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荧光检测分析用干涉滤光片的透光率

普析

2022/08/23 15:51

阅读：363

紫外可见分光光度计

荧光检测分析用干涉滤光片的透光率

摘要：荧光检测分析用干涉滤光片包括激发滤光片（exciter filter，EX）、发射滤光片（emission filter，EM）、分色镜（dichroic mirror，DM）等。本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用干涉滤光片》使用普析T10紫外可见分光光度计对滤光片、发射滤光片等进行透过率和背景截止度的测定。结果表明：T10测试结果稳定、重复性好，满足荧光检测分析用滤光片的鉴定测试要求。

关键词：紫外可见分光光度计；荧光滤光片；透过率；截止度

荧光检测分析用干涉滤光片是荧光检测器中的最重要的光学器件，滤光片组合对信噪比起至关重要的作用。同时滤光片的质量、优劣也影响了仪器整体的性能，所用对荧光检测分析用干涉滤光片的质量测试成为生产制造荧光检测设备必要的环节。

本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用干涉滤光片》使用T10紫外可见分光光度计及可变角度附件对荧光分析用干涉滤光片进行检定，可以用于对荧光分析用干涉滤光片光学性能的检验。

实验方法

1.1仪器设备

T10紫外可见分光光度计

附件：可变角度样品架

1.2测试条件

1.2.1通带透过率测试条件

波长范围：300nm~900nm

测试模式：T%

光谱带宽：0.2nm

扫描间隔：0.2nm

扫描速度：中速

分色镜:测试光入射角45°

1.2.2截止带背景截止度条件

波长范围：300nm~900nm

测试模式：Abs

光谱带宽：0.5nm

扫描间隔：2nm

扫描速度：中速

1.3样品

激发滤光片（长8.0mm宽5.5mm厚0.6mm）；

发射滤光片（长8.0mm宽5.4mm厚0.6mm）；

分色镜（长8.0mm宽6.4mm厚0.6mm）

结果与分析

2.1透光率测试

（1）激发滤光片0°角透过率谱图（图2-1）：

透过率>90%范围：378.4nm~583.8nm

50%截止波长：586nm

中心波长：481.1nm

图2-1 激发滤光片使用T10扫描0°角透过率谱图

（2）发射滤光片0°角透过率谱图（图2-2）

透过率>90%范围：610.2nm~860nm ；

50%截止波长：607.2nm

图2-2 发射滤光片使用T10扫描0°角透过率谱图

（3）分色镜45°角透过率谱图（图2-2）

平均透过率>85%范围：670nm~820nm ；

50%截止波长：638.8nm

图2-3 分色镜使用T10扫描45°角透过率谱图

2.2截止带背景截止度测试

（1）激发滤光片吸光值谱图（图2-4）：

OD大于4范围：596nm~855nm

图2-4激发滤光片使用T10扫描吸光值谱图

（2）发射色滤光片吸光值谱图（图2-5）：

OD大于4范围：475nm~590nm

图2-5 蓝绿色滤光片使用T10扫描吸光值谱图

2.3重复性测试

（1）滤光片透过率重复性测数据（表2-1）

图2-6 发射滤光片扫描透过率重复性谱图

（2）滤光片背景截止度重复性测数据（表2-2）

图2-7 发射滤光片扫描吸光值重复性谱图

讨论

本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用干涉滤光片》，使用低杂散光紫外可见分光光度计T10及可变角度附件对I型荧光分析用干涉滤光片的通带透过率（要求激发滤光片和发射滤光片0°入射透过率>90%；分色镜45°入射透过率>85%）、截止带背景截止度（要求OD值>4）进行检定，结果准确，重复性好。在0.2nm光谱带宽的条件下噪音小，在OD值大于4时的结果依然准确，可以有效满足对荧光分析用干涉滤光片光学性能的检验的要求。