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前瞻2025版中国药典 | 谱育科技中药中马兜铃酸A检测解决方案

聚光科技

2024/10/31 14:33

阅读：13

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2022年12月发布的《中国药典（2025 年版）编制大纲》明确提出要重点研究建立基于中成药中马兜铃酸不得检出的检测方法，由此中药中马兜铃酸的检测愈发成为行业关注的焦点。


马兜铃酸主要存在于马兜铃科的马兜铃属和细辛属植物中，具有肾毒性、致突变及致癌性，被列为I类致癌物。其中，马兜铃酸A的毒性最强且广泛存在于相关中药材中。因此，建立有效的检测方法，对加强含马兜铃酸A的中药材及中成药风险评估，降低其对人体的危害有着重要作用。


检测马兜铃酸的常用方法是高效液相色谱法（HPLC）和液相色谱-三重四极杆质谱联用（LC-MS/MS）法。HPLC 法通常适用于马兜铃酸成分含量相对高、干扰较少的中药品种，而LC-MS/MS法具有专属性强、灵敏度高、不易受干扰等优势，是灵敏检测中药中马兜铃酸的有效方法。


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实验仪器


EXPEC 5210  LC-MS/MS

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样品前处理

取马兜铃中药材，粉碎机粉碎，50目过筛两次，精密称取0.2g，加70%甲醇20mL，超声提取40 min，冷却至室温，用70%甲醇定容至25mL，精密吸取该溶液1mL，用50%甲醇稀释并定容至25mL，精密吸取该溶液1mL，用50%甲醇稀释并定容至 100mL，过 0.22μm 滤膜后，上机测定。

实验条件

LC条件：流动相A，1mM甲酸铵-0.05%甲酸水溶液；流动相B，甲醇；流速，0.3mL/min；色谱柱，BEH C18（2.1x100mm，1.7μm ）；进样量 10μL；梯度，流动相A，0-2min, 45%；6min, 20%；6.1-8min，45%。

MS条件：运行模式ESI+，毛细管高压 4 kV，去溶剂气流量 10.0 L/min，反吹气流量 0.8 L/min，去溶剂气温度 380 ℃，碰撞气流量 0.45 mL/min，雾化气流量 1.2 L/min。

方法检测限和定量

配置 0.1 μg/L 浓度标准溶液进样，按照 S/N=10 和 S/N=3 计算定量限和检出限，马兜铃酸检测限为 0.0044 μg/L，定量限为 0.0149 μg/L。图1为0.1 μg/L 马兜铃酸A的色谱图。

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图1 0.1 μg/L 马兜铃酸A色谱图

方法稳定性

选择3个不同浓度的马兜铃酸A标准品，连续 6 针进样，考察方法稳定性，结果见表1。

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表1 中药马兜铃样品测定结果色谱图

药材样品加标回收率

在中药马兜铃样品加标浓度分别为 1 μg/L、10 μg/L、50 μg/L，每个浓度平行测定 3 次，回收率测定结果分别为 86.7%，87.8% 和 98.2%。

马兜铃药材样品测定

中药马兜铃样品色谱图和检测结果分别见图2和表2。

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图2 中药马兜铃样品色谱图

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表2 中药马兜铃样品测定结果

实验结论

本文使用聚光科技自主孵化子公司谱育科技的EXPEC 5210 LC-MS/MS建立了检测中药马兜铃中的马兜铃酸A的方法，方法检测速度快、灵敏度高、稳定性好，准确可靠，可用于进行中药中马兜铃酸A的检测。


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