联系我们咨询技术支持与配置报价，即可获取“新冠及其他病毒疫苗/载体文献检索列表”和贝克曼库尔特特别礼品！      扫码得精美礼品哦~自1947年第一台商用超速离心机发明以来，贝克曼库尔特离心技术已有70多年的历史。早在19世纪60年代，已有许多用户使用贝克曼离心机成功分离了多种病毒颗粒。截至现在，贝克曼超离已帮助客户分离纯化得到流感病毒、肝炎病毒、腺病毒、慢病毒等多种几乎覆盖所有类型的病毒样品。贝克曼庞大的用户群体已为研究人员储存发表了数以万计的病毒分离方法与文献，助力病毒研究的同时，也使贝克曼离心机成为了当之无愧的病毒分离专家。*本产品仅用于科研，不用于临床诊断。请点击“阅读原文”获取“病毒及病毒载体分离纯化文献检索列表”~

进化在自然界中每天都在发生，从未停止，由自然选择压力进行筛选，往往需要漫长的时间。近代生物学的发展使人们认识到蛋白质进化大多是由于某些点突变或修饰的积累而形成的。2018年诺贝尔化学奖获得者弗朗西斯.阿诺德，其首次提出了酶的定向进化理论而获此殊荣。2018年诺贝尔化学奖得主蛋白质定向进化技术，被广泛的应用于酶分子改造，以改变酶分子的活性和催化效率，改善底物的选择性、pH和温度的耐受性等方面，也可以应用于改善代谢途径、优化代谢网络等，在蛋白质工程、代谢工程和合成生物学领域都发挥了重要的作用。蛋白质定向进化策略根据原理的不同，可以主要分为三种策略，随机进化、理性进化，和介于两者之间的半理性进化。这三种方式各有优缺点，其中随机进化的多样性最高，但样本量巨大，筛选困难，常使用易错PCR、DNA Shuffling等技术；理性进化，借助于软件建模，进行分子对接等模拟实验，减少了筛选的工作量，但往往得到的蛋白质活性不高；半理性进化，根据晶体结构进行同源建模，对特定位点进行定点饱和突变的方式，缩小突变文库，提高阳性突变率。蛋白质定向进化策略及方法[1]除了理性设计突变外，其他两种进化策略所产生的突变库都需要大量的筛选工作，依靠人工进行筛选，每天重复性的机械操作让实验员感到乏味，巨大的工作量和数据量让项目经理感到崩溃，时间和资金的耗费让老板难以面对。高通量自动化筛选加速进化过程想要快速从成千上万的蛋白质中筛选出阳性突变，短时间内完成漫长的自然筛选过程，依靠人工筛选，需要耗费大量人力，并且人员之间的操作误差无法避免，无法实现标准化，导致结果无法完全相互比对，丢失一些阳性突变。以自动化液体处理工作站为核心的自动化系统，逐渐成为酶定向进化中对突变文库进行高通量筛选的不二选择。自动化系统可以实现突变文库筛选的自动化、高效化、标准化，提高实验通量及效率，缩短酶定向进化过程的筛选周期。以大肠杆菌为表达宿主，随机进化的策略进行酶定向进化为例。以大肠杆菌为宿主的酶定向进化流程示意图在上述流程中，主要以自动化液体处理工作站为核心，进行大量的液体处理，整合克隆挑选机器人解决人工挑选的限速步骤，以及培养箱、酶标仪、离心机、封膜机、撕膜机等设备，协同配合自动化完成整个流程。Biomek i7自动化液体处理工作站及Qpix系列高通量微生物克隆筛选系统随着技术的不断发展，流式细胞技术也被应用于突变文库的筛选之中，利用分选型流式细胞仪进行突变文库的初筛，不仅通量高、速度快，还可以根据荧光信号强度将细胞分选至96孔板、384孔板甚至是1536孔板中，进行培养和第二轮筛选。MoFlo Astrios EQ 超高速流式分选系统Beckman Coulter自动化部门拥有丰富的整合经验以及成熟的解决方案，为您量身定制属于自己的高通量自动化筛选系统。心动不如行动，一起来设计属于你的自动化系统吧！*本文涉及的内容与产品仅用于科研和工业，不用于临床诊断。参考文献：王晓玥, 王白云, 王智文, 陈涛, 赵学明等. 蛋白质定向进化的研究进展. 生物化学与生物物理进展. 2015, 42(2): 123-131.往期回顾：         实验室定制化整合系统         可以为你节省90%以上试剂的液体处理工作站         当基因编辑遇上自动化工作

2020年注定是不平凡的一年，正当所有人的目光都还聚焦在新冠肺炎全年肆虐，可能对各自的生活和工作会造成多大影响时。4月20日晚，芝加哥商品交易所5月交货的轻质原油期货（WTI5月合约）出现闪崩行情，当天报以每桶-37.63美元结算，历史上首次跌入“负值”1，相当于买油不要钱还倒贴给你钱。这么好的事情对于我们这个原油消费大国而言，是不是一个很好的购买时机呢？因为根据海关总署的数据，2019年我国进口原油创纪录达到5.06亿吨，较2018年高出9.5%，原油对外依存度已突破70% 2 。对于国内的炼油厂而言，若此时大量低价进口原油，生产出汽柴油、航空煤油、润滑油、液压油等产品来销售，必将获取颇丰的利润。而对于下游的润滑油、液压油生产企业，也将在此次行情中减少购买成本。但不管是生产还是使用这些燃油和润滑油产品，产品的质量检测是无法回避的一环。其中一个是油液颗粒污染的检测，因为哪里有液体，哪里就有液体的颗粒污染。而解决此问题可能需要完成一系列关键步骤，例如仔细监控机器的磨损迹象、评估过滤器的过滤性能，确保所购液压油可供使用。根据国内外统计资料，液压传动系统的故障大约有80%是由于液压系统的污染引起的，在各种污染物中，固体颗粒污染物引起的液压系统故障占总故障的60-70% 3。颗粒污染虽然是不可避免的，但是其破坏性影响是可被消除的。通过借助自动化便携式/或在线液体颗粒计数器，可以在采油和炼油现场，快速地检测油液颗粒的污染程度，避免因为过度污染造成的严重后果。这些便携或在线的设备可以适用于海上油气钻井平台，也可以用于陆上油田和炼油厂。通过使用液体颗粒计数器，可以帮助生产和使用以上这些石油产品的企业：-   保证产品的质量-   降低维护的成本-   提高机器可靠性-   提高使用人员的操作安全性-   减少润滑剂和过滤器的消耗-   报告标准（ISO4406、SAE 4059、NAS 1638等）贝克曼库尔特的HIAC液体颗粒计数器长期以来一直处于业内领先地位。它们不仅符合了 ISO 11171-2016的准确性和可靠性准则，还致力于满足石油行业苛刻的易用性和维护标准的要求。HIAC 8011+ 实验室液体颗粒计数器-   分析液压油、溶剂和水溶液的样品-   监控移动和工业液压系统中的颗粒污染平-   测量设备的滚降清洁度-   测试零件清洗系统的清洁度HIAC PODS+ 便携式液体颗粒计数器-   适用于基于现场的流体动力应用和更多、 适应燃油、乙二醇、有机物和水性流体-   样品流体来自 1 - 425cSt，无需稀释-   数据分析时间在 60 秒以内-   流量路径在几秒钟内清洁，消除了样品结转HIAC ROC（远程在线计数器）-   连续在线 + 免维护操作-   设计适合任何应用 （2-424 cSt）-   高度可视化的视频显示（ISO、JAS 或 SAE 报告代码）-   高温和压力能力，适用于恶劣环境*上述产品仅供工业与科研使用，不用于临床诊断。参考资料1. “负油价”幕后 2. 深度解读 | “买油送钱” 你能捞到好处吗？3. 固体颗粒污染物对液压传动系统的危害请点击“阅读原文”获取“颗粒污染计数器”详细资料~

