现代仪器分析样品前处理、分离提取合成技术及设备 专题讲座 尊敬的用户： 北京金欧亚科技发展有限公司将于2002年 7 月 15 日在北京举办“欧洲最新化工制药常规分离提取 设备”的专题讲座，具体内容安排如下： 一、 讲座内容： 1. 德国Heidolph 主要生产旋转蒸发仪、磁 力搅拌器、顶置式搅拌器、匀浆器、蠕动泵。 2. 德国Vacuubrand 主要生产无油防腐蚀的 隔膜泵、油封旋叶泵、杂交泵和各种压力表等。 3. 英国QVF反应釜系统，包括玻璃及搪玻璃 釜，体积1L—1000L，防腐蚀性良好，耐压耐温，可 根据用户需求定制。 4. 英国Radleys主要生产的平行合成站、全自 动合成仪、玻璃反应釜（100ml-30l）。 5. 德国Huber的控温设备（包括水浴、油 浴），温度从-120℃—400℃，有经济型、 程控型、 封闭型和智能型，所有的水、油浴都可以接外循环， 控温精度0.02K。并实现了一台机器上可以从-120℃ 上升到300℃，控温效果非常良好。 6. 英国Labplant的喷雾干燥器，处理量 1500ml/hour，所有玻璃器皿均由硼硅酸盐做成，处 理过程可视，操作简便，清洗容易。 7. 德国MMM各类干燥箱，培养箱系列 8. 德国GFL各类摇床系列 二、 主讲人：德国Huber公司全球销售技术经理 Daniel Huber先生，香港博劢行仪器有限公司项目 经理陈树峰女士，杨铭宇先生。 三、 具体安排： 1. 专题讲座举办地点：北京同仁堂科技股份 有限公司礼堂 2. 专题讲座举办时间：2002年 7 月 15 日星期一 3. 会议提供免费资料及中餐。 4. 会议提供礼品。 四、 展会样机： 空气浴摇床Incubator 1000，磁力搅拌器MR3003 control， 旋转蒸发仪LR 4000/WB/G1，旋转蒸发仪LR 4001/HB/G3， 平行反应站，1L玻璃反应釜，油浴Polystat B8-1， 油浴Polystat K6-1， 一级隔膜泵ME2C，二级隔膜泵MZ2C， 控制型真空泵MZ2C+AK+bourdon gauge + flow control 干燥箱 Venticell 55 R 主办单位：德国Heidolph，Huber，Vacuubrand, MMM, GFL公司，英国Radleys，Labplant，QVF公司 承办单位：金欧亚（北京）科技发展有限公司 协办单位：北京同仁堂科技股份有限公司，香港博劢 行仪器有限公司 欢迎参加，报名电话：010-67100708；67136152

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金欧亚公司为了满足广大用户的需求，现开通以下邮箱可供大家联系！    *  manager@chromatogr.com      公司之间业务合作    *  tech@chromatogr.com         技术咨询    *  webmaster@chromatogr.com    网站合作    *  sales@chromatogr.com        订货信息    *  HPLC@chromatogr.com         色谱仪器订货业务                                   咨询    *  GEA-info@chromatogr.com     索要公司资料 欢迎广大用户踊跃咨询！！！ Add：北京崇文区龙潭路乙3号伟图大厦301室   Pc： 100061 Tel ：010-67136152    67100708         Fax ：010-67114016 http：//www.chromatogr.com          

色谱柱预防性保护与柱寿命的延长    通常，一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好，但也有的柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响柱寿命和其它问题的因素很多，而有些因素是操作者很难控制的，如果被分析的样品（如分析生物样品），怎么净化样品也是“脏”的，好于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后，在多数情况下总能够人为地减少柱上故障，达到延长柱寿命的目的。 1．加流路过滤器和保护柱 流路过滤器紧靠进样阀后面，位于分析柱前。0.5μm烧结不锈钢片夹在死体积很小的套子中，挡住来源于样品和进样阀垫圈的微粒入柱。