LUMEX毛细管电泳仪应用——CIEF方法测定人血清蛋白与干扰素α-2b融合蛋白的等电点

      图中35min 左右的峰为pI为9.5 的marker的峰，51min左右的峰为pI为7.0 的marker的峰, 61 min左右的峰为5.5的marker的峰。三个marker出峰都比较明显，其中的第三个峰为样品的峰，迁移时间约为56 min左右。

      通过第一批次三个marker 的迁移时间和pI值绘制标准曲线，曲线如下：

     对于第一批的样品，通过对样品蛋白的积分，确定其保留时间并通过公式计算蛋白的pI值为6.05-6.14，其中最大峰的pI值为6.05。

对于第二批次的样品rIFNα-2b-HAS 20161102，分析图谱如下所示：

     图中33min左右的峰为pI 为9.5的marker的峰，50min左右的峰为pI 为7.0 的marker的峰, 59min左右的峰为5.5的marker的峰。三个marker出峰都比较明显，其中的第三个峰为样品的峰，迁移时间约为55 min左右。

    通过第二批次三个marker 的迁移时间和pI值绘制标准曲线，曲线如下：

     对于第二批的样品，通过对样品蛋白的积分，确定其保留时间（54.6、55、55.4 min）并通过公式计算蛋白的pI值为6.02-6.15，其中最大峰的pI值为6.02。

对于第三批次的样品rIFNα-2b-HAS 20161203，分析图谱如下所示：

    图中34 min 左右的峰为pI 为9.5 的marker的峰，51 min 左右的峰为pI 为7.0 的marker的峰, 60 min左右的峰为5.5的marker的峰。三个marker出峰都比较明显，其中的第三个峰为样品的峰，迁移时间约为55 min左右。

      通过第二批次三个marker 的迁移时间和pI值绘制标准曲线，曲线如下：

     对于第三批的样品，通过对样品蛋白的积分，确定其保留时间（56.5、56.9、57.3 min）并通过公式计算蛋白的pI值为6.03-6.15，其中最大峰的pI值为6.03。

为了确认是否在5.5与4.1之间是否有其他的蛋白，将5种标记物都配制走样，图谱如下：

     结果发现，在此条件下未出现明显的其他杂质蛋白，说明蛋白相对较纯。

来源：LUMEX分析仪器