在新冠病毒研究与药物研发中，病毒的分离必不可少。但是病毒颗粒（直径介于20nm-300nm之间1，电镜结果显示新冠病毒直径约为100nm2）和包装产生假病毒的慢病毒、腺病毒、腺相关病毒（AAV）等多种类型病毒载体的沉降系数各不相同，而低转速、低离心力无法使病毒沉降，通常需要60,000-100,000×g以上的离心力来进行有效分离。什么样的离心机才能满足病毒分离的需要呢？病毒分离专家贝克曼库尔特推出的Optima XPN系列超速离心机以其卓越性能、安全可靠、操作简单、专业设计等满足高效分离纯化病毒颗粒的需求，助力病毒研究。1. 生物安全由于病毒样品本身的高感染性与高污染性，在进行病毒研究时如何保障生物安全至关重要。在进行病毒分离纯化时，为了防止气溶胶污染以及实验环境清洁，必须要使用生物安全离心机（生物安全离心机长什么样）。Opima XPN系列超速离心机考虑到整体生物安全性设计，通过配备前后两个制药级气体除菌过滤器（PALL），在排出气体及释放真空时保证气体清洁。同时，搭配生物安全转头与多重保护离心管进一步防止病毒样品溢出，提高生物安全性。制药级气体除菌过滤器 - 采用EMFLON II 制药级气体除菌过滤器，截留精度远高于HEPA，有效防止气溶胶污染。同时双过滤器的安装保障进出气体清洁，提升生物安全等级。2. 运行安全保障病毒分离时使用的超速离心机除了需考虑生物安全之外，仪器本身的运行安全同样至关重要。Optima XPN系列具备多重安全检测系统：-  过速检测保证转头转速不高于最高转速-  DRIC动态惯量检测在动态情况下进行转头惯量检测和能量计算，保证仪器的安全运行-  新颖的插入式（Top-loading）水平转头SW32 Ti和SW32.1 Ti，使用更加方便、安全插入式SW32 Ti水平转头3. 操作简单，使用方便-  Optima XPN系列超速离心机具备触幕式15寸超大智能显示屏、可选择中文或英文界面，使可选参数一目了然，简化操作。另外，远程监控与预约系统也使离心机的使用更加方便快捷。-  对于差速离心以及操作相对复杂的密度梯度离心方法，内置的eXPert离心专家软件可模拟不同实验进程以及计算相应实验参数计算，帮助用户在病毒分离时设计实验与运行，提高实验效率。-  作为离心专家，贝克曼在国内外有庞大的用户群，在文献检索时我们可以看到大多数科研人员选择使用贝克曼超速离心机来进行病毒的分离纯化，研究人员可参考文献中的实验参数，简化自己的实验流程，快速分离得到目标样品。中文操作系统，触幕式15 寸液晶显示屏；eXPert软件计算界面；即时运行曲线图4. 高通量分离在进行病毒纯化时，为了得到更高纯度的病毒样品，常使用密度梯度离心方法。除可选择常用的定角转头与水平转头外，区带转头可实现大样品量分离。Optima XPN系列提供特殊Ti-15区带转头，最大相对离心力可达到102,000×g，满足大量病毒样品高纯度的分离纯化需求。核心组件将转头钵体分为四个部分，当转头在2,000 RPM 运行时，通过一个可拆卸的密封加样组件将梯度液泵入转头，密度较低的梯度液先注入，顺次泵入密度较高的梯度液，在离心力的作用下，依次形成不同的梯度液层。然后加入样品，完成设定转速的离心5. 全面支持在选择合适的离心机时，除了仪器本身的特性之外，贝克曼公司秉持提供优质快速售后服务与无后顾之忧的应用支持理念。目前有近70位资深维修工程师，每一位均通过严格培训与考试，工作经验丰富，平均超过5年维修与支持经验。完善的售后体系遍布于全国各地，为用户提供快速响应，更可提供FRIP现场转头状态检测服务，保障转头安全使用，避免离心事故的发生。此外 ，应用支持团队针对用户需求，进行上门理论与操作培训，帮助用户高效分离得到高纯度病毒样品。贝克曼公司的智能型超速离心机Optima XPN系列为慢病毒、腺病毒等常用病毒载体的纯化提供了完整的低成本高通量解决方案。最先进、安全和高效的设计可为您的实验、生产和产品申报保驾护航。 福 利 来 啦 扫描下方二维码或点击文末的“阅读原文”联系我们咨询技术支持与配置报价，即可获取“新冠及其他病毒疫苗/载体文献检索列表”和贝克曼库尔特特别礼品！      扫码得精美礼品哦~自1947年第一台商用超速离心机发明以来，贝克曼库尔特离心技术已有70多年的历史。早在19世纪60年代，已有许多用户使用贝克曼离心机成功分离了多种病毒颗粒。截至现在，贝克曼超离已帮助客户分离纯化得到流感病毒、肝炎病毒、腺病毒、慢病毒等多种几乎覆盖所有类型的病毒样品。贝克曼庞大的用户群体已为研究人员储存发表了数以万计的病毒分离方法与文献，助力病毒研究的同时，也使贝克曼离心机成为了当之无愧的病毒分离专家。往期回顾高效提纯新冠病毒，贝克曼离心机是如何做到的？为什么要分离病毒及构建假病毒？文末有干货！参考资料1. 常见细菌病毒的直径2. 新型冠状病毒“通缉照”，你看懂了吗？*本产品仅用于科研，不用于临床诊断。请点击“阅读原文”获取“病毒及病毒载体分离纯化文献检索列表”~

制药生产环节对于空气的洁净度要求是非常苛刻的，生产区域内的空气洁净度会直接影响成药的质量与品质。因此FDA及世界各地其他机构均规定了洁净室中生物药/化药生产的空气质量条件。由于这是硬性要求，已经成为制药企业的日常工作，但其中一些有趣的事你可能未必知道。  第一件你可能不知道的事通常大家认为这是对尘埃粒子如粉尘、碎屑等的洁净度要求，但实际上真正的危险是人体上的微生物。人类每小时脱落约30,000个皮肤细胞1，所有这些细胞都是潜在的微生物携带者。不幸的是我们目前尚无实时检测空气中微生物的技术。因此，空气颗粒计数器被作为替代物使用。图1 人类皮肤和微生物  第二件你可能不知道的事洁净室的空气质量监测通常是由质控人员完成。但一个日益增长的趋势是，进行环境监测的负担正从质控微生物团队转移到生产人员，原因有两个：a）微生物人员相对而言 进行此类日常任务的成本很高； b）减少了洁净室内的人数，从而减少了产品污染的可能性。但是，生产团队对日常环境监测的了解程度不高，这就构成了挑战。-   增加监管者负担-   责任从质量控制转移到生产团队-  每月可能有数千个数据点图2  环境监测风险幸运的是，贝克曼库尔特专注于制造优化工作流程效率的仪器，包括用于洁净室空气质量监测的MET ONE 3400便携式空气颗粒计数器。创新的硬件和软件解决方案降低了实施的复杂性，同时确保所需的数据已被收集、记录并随时提供给环境监测小组。MET ONE 3400便携式空气颗粒计数器此外，贝克曼MET ONE空气颗粒计数器界面直观，操作简单，可以对采样SOP和位置进行预编程和自动设置，使流程更稳健，从而将这一非常耗时，劳动密集型的工作变得简单。有力支持该行业朝着由洁净室的生产人员进行环境监控的方向发展。同时使用MET ONE 3400简易无纸化便携式空气颗粒计数器可以简化对全球监管标准的遵从性，并减少由于数据完整性问题导致的审计缺陷的机会。确保洁净室始终符合良好生产规范 (如CGMP1、EU-GMP2和PIC/S3)的要求。MET ONE 空气颗粒计数器产品特点- 热插拔电池-百分百确保仪器长时间连续运行使用热插拔电池，无论仪器是充电还是断电、计数归零及采用备份电源时都不会停止监测- 测试向导能使您在监测洁净室时让合规性更容易得到保证可在监测您的洁净室环境时节省时间并消除错误- 灵活的通讯方式——设置简单，数据传输方便- 直观的用户界面简便的区域，位置和运行参数的配置和复制，节约运行时间。只需将完整的配置拷贝到一个 U 盘中，从而消除设置错误，并节省时间。还可以在整个颗粒计数组部署采样计划！- 符合ISO 21501-4 标准的可靠性和准确性专用于满足特殊颗粒计数要求，仪器与仪器之间的准确度和再现性完全符合 ISO21501-4标准要求。- 顺序采样系统可用 MET ONE 3432 顺序采用系统部署低成本的现场监控解决方案。用单台 MET ONE 3400 系列空气颗粒计数器可依次从多达32个点进行顺序采样。参考文献1. Health How Stuff Works, How many skin cells do you shed every day? by Ed Grabianowski. 请点击“阅读原文”获取更多产品信息~