因为每个样品都过滤既费事又带来误差，样品量少过滤更困难，因此流路上装过滤器是比较省事的办法。也可以在流路加上保护柱，放在流路过滤器和分析柱之间，或者代替流路过滤器。保护柱的使命是收集阻塞柱进口的来自样品的化学“垃圾”。这程垃圾最终隐藏低柱效能。保护柱应该是小体积，用分析柱的同种填料填装。保护柱使用得当，对分离无影响，好像未装保护柱一样。有些厂商的商品将保护柱都是用短柱、不超过3cm长，内径2～3mm，用较大粒度的填粒（15～20μm）干法填装，会使分析柱的效能有所降低。 2．避免高压冲击 一般色谱柱都能经得起高压，但经不起突然变化的高压冲击。引起高压突然冲击，主要是因样品阀的缓慢转动、泵起动快，柱切换操作等。等面已讨论过，转动六通进样阀时从泵到柱的液流会瞬时切断。在阀的泵侧压力升高，在阀的柱侧压力降低（变化超过20%）。阀转到底后压力突然冲击一下恢复正常，手动进样阀的变化不大，自动进样阀比较慢，可能造成压力冲击，可用氦气代替空气驱动进样阀。因氨压缩系数小。另外泵起动不应过快，可分步操作。如用3ml/min流速，先从1mL/min到2mL/min，然后再3ml/min，每个间隔应大于20s。 柱切换技术的应用也很广泛，切换过程中在色谱柱的入口处压力在零到很大数字之间变化，会很快使柱报废。 3．分离条件 多数色谱柱有很宽的试验条件范围，但具体应用又受到限制，主要是pH值、柱温和流动相的选择。 硅胶为基质的键合相要求pH在2.5～7之间，极端pH的流动相能“溶解”硅胶，使键合相流失。结果非碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH的流动相，可加预柱（饱和柱）。预柱装在泵和进样阀之间，用分析柱相同的填料填装，或者用普通硅胶。硅胶饱和了流动相。减少了分析柱填料的损失。预柱不要求柱效高，用价格低的一般硅胶疏松地填装，按期检查硅胶的溶解情况。用预柱也有不利的影响。即新流动相难以平衡，保留时间不稳定或稳定慢。使用了预柱一定要加流路过滤器，以防止硅胶微粒引起的麻烦。 以硅胶为基质的柱和阴离子交换柱超过60℃后，会增加对流动相中化学物质的吸附。在高温下用小颗粒柱引起柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。在4℃以上使用3μm柱，70℃以上使用5μm柱，会使N值降低50%。 有些流动相中的溶剂不能用于某些柱，如小颗粒的聚苯乙烯填料不能用于非水的排阻色谱。另一方面，有些柱与某些溶剂（如四氢呋喃）一旦达到平衡，不要随意改用其它溶剂。有关这些特殊填料，可以参见有关资料。 水溶性流动相会引起微生物生长而造成阻塞柱。色谱柱应存放在纯有机溶剂或加了50%有机溶剂的水中。凝胶柱可存放在水溶性缓冲液中，同时加0.01%叠氮钠以防止微生物的生长。 4．净化样品 用溶剂溶解的样品，多数组分在一定的时间内能完全从柱中流出来，不会造成危害。 有些样品可能含有微粒物质，样品中的某种组分（如蛋白质）在柱头上沉积下来，组分在固定相上保留很强，溶剂带走柱填料，等等，这些都会造成柱效能下降或柱寿命的影响，有必要采取措施防止柱变坏。 如在光线照射下观察样品是浑浊的或带有乳白色，进样前必须要过滤。虽然流路上装有过滤器和保护柱，但不能代替样品的前处理，样品中过多的微粒会使过滤器和保护柱超载，很快阻塞，或者微粒进入分析柱，所以在进样前必须过滤样品。 若怀疑样品与流动相混合有沉淀而对色谱柱有阻塞，应先试验一下，看样品溶液加入流动相中有无变浑或乳白色出现。如果进样后压力突然增加而后又慢慢减小，表明样品中有微粒或发生沉淀。如有沉淀要设法改变分离条件，包括换样品溶剂和流动相；或处理样品去掉不溶物质。应尽量用小体积的样品。 有些样品能很强地吸附在柱填料上，这样会降低塔板数，改变样品的保留时间、峰形，并且使得基线变差。除了用预处理的方法除去强保留物质外，还要加保护柱，定期清洗色谱柱。有时因为疏忽，用对柱有害的溶剂溶解样品，比如用6mol/L的氢氧化钠溶解样品，这样的样品只要进50～100μL到硅胶基质柱中，硅胶就很快溶解而使柱报废。在这种情况下，应立即中和样品，或除去原溶剂中的有害成分。 5．用强溶剂定期冲洗柱 每次工作结束，用强溶剂冲洗柱是良好的习惯。可用甲醇、乙腈冲反相柱，冲去留在柱上的强吸附组分。用甲醇/水为流动相时也应冲洗。冲洗的程序在以下章节中介绍。 柱头的烧结不锈钢滤片，要求平整，死体积小，孔径适当（2～5μm）。过滤片选择不好会改变色谱峰形，增加阻力或起不到阻挡污染物的作用（填料很快变色）。 此外，对柱硬件的保养也不可忽视。