空心胶囊中色素检测HPLC解决方案

A 溶液配制

乙酸铵溶液(0.02mol/L)：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45μm 微孔滤膜过滤。

氨水溶液：量取氨水2mL，加水至100mL，混匀。

甲醇-甲酸溶液(6+4，体积比)：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀。

柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100mL，溶解混匀。

无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比)：量取无水乙醇70mL、氨水溶液20mL、水10mL，混匀。

pH为6的水：水加柠檬酸溶液调pH到6。

pH为4的水：水加柠檬酸溶液调pH到4。

混合对照品溶液：分别称取柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、赤藓红、酸性红、喹啉黄各5mg于10mL的容量瓶中，加水溶解，配制0.5mg/mL的混标溶液，取上述混标溶液1mL，加水稀释10倍，经0.45μm的微孔滤膜过滤配制成每毫升相当于50.0μg的合成着色剂。

B 样品前处理

1、 称取0.5g胶囊外壳加入10mL水，再加入200g/L柠檬酸调节pH值为6.0，于60℃水浴中放置5min；

2、 将2g聚酰胺粉中加入10mL水(pH=4)调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，以G3垂熔漏斗抽滤，用60℃水(pH=4)洗涤3次，每次10mL；

3、 然后用甲醇-甲酸（6:4）的混合溶液10mL、5mL、5mL洗涤3次，再用水洗涤至中性；

4、 用乙醇-氨水-水（7:2:1）混合溶液解吸洗涤3次，每次5mL，洗至无色；

5、 收集解吸液，蒸发至近干，加水溶解并定容至10mL，经0.45μL微孔滤膜滤过。

C 色谱条件

色谱柱：

Supersil ODS-B 5μm I.D.4.6×250mm

流动相：

A-20mmol/L乙酸铵溶液，B-甲醇；梯度洗脱

流量：1.0 mL/min              

进样体积：10 μL

检测波长：UV254nm           

柱温：35℃

将样品提取液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪,根据保留时间定性,外标峰面积法定量。

参考文献

[1] GB 5009.35-2016 食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定；

[2]《中国药典》2015版。