贝克曼离心机—您实验室中的病毒分离专家高效分离纯化病毒样品是病毒学研究以及抗病毒药物筛选、疫苗研制的基础。自19世纪60年代以来，贝克曼超速离心机一直致力于病毒分离研究，已成功帮助科学家分离得到几乎所有病毒种类。作为当之无愧的病毒分离专家，贝克曼Optima X系列超速离心机以其安全可靠、操作方便的卓越性能赢得了科学家的青睐，成为病毒分离的最佳之选。新冠肺炎疫情以来，新病例迅速增加，在世界范围内引起大规模爆发，并导致了相当高的发病率和死亡率。科学家已鉴定其病原体为SARS-CoV-2，2020年3月11日，WHO将COVID-19列为大流行病。在病毒研究与药物筛选、疫苗研发中新冠病毒的分离纯化是必不可少的重要步骤，利用超速离心技术高效分离病毒的方法已被国内外专家广泛认可，成为病毒分离的主要方法。超速离心机分离病毒中国医学科学院与北京协和医学院的研究团队通过质粒转染构建了SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系统，证明人类ACE2（血管紧张素转化酶2）是SARE-CoV-2病毒的功能受体，同时他们对SARS-CoV-2的易感细胞系、病毒受体、侵入途径等进行了研究，揭示了病毒侵入人体细胞的具体过程，这一研究已发表在《Nature Communication》杂志。在研究中，为了检测假病毒系统SARS-CoV-2 S蛋白的表达，他们首先需要将假病毒颗粒从细胞裂解后的上清液中分离出来。在分离过程中，他们使用Beckman超速离心机，将病毒上清加入SW41水平转子的离心管中，并在离心管底部加入20%的蔗糖垫液，然后在4℃环境下以25,000rpm的转速离心2h。离心完毕后弃去上清，留下管底沉淀，并用30 μl缓冲液重悬，得到SARS-CoV-2假病毒样品用于后续检测。在超速离心分离病毒时，为了保持病毒颗粒的完整性与病毒形态，经常使用垫液沉淀，例如在管底加入20%的蔗糖垫液，使颗粒到达管底时减速沉降，最大程度保持病毒颗粒活性与完整度。超速离心机助力新冠病毒提取武汉病毒研究所的石正丽研究员在2013年发表于国际顶尖杂志《Nature》的一篇研究中提到，他们从蝙蝠粪便样品中分离到一株活体的SL-CoV冠状病毒。在进行毒株提取与分离时，石正丽研究团队收集细胞培养上清液后，使用Beckman超速离心机Type 90 Ti定角转头，加入20%的蔗糖垫液80,000×g离心90分钟，对收集到的病毒颗粒进行分离与浓缩。PBS重悬后染色，进行透射电镜的观察。分离SARS-Cov-2假病毒样品在新华医院与杭州BaylorOracle公司合作对于SARS-Cov-2的抗病毒药物筛选研究中，他们通过体外构建SARS-Cov-2假病毒，研究发现吲哚美辛（indomethacin）是一种有效的SARS-Cov-2抑制剂。在分离SARS-Cov-2假病毒样品时，他们同样使用20%蔗糖垫液，50,000×g超速离心90分钟后，用PBS重悬得到病毒样品，并用于细胞感染。更高纯度病毒样本提取在病毒研究中，当使用电镜等方法观察病毒形态时，对病毒颗粒的纯度要求较高，仅使用差速离心法，如前文介绍的蔗糖垫超速离心，并不得到高纯度的病毒样品。因此通常使用密度梯度离心与蔗糖垫超速离心结合的实验方法来获得满足要求的高纯度、高浓度的病毒颗粒。加拿大公共卫生局的研究人员在使用冷冻电子显微镜研究SARS-CoV冠状病毒与ACE2结合时的构象变化时，详细描述了他们如何使用Beckman的超速离心机进行病毒分离纯化的。收集上清后，他们首先使用Beckman SW32水平转头28,000rpm离心90分钟，PBS重悬后得到SARS-CoV病毒样品粗提产物。然后将病毒样品置于12-30%的碘克沙醇梯度液中，使用SW40转头，38,000 rpm离心2.5小时，然后收集高纯度的病毒样品用于电镜检测。总而言之，贝克曼作为离心技术领域的专家，使用贝克曼超速离心机分离纯化病毒已得到科学家的广泛认可，具有庞大的用户群体与文献支持，是您进行病毒研究的可靠选择。为了帮助研究人员高效分离病毒毒株与假病毒，病毒分离专家贝克曼库尔特推出病毒纯化专用的超离配置方案，致力于帮助客户解决病毒分离难题。 福 利 来 啦 扫描下方二维码或点击文末的“阅读原文”联系我们咨询技术支持与配置报价，即可获取“新冠及其他病毒疫苗/载体文献检索列表”和贝克曼库尔特特别礼品！      扫码得精美礼品哦~自1947年第一台商用超速离心机发明以来，贝克曼库尔特离心技术已有70多年的历史。早在19世纪60年代，已有许多用户使用贝克曼离心机成功分离了多种病毒颗粒。截至现在，贝克曼超离已帮助客户分离纯化得到流感病毒、肝炎病毒、腺病毒、慢病毒等多种几乎覆盖所有类型的病毒样品。贝克曼庞大的用户群体已为研究人员储存发表了数以万计的病毒分离方法与文献，助力病毒研究的同时，也使贝克曼离心机成为了当之无愧的病毒分离专家。往期精彩为什么要分离病毒及构建假病毒？*本产品仅用于科研，不用于临床诊断阅读原文

肥大细胞白血病（Mast cell leukemia，MCL）又称为组织嗜碱细胞白血病，约占恶性肥大细胞肿瘤的 15％。但因其罕见，在体内恶性增殖的晚期表现及症状，又与急性白血病相似，所以很容易与急性嗜碱性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病嗜碱性粒细胞急变或伴骨髓嗜碱粒细胞增多的 AML 混淆。那么，面对 MCL 有什么相应的诊断策略吗？有哪些特异性表现可以作为诊断的突破口吗？以下临床病例可为您详细解答：////病史介绍：患者男性，59 岁。反复腹泻、乏力、皮疹、消瘦 1 年；面色黝黑，贫血貌，睑结膜苍白，浅表淋巴结不大，B 超示脾脏肿大，肋下 7 cm 可触及，肝脏肿大，肋下 2 cm 可触及。血常规 ：白细胞计数 18.2×109/L，红细胞计数 1.64×1012/L，血红蛋白 60 g/L，血小板计数 142×109/L。外周血白细胞分类：中性分叶核粒细胞 22%，淋巴细胞 30%，单核细胞 3%，嗜酸性粒细胞 2%，分类不明细胞 42%，原始细胞 1%，有核红细胞 2 个/100 个白细胞。初步检查及诊断：骨髓细胞形态学检查：骨髓增生极度活跃，粒、红二系增生受抑，巨系增生活跃。血小板散在或小簇可见。髓片中分类不明细胞约占 79%，散在或成堆分布。此类细胞胞体大小不一，呈圆形、椭圆形或梭形，胞核圆或不规则，可见单个核、双核、分叶核，部分胞核中可见核仁，胞质中充满深紫色大小不一的颗粒。细胞化学染色结果：POX（-）100%；PAS（-）10%，（+）14%，（+++）76%；NAS-DCE（+）100%；甲苯胺蓝染色（+）100%；图 1 骨髓染色基因检测：骨髓 KIT 基因 F522C 突变。骨髓活检：骨髓象提示造血组织增生明显活跃，未见幼稚细胞、淋巴细胞、浆细胞增多和聚集。可见一类细胞弥漫单一性分布，胞体小，胞质少，胞核呈圆形的细胞异常增生。巨核细胞数量大致正常，胞体中等，核有分叶，散在分布。骨髓间质骨小梁规则，未见明显纤维化。该细胞免疫组化结果：CD34（-），CD117（+），髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）显示粒系细胞阳性。综上分析考虑肥大细胞（mast cell，MC），提示 MCL 可能。流式检测方案及检测结果：以所有 WBC 设门，异常细胞比例约占 61.1%，该群细胞 CD45 强表达、SS 中等、FS 较大，强表达：CD9，CD33，CD117；表达：CD2，CD13，CD203c；不表达：CD3，CD4，CD5，CD7，CD19，CD56，CD11b，CD15，CD14，CD64，CD123，CD25，CD34，CD38，HLA-DR，CD138，MPO，CD79a，cyCD3图 2 流式细胞学检查结果（以上数据来自 Navios 流式细胞仪采集，Kaluza 软件分析）病例分析与诊断策略：参考*****的诊断标准，临床诊断为 MC。总结与思考：急性肥大细胞白血病很少见，容易与急性嗜碱性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病嗜碱性粒细胞急变或伴骨髓嗜碱粒细胞增多的AML混淆。在免疫表型上、形态学以及免疫组化的染色结果*******扫描下方二维码或点击「阅读原文」，即可查看完整诊断策略及病例思考。作者简介：吴婧硕士，主管技师，就职于上海交通大学附属瑞金医院血液研究所主要从事白血病和淋巴瘤免疫分型工作。////点击「阅读原文」，查看更多精彩病例、课程。注册学员即可学习更多临床病例、大咖课程！注册用户中，也将随机选取 30 位，送上「鼠」于你的精美公仔！责任编辑：杭璐阅读原文