实际操作中应注意以下几点：1 接头要配套，用同一厂商的组接件；2 接头之间、柱压帽螺母与密封卡磁之间无微粒（填料），否则收紧时容易咬死；3 密封卡套与柱管一次性卡紧后再也不能松动，所以拆开柱头再上紧时要小心，不能使卡套移动，原来柱端的不锈钢滤片和垫片的厚度和强度也不能改变（改变这些附件的性能就促使卡套移动）；4 接头等组接件不要拧得过紧，适当上紧后接上泵试验，分步拧紧，直到不漏为止。还有非常重要的是柱硬件的损坏往往会造成不可挽回的损失。 注：此文章摘自《色谱仪器维护与故障排除》 此书正处于热销中，如有意者请与我公司联系！ 定价：24元 邮费：2元 共计：26元   联系方式： Tel：010-67100708 Fax：010-67114016 付款方式： 邮寄地址： 北京市崇文区龙潭路乙3号伟图大厦301室 汪若梅 收 也可登陆我公司的网站！ 网址：Http://www.chromatogr.com

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具体价格请您来电咨询，电话：010-67100708，67136152 传真：010-67114016 E-mail：rmw@vip.sina.com Sephadex LH-20使用说明 Sephadex LH-20是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成，属于分子筛凝胶，尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。例如：类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等，Pharmadex LH-20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工业规模的制备，既可用于初步纯化步骤，也可用于最终精制步骤，如非对映同分异构体的分离。 制备凝胶悬浮液 Sephadex LH-20在使用之前必须进行溶胀。在溶胀的过程中，要尽量避免过分搅拌，否则会破坏球形胶粒，且要避免使用磁力搅拌器。 1． 在室温下，将凝胶溶胀于层析溶剂中至少三小时，溶胀后胶体积的大小决定于所使用的溶剂系统，请参考后页之干胶溶胀表计算特定柱体积所需要干胶的量。 2． 使溶胀胶体积沉淀之后占总体积的75%，上层溶剂占25%，这时，悬浮液从一个容器倒入另一容器时胶粒可移动。 3． 将溶胀后的凝胶根据装柱要求均匀倒入柱内，在保证胶粒不变形的前提下，应在尽可能高的压力下装柱，反压不要超过1.5ba。 平衡 上样前，用洗脱液平衡层析柱至少两个柱体积直到基线变得平稳为止，如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质，并根据性质确定柱高调节器的位置，如使用相同的溶剂，在以后的层析中柱平衡可以省略。 洗脱液 为确保延长层析柱的使用寿命，所有的缓冲液都应该离心或经过0.45um的膜过滤以除去杂质。 样品 样品体积应该占柱总体积的1-2%，同样在使用之前样品应该离心或经过0.45um的膜过滤。 洗脱 洗脱流速应根据情况而定，最大张性流速约12cm/min（反压1.5ba），建议流速为1-10cm/h。总体来说，较低的流速，具有较高的分辩率。 再生 凝胶再生通常是先用2-3个柱体积的洗脱液进行清洗，如更换洗脱液，则需要重新平衡。 体积流速与线性流速的关系 线性流速=体积流速/横截面积 溶胀体积 由于Pharmadex LH-20的溶胀体积依赖于溶剂，所以对于不同直径的柱可根据比例增加或减少旧柱体积以便计算出新体积。 新体积=旧体积×（新柱体积/旧柱体积） 胶的性质 Sephadex LH-20同时具备亲水和亲脂双重性质，且被分离物质的极性在分离过程中起着重要作用。 排阻极限 4-5KD（与所用溶剂有关） 上样量 吸附模式 取决于所需分辩率 分子量大小 小于总体积的20% 正相分配 小于总体积的1% 胶粒形状 球形，多孔 颗粒大小（干） 18-111um（直径） 颗粒大小中间值（干） 70um（直径） 颗粒大小（甲醇） 27-163 um（直径） 颗粒大小中间值（甲醇） 103 um（直径） 最大线性流速 720cm/min 参考线性流速 60 cm/min pH的稳定性 操作中 2-11 清洗中 2-13 化学稳定性 在许多水溶液及有机溶剂系统中都稳定。在pH2以下或强氧化剂中不稳定 高压灭菌 121℃可忍受20分种 操作温度 4℃到40℃ 保存条件 新填料 4-25℃（干燥） 使用后填料 4-8℃，pH6-8，切勿冷冻，加入抑菌剂（如20%乙醇，0.04%叠氮钠）

