生物大分子存在广泛的多样性。以蛋白质为例,其氨基酸的种类、数目、排列顺序不同直接造成了肽链折叠方式不一样,空间结构也不一样,所以形成了蛋白质的多样性。显然对于多样化的生物分子采用相同材质的超滤管很难达到理想的超滤效果。
为了解决这个问题,赛多利斯提供了四种不同膜材质的超滤管。别看它们外表看上去都一样,却有着不同的“内心”:分别是聚醚砜(PES)、再生纤维素(RC)、改良的再生纤维素(Hydrosart)和醋酸纤维素(CA)超滤膜。面对各种性质的样品和不同的需求,它们可谓是八仙过海各显神通。让我们一起看看他们各自有哪些“看家本领”吧:
不同规格的超滤管具有不同种类的超滤膜供选择,大家可以根据上述适合的样品推荐进行选择。
Vivaspin® 2
处理量:0.4~3ml
膜材质:PES、Hydrosart、CA三种
样品回收:可进行反转离心
Vivaspin® (Turbo)15
处理量:4~15ml
膜材质:RC、PES、Hydrosart
样品回收:专利尖角设计
那么下面这个应用中,科学家会选择哪种材质的超滤管呢?
1英国伦敦大学学院的科学家使用傅里叶红外变换光谱对细胞色素bc1进行检测来了解其作用机制。由于制备牛心脏细胞色素bc1复合物中使用了大量的Triton X-100和甘油,在检测前必须去除。同时差谱(光-暗)中的变化幅度小于绝对光谱的1%,而水在目标区域的消光系数较高,所以他们需要对样品进行浓缩。超滤恰恰能够同时实现这两个目的。由于PES材质的超滤管有最大的水通量,因此实验采用了Vivaspin® 2和6 PES材质的产品。
图1所示浓缩bc1复合物和细胞色素c的光学和FTIR光谱。
A:绝对还原型可见光谱(最终浓度:425 mM)
B:绝对氧化FTIR光谱。与蛋白质骨架相对应的突出特征用三角形表示(酰胺I带,黄色;酰胺II,灰色)
C:细胞色素c的FTIR光-暗差谱
结论
与替代产品相比,在本研究中使用的Vivaspin® 2和6 可以快速浓缩靶分子,从而可以高效地完成FTIR差谱法对样品进行评价和分析。同时由于使用Vivaspin® 超滤管获得了高浓度样品,这直接帮助研究的所有氧化还原组分均获得了高信噪比的光-暗FTIR差谱。
-参考文献-
1.Protein Complex Concentration with Vivaspin® Prior to Fourier Transform Infrared (FTIR) Spectroscopy
Yemi Akinsiku, Jonathan Ramsey, Peter Rich. The Glynn Laboratory of Bioenergetics, University College London, Gower Street, London WC1E 6BT UK
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