新冠疫情已经在全球范围爆发，目前确诊感染人数已经超过190万，并且这一数值还在持续增长中。在疫情爆发初期，我国科研战线迅速行动，不到一周时间就确定了新冠病毒的全基因组序列并分离得到了病毒毒株，及时向全球共享。那么为什么分离病毒毒株这么重要呢？毒株分离的意义和难度病毒毒株的分离对于疫情的防控、抗病毒药物的筛选、疫苗研制等都具有重要意义。首先，分离病毒毒株后，可以得到新冠病毒包括衣壳蛋白、全基因组序列在内的更详细的信息，帮助快速诊断试剂盒的研发，这对于新冠肺炎患者的临床诊断和治疗有非常积极的帮助。其次，得到病毒毒株后，将助力于其致病机理的研究，例如新冠病毒与宿主的结合机制、感染病毒后细胞内的免疫应答等等。最后，病毒毒株的成功分离可以帮助进行抗病毒药物的筛选和疫苗的研发。正如中国工程院李兰娟院士所说，“分离出病毒毒株，意味着我们已经拥有了疫苗的种子株。用其制作疫苗株并通过检测后，就可以制备疫苗”。左图1：新冠病毒电镜照片（来自中国微生物组数据中心）；右图2：新冠病毒透射显微镜图像（来自NIAID-RML)然而，虽然目前全国各地新冠研究、药物及疫苗研发如火如荼地开展，但由于新冠病毒株的高传染性与高危险性，毒株始终较难获得，早期研发不易推进。究其原因，首先是培养新冠病毒对实验室要求极高 — 至少须生物安全水平三级 (BSL-3) 实验室；其次实验人员资质、工作流程、污染物的处理都须通过严格的审核，并得到国家卫健委批准。假病毒及病毒载体揭秘随着科学家们不断深入地了解和研究，开发表达刺突蛋白（S蛋白）的新冠假病毒成为辅助治疗性筛选的有力工具。截止到目前为止已有多篇基于SARS-CoV-2假病毒中和抗体活性检测的文章发表在国际权威杂志上。假病毒不仅可应用于血清中和抗体检测，还为后续单克隆抗体及抗病毒药物筛选和评价、疫苗研发及病毒感染机制研究等奠定了基础。图3：由中国医学科学院/北京协和医学院病原生物学研究所的研究团队在国际顶级学术期刊Nature的子刊Nature Communication上发表 ——《Characterization of spike glycoprotein of SARS-CoV-2 on virus entryand its immune cross-reactivity with SARS-CoV》。此项研究构建SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系统和293T的hACE2稳转细胞系，以此确定SARS-CoV-2的易感细胞系、病毒受体、侵入途径和蛋白酶激活，揭示了SARS-CoV-2入侵人体细胞的具体过程。图4：SARS-CoV-2-S假病毒包装过程，图片来源医麦新观察丨《新冠病毒株极难获得，假病毒提供解决方案助力药物开发》假病毒是依据已公开的序列而制备成一种具有原病毒的基本特点和免疫原性，同时又不具备致病性，方便实验室大规模使用的替代物。由于其生物安全风险较低（仅要求实验室生物安全级别二级(BSL-2)），质控方法可控，可以长期稳定制备和供应。假病毒因其具有“逼真” 、稳定、安全等特点，已被广泛用于研究感染机制，受体识别和病毒抑制，以及开发和评估抗体和疫苗。假病毒构建通常都依赖于病毒载体系统的重组包装(图5)，理想的病毒载体同样也表现出基因组稳定性、细胞型特异性、有效感染率高、对受感染细胞生理机能影响小，同时致病性小等特点。借助病毒载体，例如，慢病毒 (Lentivirus)、水泡性口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus, VSV)、腺病毒 (Adenovirus)、腺相关病毒(Adeno-associated Virus, AAV)将外源基因转导入细胞并构建新的假病毒模型已被广泛应用于生命科学研究，科学家已经探索了出多种用于创建包膜型假病毒的包装系统，用于诸如埃博拉病毒(EBOV)，马尔堡病毒(MARV)和拉沙热病毒(LASV)等新兴传染病(EID)的研究。科研人员使用假病毒模拟抗体阻断病毒进入细胞的生物过程，检测抗体或血清对假病毒是否具有中和活性 (假病毒通常经过改造以携带荧光素酶报告基因，使其进行定量分析时比对野生型病毒容易得多，而且已证明假病毒感染的细胞数量与报告基因表达成正比)。图5：假病毒包装过程 - 将荧光素酶和gp64基因插入VSV的全长cDNA克隆中（代替G基因命名为ΔG-Luc）。gp64pv和VSVpv是通过将VSVΔG / Luc-* G分别瞬时感染表达GP64和VSVG的293T细胞而产生的。由于病毒与假病毒颗粒较小，直径基本在20-300纳米之间 （新冠病毒电镜照片显示其直径仅为100纳米），低转速、低离心力条件并不能使病毒颗粒充分沉降，须借助超速离心技术来进行病毒颗粒分离。而病毒载体的分离方式与病毒类似—当携带目的基因的病毒载体感染培养的细胞，受感染细胞生产新的同类病毒，并释放进入培养基中，再将新病毒重新采集并纯化。在此过程中产生的病毒载量、纯度和质量都会直接影响后续载体的转导效率。高效可靠的离心方案同样有助于优化病毒载体纯化，例如：在高速和超速离心条件下，能有效地将病毒颗粒从细胞、细胞碎片中精细分离；借助分析性超速离心（AUC） 的流体动力学和热力学全方位精准测量，则可根据病毒衣壳密度（一种病毒载量衡量方式），来真实鉴定区分完整、含部分遗传物质、空壳病毒载体及其他细胞杂质，提高包装效率，提供药用级别病毒载体颗粒质控 。您可以通过以下视频了解病毒纯化流程想了解详细的病毒和假病毒分离方法及步骤，请关注下期内容《如何高效分离新冠病毒毒株与假病毒》，小贝将具体解析超离纯化病毒的实验方法，敬请期待！干货来啦！！！！点击文末的“阅读原文”即可免费获取“病毒及病毒载体分离纯化文献检索列表”自1947年第一台商用超速离心机发明以来，贝克曼库尔特离心技术已有70多年的发展历史。早在19世纪60年代，已有科学家使用贝克曼离心机成功分离了多种病毒颗粒。到今天，贝克曼超速离心技术已助力科学家们分离得到冠状病毒、流感病毒、肝炎病毒、腺病毒、慢病毒等几乎所有类型的病毒种类。贝克曼庞大的用户群体已发表了数以万计的病毒分离方法，为研究人员储存了大量文献支持，在助力病毒研究的同时，也使贝克曼离心机成为了当之无愧的病毒分离专家！参考文献1. Xiuyuan Ou et al. Characterization of spike glycoprotein of SARS-CoV-2 on virus entry and its immune cross-reactivity with SARS-CoV. Nat Commun. 2020 Mar 27;11(1):1620. 2. Yuuki Kaname et al. Acquisition of Complement Resistance through Incorporation of CD55/Decay-Accelerating Factor into Viral Particles Bearing Baculovirus GP64. JOURNAL OF VIROLOGY, Apr. 2010, p. 3210–3219 Vol. 84, No. 73. Qianqian Li et al. Current status on the development of pseudoviruses for enveloped viruses. Reviews in Medical Virology : Vol 28 , No 1请点击“阅读原文”获取“病毒及病毒载体分离纯化文献检索列表”~

UHT (Ultra Harmonic Technology) 超平稳离心技术，重新定义了离心机的升降速过程，从细节上优化整个离心过程，提高离心实验的工作效率和样品的回收效率。UHT技术赋予离心机独特的升降速程序，在高转速状态下降速很快，为操作人员节约了更多的时间，使离心机的使用更加高效。低转速状态下更加平稳，最大程度减少样品损失，节约了实验材料。Ultra：UHT是在超速离心机上广泛应用的技术（例如贝克曼Optima XPN系列），超速离心机运行起来转速非常高，如果使用常规的降速方式，从制动到机器完全停止需要很长的时间，为了减少操作人员的等待时间以及提升离心机的使用效率，UHT技术应运而生。为了优化各个步骤的离心细节，现在有些台式离心机也内置UHT技术（例如贝克曼Avanti J-15系列）。Harmonic：超平稳，更温柔。在离心过程的起始和结束时，离心力较小，更容易受到外界环境干扰，转头会出现短时间内的不平稳，这会使样品的分离效果受到影响，严重时还会导致样品飞溅，离心失败。内置UHT技术的离心机则完美的克服了传统离心过程中的不平稳现象，充分保护样品，使回收效率最大化。Technology：新技术革命。传统的离心技术发展无非是从离心力和样品量两个角度进行改良：1.提高离心机的转速，提供更大的离心力，分离更小的样品；2.提高离心机的容量，分离更多的样品。但近些年来，离心机的发展似乎进入了瓶颈期，鲜有显著突破。UHT技术的出现，源自于贝克曼70年来离心技术的积累，突破了传统思维模式，从样品保护和时间节约两个方面进行突破，为离心机行业开拓了新的视野，也是离心技术发展史上的里程碑。点击链接，了解更多内容* 深入了解UHT技术*下载Avanti J-15R产品简介 *本文涉及的内容与产品仅用于科研和工业，不用于临床诊断。 请点击“阅读原文”获取更多产品信息 