北京金欧亚科技发展有限公司为回报色谱界新老用户多年来所给予我们的支持与帮助，金欧亚公司决定在2003年7月8日至2003年8月8日举办为期一个月的色谱产品谢恩展销月活动。在此活动期间我们将每周推出一款特价畅销产品，机会难得，敬请留意！

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在新年来临之际，北京金欧亚科技发展有限公司为答谢新老用户多年来的支持与信任，特价销售特价促销Sephadex LH-20   更多优惠，敬请登陆金欧亚公司的色谱网站：Http://www.chromatogr.com   热线电话：010-67136152，67100708 ，67114016 传真:010-67114016 E－mail:rmw@vip.sina.com 联系人：陈萍 Sephadex LH-20使用说明 Sephadex LH-20是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成，属于分子筛凝胶，尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。例如：类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等，Pharmadex LH-20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工业规模的制备，既可用于初步纯化步骤，也可用于最终精制步骤，如非对映同分异构体的分离。 制备凝胶悬浮液 Sephadex LH-20在使用之前必须进行溶胀。在溶胀的过程中，要尽量避免过分搅拌，否则会破坏球形胶粒，且要避免使用磁力搅拌器。 1． 在室温下，将凝胶溶胀于层析溶剂中至少三小时，溶胀后胶体积的大小决定于所使用的溶剂系统，请参考后页之干胶溶胀表计算特定柱体积所需要干胶的量。 2． 使溶胀胶体积沉淀之后占总体积的75%，上层溶剂占25%，这时，悬浮液从一个容器倒入另一容器时胶粒可移动。 3． 将溶胀后的凝胶根据装柱要求均匀倒入柱内，在保证胶粒不变形的前提下，应在尽可能高的压力下装柱，反压不要超过1.5ba。 平衡 上样前，用洗脱液平衡层析柱至少两个柱体积直到基线变得平稳为止，如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质，并根据性质确定柱高调节器的位置，如使用相同的溶剂，在以后的层析中柱平衡可以省略。 洗脱液 为确保延长层析柱的使用寿命，所有的缓冲液都应该离心或经过0.45um的膜过滤以除去杂质。 样品 样品体积应该占柱总体积的1-2%，同样在使用之前样品应该离心或经过0.45um的膜过滤。 洗脱 洗脱流速应根据情况而定，最大张性流速约12cm/min（反压1.5ba），建议流速为1-10cm/h。总体来说，较低的流速，具有较高的分辩率。 再生 凝胶再生通常是先用2-3个柱体积的洗脱液进行清洗，如更换洗脱液，则需要重新平衡。 体积流速与线性流速的关系 线性流速=体积流速/横截面积 溶胀体积 由于Pharmadex LH-20的溶胀体积依赖于溶剂，所以对于不同直径的柱可根据比例增加或减少旧柱体积以便计算出新体积。 新体积=旧体积×（新柱体积/旧柱体积） 胶的性质 Sephadex LH-20同时具备亲水和亲脂双重性质，且被分离物质的极性在分离过程中起着重要作用。 排阻极限 4-5KD（与所用溶剂有关） 上样量 吸附模式 取决于所需分辩率 分子量大小 小于总体积的20% 正相分配 小于总体积的1% 胶粒形状 球形，多孔 颗粒大小（干） 18-111um（直径） 颗粒大小中间值（干） 70um（直径） 颗粒大小（甲醇） 27-163 um（直径） 颗粒大小中间值（甲醇） 103 um（直径） 最大线性流速 720cm/min 参考线性流速 60 cm/min pH的稳定性 操作中 2-11 清洗中 2-13 化学稳定性 在许多水溶液及有机溶剂系统中都稳定。在pH2以下或强氧化剂中不稳定 高压灭菌 121℃可忍受20分种 操作温度 4℃到40℃ 保存条件 新填料 4-25℃（干燥） 使用后填料 4-8℃，pH6-8，切勿冷冻，加入抑菌剂（如20%乙醇，0.04%叠氮钠）

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