分析型超速离心技术（Analytical Ultracentrifugation，AUC）是表征生物大分子特性、研究生物分子理化性质的主要技术手段之一，用于分析样品异质性、聚集体的形成以及分子间相互作用等。瑞典科学家Theoder Svedberg在1925年发明这一技术，并于第二年制造出第一台分析型超速离心机。经过近百年的应用、验证和发展，目前这一技术已广泛应用于生物制药、生命科学及高分子科学等研究领域。贝克曼推出的Optima AUC分析型超速离心机由主机、光学系统、转头以及样本池组件等构成，可以想象成是一台制备型超速离心机和光学检测系统的结合，但不同于制备型离心机，Optima AUC作为分析型仪器可以实时监测样品沉降过程中溶质浓度随时间和距离的改变，从而计算得到分子特性。分析型超速离心技术的分析方法主要有沉降速率（Sedimentation Velocity）和沉降平衡（Sedimentation Equilibrium）两种。沉降速率是一项流体动力学技术。沉降速率实验中，样品被高速旋转，溶质分子向样品池底部移动，通过记录的数据来测定溶质分子运动的速率。运动速率用沉降系数表示，它取决于分子量、分子形状或构象。对于不同组分的样品，根据不同的沉降系数检测每个组分。沉降平衡是一项热力学技术。沉降平衡试验在较低的转速下进行，当沉降作用与扩散作用达到平衡时测定分子平衡浓度的分布。在平衡状态下，浓度的分布只决定于质量而与分子的形状无关。离心开始时，分子颗粒发生沉降，一段时间以后，沉降的结果造成了浓度梯度，因而产生了蛋白质分子反向扩散运动，当反向扩散与离心沉降达到平衡时，浓度分布固定不变。扫描得到沉降数据后，通过后续软件分析可得到样品表征结果，目前普遍应用SEDFIT/SEDPHAT分析软件。下图为沉降速率数据分析拟合后得到的c(S)分布图，根据分析结果可精准检测生物大分子聚集状态以及聚集体准确百分比含量。揭开了AUC的神秘面纱，我们已经了解到分析超速离心技术在蛋白药物聚集体检测方面有其独特优势，不需要标准品与标记物，直接检测最终溶液中样品状态，更接近蛋白质真实生理状态等。AUC在表征抗体药物特性时有如下多方面应用，具体应用实例介绍请关注下期内容！●  抗精准检测抗体药物聚集体●  抗体药物制剂筛选●  表征抗体偶联药物结合效率●  抗原——抗体相互作用检测●  批次一致性检测* 以上涉及到所有产品仅用于科研和工业，不用于临床诊断。 点击此处“阅读全文”查看更多内容  

点击上图 即刻探索贝克曼库尔特离心机“王国”说到现代离心机的技术发展，就不得不提离心机先驱企业，被誉为“离心王国”的贝克曼库尔特公司(Beckman Coulter,Inc.)。1934年，阿诺德·贝克曼博士于美国加州创建贝克曼公司；1997年，贝克曼公司并购了库尔特公司,成为了现在的贝克曼库尔特有限公司。翻开贝克曼库尔特公司的发展史，会发现数不清的伟大发明创新：第一台可用于精确测量柠檬汁pH值酸度计、第一台“免安装”的分光光度计、第一台带激光的流式细胞分析仪……而对于离心机技术的发展，贝克曼公司更可谓是居功至伟。从1947年推出全球首台分析型超速离心机Model E和首台制备型离心机Model L开始，贝克曼便开始了其硕果辉煌的离心机创新之路。贝克曼离心机创新发展之路（图）近日，仪器信息网专访了贝克曼库尔特生命科学中国区销售总监刘晓东与贝克曼库尔特生命科学市场部副总监霍德华，就贝克曼库尔特离心机的发展历史和中国本土化进程进行了交流。见证贝克曼库尔特离心机在中国生发成长刘晓东自1995年加入贝克曼库尔特，至今已有25年离心机相关工作经验。在此之前，刘晓东读研期间和毕业之后先后在两个国家重点实验室从事生物技术工作，当时他就被贝克曼离心机的卓越技术与品质所吸引。据他回忆，“当年生物技术研究在国内属于最前沿的科研工作之一，贝克曼库尔特的高端离心机在相关科研工作中发挥了重要的作用。”贝克曼库尔特生命科学中国区销售总监 刘晓东刘晓东，贝克曼库尔特生命科学中国区销售总监，负责离心机及颗粒特性产品，加入公司25年从一线销售成长为销售总监积累了丰富的销售及管理经验，拥有从实战中形成的独特营销策略和理念，从2015年至今连续五年带领团队实现离心机销售业绩两位数增长，尤其超速离心机在中国保持80%以上的市场占有率，离心机产品的销售在近年的国重项目、农业学科群项目、修缮项目、双一流大学项目、前沿的外泌体及蛋白结构项目上取得骄人业绩，在业内享有贝克曼离心机王国的美称。具有和刘晓东相似经历的霍德华坦言：“在学生年代，贝克曼超速离心机是非常高端的仪器，国内只有那些特别高端的实验平台才配备。所以在当时能用到贝克曼离心机的人，是非常幸运和自豪的。”如今，离心机应用已得到极大普及，几乎各个大专院校和科研院所的实验室都有配备。随着细胞和分子生物学实验方法的普及，作为重要样品前处理通用技术之一的贝克曼库尔特的离心机也广泛应用到各实验室各种基础实验中，成为大家必不可少的关键工具。“早期国内超速离心机的用户主要分布于科研单位，而现在用户覆盖了农业、临床、生物制药、健康产业等领域，并且产品的应用越来越广泛，超速离心机现在越来越常见于生命科学研究的实验室中，这些变化令人印象非常深刻。在这个过程中，贝克曼离心机无论是技术创新，还是市场地位，都得到进一步巩固和扩大。”贝克曼库尔特生命科学市场部副总监 霍德华霍德华，贝克曼库尔特生命科学市场部副总监，超过15年生命科学实验室及仪器行业技术支持经验，曾协助和指导国内外多个实验室搭建不同的技术应用平台，现主管离心机、自动化、颗粒分析等多条产品线。73年的离心机技术积淀，从技术导向型到客户导向型转变贝克曼库尔特从很早以前就非常注重用户的体验。产品理念也从纯硬件技术极限升级为主，转型为以关怀用户需求为主。例如提高了离心机的生物安全性，极力保护用户的使用安全；加入了智能化软件管理功能、满足GMP工业客户需要的电子签名、审计追踪等相关功能。关注不同用户的差异化需求，从离心机参数设置、耗材使用、辅助功能设计上为用户考虑。这个转变过程令霍德华印象深刻，不禁感慨：“从用户的角度考虑，比如外泌体相关研究的用户对无菌离心管需求很大，贝克曼库尔特就会帮助用户设计相应的无菌、无酶的离心管解决方案，帮助用户取得更佳实验结果，同时，完善自身的产品线。简而言之，用更好的用户体验取代简单粗暴的硬件性能堆砌。”贝克曼库尔特通过一系列技术创新，一直在引领离心机行业发展：离心机重要的核心部件电机：从第一代直流、皮带传动形式，发展为第二代变频电机直接驱动，最后升级为现在的第三代的可变磁阻电机驱动的技术发展，使得离心高速运转更加安全可靠；离心机的制冷部分：从压缩机制冷到现在的半导体模块制冷是重要的技术革新；离心机的操作控制部分：从最初代的表针式显示到数码显示，最后到智能化网络监控，让科研仪器对操作者更加易用。此外，还有很多创新技术不胜枚举。中国客户“声音”在贝克曼库尔特全球决策过程中的影响力越来越大在中国仪器市场快速发展的今天，贝克曼对中国市场一贯非常重视，致力于根据中国用户需求提升产品服务。“随着生命科学这个学科的发展，贝克曼库尔特以创新为生命，未来也会不断地更新迭代离心机产品以更好地服务于中国的用户。”谈及影响中国市场决策的因素时，两位见证者一致认为中国客户的“声音”在贝克曼库尔特全球决策的影响力会越来越大，比如对于灭菌离心管的需求就是国内从事外泌体研究的用户首先提出来的，然后贝克曼库尔特很快地把这个需求上升到全球的策略规划中，从而促进相应产品的推出。近年来，随着中国仪器市场地位越来越重要，中国用户对仪器培训和教育的需求也较全球其他地区更多，增长更快。为满足用户需求，贝克曼库尔特在国内积极整合资源，持续开发线上、线下培训课程。刘晓东解释到：“我们不局限于推广贝克曼库尔特离心机本身，更是将离心的方法推广开来。因为对于实验室的用户而言，熟练掌握离心方法是至关重要的。”助力抗疫，共克时艰，贝克曼库尔特为离心生物安全保驾护航贝克曼库尔特中国一直在践行着其更新的使命与愿景——“赋能每一位生命科学工作者”和“持续改进和创新，助力生命科学与医药健康产业发展成为最可信赖的合作伙伴，服务健康中国2030”。对于此次疫情，贝克曼库尔特助力抗疫，共克时艰。在这样的特殊时期，贝克曼库尔特也充分考虑生物安全实验相关用户的需求，尤其在离心机的离心系统安全设计、制药级气体除菌过滤器、转头和离心管的生物安全设计等方面助力保证样品离心过程中的生物安全。未来可期，贝克曼库尔特离心技术永不止步国内早期的“985”、“211”工程项目，给很多仪器企业带来了市场红利。笔者了解到，早期贝克曼库尔特离心机在国内主要用于高校实验室建设，也参与了很多重大的科研项目，而后是国内精准医学的发展，包括现在的外泌体、CART等这些热门的研究项目中，大都有贝克曼库尔特离心机的身影。在中国传统的生物制品如疫苗以及抗体药等新型生物制药产业的发展过程中，贝克曼库尔特离心机也在最前沿进行服务。作为农业大国，国内的不少农业项目都是贝克曼库尔特离心机的中标项目。近三年的国家重点实验室项目中，也都不乏有贝克曼库尔特离心机的中标项目。此外，国家对整个基础科学和应用科学的投资不仅越来越大也越来越准确，对于贝克曼库尔特这样的头部企业而言是特别好的发展机会。回望国内科研领域迅速发展的这些年，贝克曼库尔特离心机的应用也见证了国内外科研领域的发展转折，覆盖了多种科研领域，比如农业领域：转基因检测、基因工程、疫苗研发，转基因的遗传育种等；临床转化医学领域：肿瘤基因检测，传染病基因检测等；工业领域：生物制药等；食品安全领域以及大健康领域等等。贝克曼库尔特离心机未来也将完全覆盖并继续深入这些重要的应用领域。关于贝克曼库尔特生命科学事业部贝克曼库尔特生命科学事业部一直致力于改善全世界人类的健康。在过去的一百年里，“贝克曼”、“库尔特”卓越品牌的各种仪器已被世界各地医务人员和科研工作者所普遍认可和接受。贝克曼库尔特生命科学事业部为广大科研、商业实验室的生命科学研究工作者们提供先进的仪器系统、试剂和优质的技术服务与支持，不断促进生物学科研的新技术发展。我们的技术支持和售后服务网络遍及全球，营销达至130多个国家。公司主要产品包括流式细胞仪、离心机、实验室自动化系统、细胞与颗粒计数器以及粒度分析仪等，其产品主要用于前沿的重要研究领域，包括基因组学、蛋白质组学、细胞组学以及生物制药等。我们的愿景Advancing Science Through Discovery通过探索推动科技进步我们的使命Delivering Innovative and Trusted Scientific Solutions Across The Globe为全球客户提供富于创新和值得信赖的科学解决方案继续探索贝克曼库尔特离心机“王国”！

基因编辑技术是指能够对目标基因进行定点“编辑”，例如片段插入、缺失，碱基定点编辑等，实现对特定DNA片段的修饰。基因编辑工具目前的基因编辑工具主要有锌指核酸酶（ZFN）、转录因子激活样效应物核酸酶（TALEN）和规律间隔成簇短回文重复序列（CRISPR/Cas）等技术。CRISPR/Cas系统由于其精准、简单、快速、成本低的特点，成为目前基因编辑使用最为广泛的技术。以CRISPR系统为例，在使用CRISPR/Cas系统进行基因编辑过程中，需要gRNA来引导Cas蛋白对基因组进行切割，然后再通过供体两端的同源片段进行同源重组，或利用生物体自身的非同源末端连接进行修复。CRISPR/CAS基因编辑技术基因编辑流程无论使用哪种工具进行基因编辑，都需要构建载体，将基因编辑工具导入到细胞中，然后对细胞进行验证，筛选出被正确编辑的细胞。以酵母细胞基因编辑为例：构建载体过程包含了基因合成或扩增、基因组装、质粒转化、大肠杆菌培养、质粒验证、测序等步骤。然后将构建好的载体转入酵母细胞中，其中包含酵母转化、培养、克隆验证等步骤。基因编辑流程长、步骤多、需要熟练的操作，耗费了科研工作者大量的时间和精力，往往是抬头看文献、低头做实验，实验虐我千百遍，我待实验如初恋。如果可以将基因编辑使用的质粒像工业化生产线上的产品一样自动化生产，输入不同的基因片段，产出相应的质粒，然后再将其转入宿主细胞中进行基因编辑，将极大的提高科研以及研发效率，并且可以使科研人员从实验中解放出来，专注于实验的设计和数据分析。自动化基因编辑基因编辑自动化流水线需要完成基因扩增、组装、大肠杆菌转化、克隆验证、质粒提取、质粒转染、宿主验证等多种实验操作，其中涉及多种仪器设备，如自动化液体工作站、酶标仪、克隆挑选机器人、培养箱、PCR仪、离心机、封膜机、撕膜机等。同时，需要一款强大的整合软件，进行仪器调度、资源分配、耗材统筹、数据管理，使实验过程更加的流畅。Beckman Coulter自1986年生产第一台Biomek 1000自动化液体工作站开始，至今已有30余年时间，期间不断开发、创新，提升产品力，并拥有专业的整合部门，为客户提供个性化的整合方案。Beckman产品发布时间轴Beckman Coulter可以为您的基因编辑过程提供定制化服务，设计满足您需求的解决方案。基因编辑自动化系统示例

白血病是一种亚型众多的疾病，结合形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学等因素分类不同类型，对应的治疗方法和用药会直接影响治疗效果。面对罕见白血病表现，如何更好的做白血病亚型诊断？本问将通过一个临床病例详细为您解答。////病史介绍：患者男性，35 岁，已婚。患者入院 5 天前发现胸、腹、背部等皮肤紫癜，伴发热、头痛，最高体温 37.5℃，无腹痛、恶心，未就诊，后因上半身出血点逐渐增多到当地医院检查，检验示: 白细胞 22.2×10^9/L, 血小板 34×10^9/L, 单核细胞 8.69×10^9/L, 外周血形态镜检: 可见原始+幼稚细胞占 91.1%。门诊于 2020 年 01 月 04 日以「白细胞增高待查」收入院。入院生命体征：体温 36.7℃，脉搏 110 次/分，呼吸 17 次/分，血压 140/85 mmHg，体重 77.9 Kg。专体检查：全身淋巴结未触及肿大，胸骨无压痛，呼吸运动正常，肋间隙正常，语颤正常，无胸膜摩擦感，无皮下捻发感，叩诊清音，双肺呼吸音清、无干、湿啰音，腹平坦，无腹壁静脉曲张，无胃肠型，无蠕动波，腹式呼吸存在。脐正常、无分泌物。腹部无压痛、反跳痛。腹部柔软、无包块。肝脏肋缘下未触及。初步检查及诊断：未分类原始+幼稚 88.00，白细胞计数 19.70×10^9/L ，红细胞计数 4.02×10^12/L ，血红蛋白 126.0 g/L ，血小板计数 39×10^9/L ，中性粒细胞百分数 2.8%；EB 病毒阴性；凝血、尿、便常规、电解质大致可；超声检查可见脾大。骨髓涂片：1. 取材可, 涂片可, 染色良好。髓小粒 (+), 脂肪滴 (-)。2. 骨髓增生明显活跃, 粒: 红=0.50: 1。3. 原始细胞占 90.8%, 该类细胞胞体中等大小, 类圆形, 浆量中等或偏少, 染浅兰色, 核类圆形, 部分可见凹陷, 染色质细致, 核仁显隐可见。4. 粒系受抑制, 占 0.4%。5. 红系受抑制, 占 0.8%。成熟红细胞大小形态正常, 血红蛋白充盈可。6. 淋巴细胞比值减低, 形态正常。7. 巨核细胞 50 个/片, 血小板散在可见。染色体正常核型。综上分析考虑急性白血病, 类型待定。流式检测方案及检测结果：免疫分析选用四色抗体，采用 CD45/SSC 设门。抗体组合为：1. B 门细胞占 97.0%，CD45 表达较淋巴细胞稍弱，高表达 CD7、CD123、CD56、HLA-DR、CD38、TdT，部分表达 CD2、CD4，不表达 CD3、CD8、CD5、CD16、CD57、CD41、CD61、CD303、CD304、CD34、cMPO、cCD79a、cCD3 和其它分化抗原，提示为异常 NK 细胞。2. 粒细胞（C 门）占 0.6%，比例明显减低。3. 淋巴细胞（A 门）占 1.8%，比例减低。最终诊断：临床诊断为****细胞白血病。病例分析及总结思考：****白血病是一种罕见类型的白血病，亚洲人更多见，患者多为男性。临床表现为发热、全身症状和白血病血象。外周血中白血病细胞可高可低，贫血、中性粒细胞减少*****扫描下方二维码或点击「阅读原文」，按引导提交信息后点击「病例分享汇」-「血液科」即可查看完整诊断结果及病例分析思考。作者简介：张秋堂副主任技师，郑州大学第一附属医院血液病实验室主任，河南省实验血液学会常委，河南省血液病理实验诊断专业委员会副主任委员，河南省老年医学学会检验医学专业委员会副主任委员，河南省疑难血液病专家会诊组成员，河南省首台流式细胞仪操作者，擅长流式细胞术和形态的综合诊断。////点击「阅读原文」，查看更多精彩病例、课程。注册学员即可免费学习更多临床病例、大咖课程！注册用户中，也将随机选取 30 位，送上「鼠」于你的精美公仔！责任编辑：杭璐阅读原文

时间：2020年5月20日 14:00 - 15:00内容简介：目前流式的检测技术越来越普及和成熟，除了应用于细胞分型鉴定以外，流式也是检测细胞凋亡、细胞周期的重要检测手段。本次会议就流式方法检测凋亡和周期的常见方法进行探讨，分享做细胞周期凋亡的实验方法、流式图分析及注意事项，尽可能规避一些常见问题，能更好的优化实验。 主讲人简介：夏雨婷:毕业于南京农业大学，现任贝克曼库尔特生命科学部北区技术支持，具有4年流式领域工作经验，熟悉各种流式分析分选技术，对于细胞周期、凋亡、多色流式以及细胞外囊泡等的研究具有丰富经验。

胰腺癌，尤其是导管腺癌，是恶性程度最高的肿瘤之一，5 年生存率仅 9%。提高胰腺癌的诊疗水平，改善预后是急需解决的重要临床问题。现有数据表明，PD-1/CTLA-4抑制剂可以阻断肿瘤对T 细胞的抑制，在胰腺癌方面，也有多个初步临床数据证实PD-1与新辅助化疗联合应用，能显著延长患者的无进展生存和总生存。可见，免疫系统在肿瘤发生发展和治疗中是非常重要的，改善患者的免疫功能状态，可能有助于提高治疗疗效。那么，有必要对患者治疗过程中免疫功能的改变进行监测吗？让我们一起在下面这个病例中一探究竟：------------肖某，男，60 岁，因腰背部疼痛 2 月余就诊。入院检查：外周血 CA199 > 1200 U/mL，胰腺增强动脉造影示胰腺癌。2019 年 5 月 24 日超声内镜引导下的细针穿刺（EUS-FNA）诊断胰腺癌。既往病史：高血压病史，控制良好，无心脑血管病史，无糖尿病史。10 年前因胆囊结石伴慢性胆囊炎行腹腔镜下胆囊切除术，因甲状腺瘤行腔镜下甲状腺瘤切除术。吸烟 20 年 × 20 支，未戒烟，少量饮酒。入组新辅助化疗后手术组。治疗经过：-   2019 年 6 月 4 日起，行 S1（替吉奥）+ 白蛋白紫杉醇化疗 8 个周期；-   2019 年 9 月 6 日，开始射波刀 6 次放疗，合计照射剂量 40.8 Gy；-   2019 年 9 月 24 日，全麻下行开腹胰体癌根治手术、左肾上腺切除术和腹膜后淋巴结清扫术，术后病理诊断胰腺导管癌。诊断初期先进行了新辅助化疗，完成化疗周期及射波刀治疗之后，血清肿瘤标志物均降至正常，MRI 提示肿瘤显著缩小，提示放化疗对患者治疗效果显著。辅助检查：1、胰腺磁共振2、肿瘤标志物检测在患者化疗前、化疗及射波刀治疗后及外科手术前 1 天、手术后三月余进行肿瘤标志物检测，结果如下：3、免疫功能参数检测在患者启动化疗初期、放化疗完成后手术前 1 天和手术 1 天后，采用十三色流式细胞仪（DxFlex，Beckman coulter）进行了三次免疫评估，拟观察患者系统免疫参数变化及其与其他肿瘤参数的关系。部分参数指标变化如下：（1）治疗好转后，患者淋巴细胞比例显著下调，粒细胞显著回升，单核细胞比例显著增加；（2）治疗好转后 NK 细胞中 CD16+CD56- 比例显著上升，CD16+CD56dim 较为明显下降；（3）治疗好转后，B 细胞占淋巴细胞比例、mDC 细胞比例显著下调。（4）治疗好转后，中枢记忆 CD4+T 占 CD4+T 细胞比例呈现较为明显的下调趋势，效应记忆 CD4+T 和 CD8+T 细胞比例呈现较为明显的上升趋势。（5）治疗好转后，部分 T 细胞表面活化标志 HLA-DR 和 CD38 在 CD3+T 细胞以及 CD4+ 和 CD8+T 细胞······其他参数表现情况如何？这些免疫参数改变是否具有胰腺肿瘤疗效相关的特异性？是否反映免疫系统参与了放化疗取得临床疗效的过程？完整病例分析，可扫描下方二维码查看，与更多同行一起交流讨论~病例来源：上海长海医院血液内科 唐古生上海长海医院肝胆胰脾外科 金钢专家简介：唐古生-   男，医学博士，副主任医师、副教授，硕士生导师；-   上海长海医院血液内科主任助理，血液病临床实验室主任；-   负责血液病流式免疫分型、恶性血液病疑难病例 MICM 综合诊断、急慢性白血病精确诊断和分型；-   CAR-T、造血干细胞移植等细胞治疗技术保障。主攻方向：-   骨髓增殖性肿瘤专病诊断和治疗、血液病流式细胞检测；-   负责血液病专病临床形态学、免疫学、分子生物、细胞遗传学综合诊断实验。荣誉经历：-   主持国家自然基金等 7 项课题，以第 1 或通讯发表 SCI 论文 17 篇，核心 30 余篇；-   曾获上海市优秀博士论文、上海市科学技术一等奖、个人三等功、集体三等功等荣誉。------点击「阅读原文」，学习更多临床病例、大咖课程！我们将从注册用户中，随机选取 30 位，送上「鼠」于你的精美公仔：责任编辑：杭璐阅读原文

时间：2020年5月27日 14:00 - 14：45内容简介：蛋白质作为生物功能的直接执行者，其表达水平、功能、活性的改变都会影响生命体生物功能的发挥。在合成生物学研究中，蛋白质的改造、筛选是非常重要的一项工作，但这需要耗费大量人力物力。Beckman自动化移液工作站可以帮助研究人员在非天然辅酶偏好型蛋白质的筛选、蛋白表达检测样品前处理、菌体活力比较等方面提高筛选效率、提高实验重复性，减少科研人员劳动量，让科研人员更专注于实验设计、结果分析等工作。 主讲人简介：褚亚东, 中国科学院大连化学物理研究所高级工程师，大连化物所能源生物技术平台管理员。从事能源微生物培养和发酵过程控制研究及平台技术开发。包括能源微生物发酵过程控制系统、微生物自进化测控系统（气体控制系统、细胞密度测量系统、荧光测量系统、集成反馈控制系统等）致力于开发更适合研究人员使用的测控系统，实现程控微生物自适应进化；基于能源生物技术平台先进的高通量培养和检测设备，开发生物化工相关高通量检测技术与实验方法。申请国家专利14项已授权7项，在《Algal Research》，《Biotechnology for Biofuels》，《Biochimica et Biophysica Acta》，《载人航天》等国内外研究期刊发表论文10余篇。

时间：2020年5月14日 16:00 - 16:45内容简介：ECHO声波移液技术以声波作为动力进行移液。不接触样本，没有枪头，移液体积为2.5nL或者25nL。移液准确，灵活，且通量高。在合成生物学，基因测序，新药筛选，临床试验等多个领域有突出的作用。不只是试验试验过程的自动化，更是减少实验中样本和试剂的消耗，大大减少实验花费。推进科学研究。主讲人简介：刘旸，贝克曼库尔特生命科学自动化产品经理，十年以上实验室自动化管理经验。曾在诺华，药明康德等新药研发部门工作，带领多个项目的高通量新药筛选工作。对实验室移液自动化有深入研究。

近年来，临床试验中的候选药物由于疗效不佳而导致的临床试验失败成为导致研发效率下降的一个重要因素。在2005年至2010年间，与上一个五年相比，尽管资金投入水平提高并且对疾病的认识也有所提高，被批准的新化合物却减少了50%。因此在早期研发中合理设计组合多靶点试验是变得尤为重要。在传统联合用药实验中，将样品按照预定设计加到样品设计好的板子里用手动移液枪的办法，通常会需要将近一个小时的时间。需要分别准备不同样品排版设计，再加到最终反映的微孔板里面。步骤繁琐，很容易出错。现在我们有了自动化移液设备帮助我们进行最终反应的微孔板制备。利用Biomek自动化工作站将样品分装到ECHO母版中，只需要将设计好的样品浓度和分布情况添加到ECHO Combination Screening软件中，就可以得到多种样品不同浓度复杂设计的最终实验板。ECHO作为非接触式移液的代表，不但具备准确的纳升移液，还有为联合用药实验开发的应用软件ECHO Combination Screening。利用这个软件可以轻松实现将负责组合的药物一次加到目标最终实验板中。软件自带计算功能，连实验浓度的计算一起完成了，让复杂实验变简单就是这它了。ECHO的联合用药实验的软件配合自动化整合系统，可以轻松实现高质量的样品板制备。在实验准备中，将手动准备样品板的45分钟减少到5分钟。不但减少实验时间，更是由于自动化的运用，减少手动实验的错误产生，并且样品处理过程可追溯。快来联系我们索取相关资料，享受自动化移液带来的实验便捷！

时间：2020年5月14日 14:30 - 15:00内容简介：5-羟甲基胞嘧啶作为DNA中的一种修饰碱基，在多种生物学功能中扮演重要的角色。其作为修饰碱基，在二代测序中需要特殊的标记与化学转化。基于5-羟甲基胞嘧啶的化学标记测序可以有效测定微量DNA中的5-羟甲基胞嘧啶图谱。此技术可以进行各类疾病的生物标志物的研究，在细胞样品，组织样品，游离核酸样品中均有广泛应用。 主讲人简介：陆星宇博士，上海易毕恩基因科技有限公司创始人、CSO。从事表观遗传学检测技术开发6年，参与Illumina、 Pacific Biosciences等测序行业龙头公司表观遗传产品开发，具有世界领先的临床样品处理和数据分析经验。

合成生物学（Synthetic Biology）是生命科学在二十一世纪刚刚出现的一个新兴学科，近年来发展迅速，成为研究领域的一大热点。它的核心思想与传统生物学不同，是通过工程学的方法通过基因编辑、调控基因网络等方法来改造或从头构建生命体，使其能够帮助人类进行疾病治疗、环境治理、能源生产、化工原料生产、农业生产等。从 Jay.Keasling团队首次在微生物中合成青蒿酸（合成青蒿素的前体），使得合成生物学名声大噪，再到人工合成酵母染色体项目取得重大技术进展，合成生物学在施展着它的魔力。图1. 青蒿酸代谢途径[1]及人工合成酵母染色体Science封面无论是青蒿素的合成还是人工合成酵母染色体，都离不开大量的基因组装。基因组装的试剂费用将会是科研费用中的一项重要支出，一支内切酶或连接酶的价格少说几百元，动辄几千元，并且只有几十微升，可以说是烧钱利器！虽然可以通过缩小反应体系的方法来减少试剂的使用，但是像Golden Gate Assembly和Gibson Assembly的基因组装体系通常是在10 -20ul，再缩小就会比较困难了。其中原因是缩小反应体系的同时，需要确保DNA片段加入量的准确，否则将引起各组装片段之间比例的变化，进而影响组装效率。手工加样器或传统自动化工作站都难以达到纳升级体积的准确移液，所以很难将反应体系再进行缩小。Echo纳升级移液系统可以完美的解决这些问题，让你在基因组装上的试剂费用可以节省90%以上。不光这步省，上游基因扩增体系可以减小，省试剂，下游转化体系可以缩小，省感受态，全流程省钱，堪称“省钱神器”。图2. Echo与手工基因组装效率对比[2]图3. Echo与手工基因组装效率试剂成本对比Echo以其独特的声波移液技术，可以轻松完成纳升级准确移液，让你的反应体系缩小到原来的1/10，甚至是1/40。让你用有限的金钱，进行更多的实验，产出更多成果，发表更优秀的文章！        ●  非接触式移液；        ●  纳升级移液；        ●  减小反应体系，降低成本；        ●  无试剂残留，降低交叉污染风险；让我们来听听Amyris的科学家是怎么说的：*本文涉及的内容与产品仅用于科研和工业，不用于临床诊断。参考文献：1.  Ro, D., Paradise, E., Ouellet, M. et al. Production of the antimalarial drug precursor artemisinic acid in engineered yeast. Nature 440, 940–943 (2006).2.  Kanigowskaet al. Smart DNA Fabrication Using Sound Waves: Applying Acoustic Dispensing Technologies to Synthetic Biology. Journal of Laboratory Automation 1–8, 2015.

在如今快节奏的环境中，您需要的仅仅时一个开箱即用的设备吗？您的需求是不是要根据整个工作流考虑？包括前后设备衔接、通量平衡、空间布局、耗材兼容、环境需求、人员需求以及数据管理？Beckman Coulter生命科学整合部门通过提供可靠的整合设备、完善的软件管理、丰富的三方设备选择和可靠的持续服务及支持，为您提供完整的解决方案。Beckman Coulter目前可以通过Biomek液体工作站整合超过60多个厂家的300多种不同型号的设备，从而实现更高通量、更高效、更自动化的无人值守操作。并且通过SAMI EX进行流程管理和时序优化，充分利用有限资源，提高实验效率，控制关键时间（如酶反应时间），获得更准确的实验结果。同时，我们将以您的工作流为导向，致力于以下四个维度的快速帮您搭建您定制化的实验室整合系统，并提供可靠的持续服务和支持。此外，Biomek i系列自动化自动化工作站的4D整合能力，使得其可以直接在设备台面上、台面下方、左方、右方和后方进行整合，并通过Biomek i系列特殊设计的斜侧抓扳手进行耗材的搬运和连接，实现自动化操作。Beckman Coulter CytoFlex流式细胞分析仪也可以直接整合在Biomek i系列自动化工作站上，实现流式样品处理和检测全自动化运行。更多精彩，可观看以下视频。*仅用于科研，不用于临床诊断。请登录 beckman.com/liquid-handlers 或联系贝克曼库尔特生命科学工程师了解更多信息。并关注“贝克曼库尔特生命科学”微信公众号，持续了解更多合成生物学解决方案。

今年春节后的开工可谓特别印象深刻了。我们在庆幸中国的疫情已经基于稳定的同时，也越来越意识到对疾病的控制能力是多么重要。上一期我们介绍了自动化移液工作站在高通量筛选中的作用。新药研发的后期的毒理和药代动力学也一样需要自动化移液技术的帮助。在新药研发过程中，尽早发现药物的ADME数据变得越来越重要，也可以减少后期药物研发的失败和相关费用。在ADME实验，常常需要涉及多个项目和靶点，给这个实验带来很大的难度，大大拖延了药物研发的进程。贝克曼生命科学ECHO纳升移液技术为纳升水平的移液自动化。不但具备移液准确，速度快的特点。同时能够帮助实验缩小体系，节省经费。并提高科研速度。其独特的移液技术，突破了传统枪头移液的办法，没有物理接触，最大限度的保证了样品的完整性。下图中的实验结果可以看出利用ECHO进行移液，只需10nL的化合物，就可以得到一个漂亮的IC50值。图片引用于：High-throughput Miniaturization of Cytochrome P450 Time-dependent Inhibition Screening Using the Echo® 525 Liquid Handle，Jing Wang. Labcyte I同时对于难复杂程度比较高的联合用药实验，配合贝克曼库尔特公司的Biomek自动化移液工作站将样品分装到微孔板中，再用ECHO纳升移液中的软件ECHO Combination Screening能够帮助设计和计算药物的浓度和分布情况，讲复杂的多药物浓度的实验一次完成，将样品处理时间从45分钟减少到10分钟。内容引用于：Delivering an Automated and Integrated Approach to Combination Screening Using Acoustic-Droplet Technology. Kevin Cross1, Richard Craggs2*, Denise Swift1*, Anesh Sitaram1*, Sandeep Daya1*, Mark Roberts2, Shaun Hawley1, Paul Owen1, and Bev Isherwood1              

时间：2020年4月21日 14:00 - 15:00内容简介：主要介绍外泌体分离与检测研究进展，涵盖了主流的检测技术和方法，以及不同方法的区别。主讲人简介：罗阳教授:重庆大学医学院教授、博导。中组部“万人计划”青年拔尖人才，重庆英才·创新领军人才，重庆市学术技术带头人，重庆市教委“单分子检测的基础与转化”创新团队负责人，重庆市杰出青年基金获得者。担任重庆市科技青年联合会实验医学专委会主任委员、世界华人医师协会检验医师分会副主任委员、中国医师协会检验医师分会代谢疾病专委会副主任委员、中华医学会检验分会临床生物化学学组委员、为美国临床化学协会（AACC）和美国化学协会（ACS）会员。先后获国家科技进步二等奖、重庆市技术发明一等奖

时间：2020年4月10日 15:30 - 16:00内容简介：很多时候颗粒粒度对产品的质量、有效、稳定起着至关重要的影响。如何进行精准的表征，实现高分辨率的检测，发现细微差异对相关科学研究与产品质量控制有着巨大的现实意义。高分辨率的粒度表征技术，将有助于您发现未曾发现的，了解更加真实的粒度信息。 主讲人简介：张强，贝克曼库尔特粒度表征与颗粒计数高级产品专家，主要从事粒度表征和颗粒计数的技术支持，深耕应用方案的开发，熟悉市场环境，开发多个行业解决方案。