仪器种类: 光学成像
产地类别: 国产
应用领域: 小动物
2023年2月23日,北京大学程和平-王爱民团队在Nature Methods在线发表题为“Miniature three-photon microscopy maximized for scattered fluorescence collection”的文章(链接:https://doi.org/10.1038/s41592-023-01777-3)。文中报道了重量仅为2.17克的微型化三光子显微镜实现了自由行为小鼠全皮层和海马神经元功能成像,为揭示大脑深部结构中的神经机制开启了新的研究范式。 此次,最新的微型化三光子显微镜一举突破了此前双光子显微镜的成像深度极限:显微镜激发光路可以穿透整个小鼠大脑皮层和胼胝体,实现对小鼠海马CA1亚区的直接观测记录,神经元钙信号最大成像深度可达1.2 mm,血管成像深度可达1.4 mm。另外,在光毒性方面,全皮层钙信号成像仅需要几个毫瓦,海马钙信号成像仅需要20至50毫瓦,大大低于组织损伤的安全阈值。因此,该款微型三光子显微镜可以长时间不间断连续观测神经元功能活动,而不产生明显的光漂白与光损伤。 海马体位于皮层和胼胝体下面,在短期记忆到长期记忆的巩固、空间记忆和情绪编码等方面起重要作用。在啮齿类动物研究模型中,海马距离脑表面深度大于一个毫米。由于大脑组织,特别是胼胝体,具有对光的高散射光学特性,所以突破成像深度极限是长期以来困扰神经科学家的一个极大的挑战。此前无法实现自由运动小鼠穿透全皮层直接对海马区进行无损成像。最新的微型化三光子显微镜成像深度的突破得益于全新的光学构型设计:微型阿贝聚光镜与简化的无限远物镜密接可以提高散射光的通透效率;阿贝聚光镜与激发光路中的微型管镜部分复用,可以进一步简化结构,降低损耗。新微型化显微镜的散射荧光收集效率实现了成倍的提升。超维景转化的SN-3000微型化三光子系统将大大推动揭示隐藏在脑皮层深处和皮层下结构(如背侧海马和背侧纹状体等)的神经机制。
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微型化三光子显微镜SUPERNOVA-3000搭配新颖的光学构型设计的微型化三光子探头,有效增加散射荧光的收集效率,达到台式三光子成像深度的极限,并且扫描速度快,成像效果清晰。SUPERNOVA-3000的出现,使得神经科学的研究人员将可以在保留完整的大脑皮层结构投影的前提下,对例如涉及海马或纹状体结构等,大脑皮层及皮层下方脑区之间的神经网络进行深入研究。
图1. 微型化三光子显微镜SUPERNOVA-3000
产品特点
Go deeper:更深
-长波长飞秒激光光脉冲,钙成像深度达到1.2 mm
-穿透整个小鼠大脑皮层,突破胖眠体,进行海马成像
More freedom:自由运动下的卓越成像性能
-2.2g 超轻微型化探头,小动物轻松佩戴
-利用ETL实现三维成像
-独有光学设计,集成柔性避光光纤、空芯光子晶体光纤、MEMS等尖端技术
Less damage:非侵入式手术,轻松上手
-深脑成像只需颅窗手术,避免植入式GRIN Lens损伤脑组织
-激发光波长更长,更低光毒性
-散射荧光增强收集构型,实现深脑低功率成像
生物应用
动物自由运动成像
• 行为学实验下的小鼠顶叶后皮质 L6(PPC L6)的神经元钙活动(成像深度650 μm)
微型化三光子显微镜可以搭配不同行为学实验的深部脑区进行单细胞级的稳定高时空分辨率成像,满足实时监测单个神经元的活动,结构变化以及不同功能神经元分类等实验需求。
图2. 行为学实验下小鼠大脑PPC L6的神经元活动
• 自由运动小鼠大脑海马CA1亚区的神经元钙活动(成像深度1.2 mm)
安全激光功率下通过非侵入式手术对背侧海马CA1(深度达1.2 mm)的钙活动进行成像,监测神经元的钙活动轨迹,并与小鼠行为视频进行同步。
图3. 自由运动小鼠大脑海马CA1亚区的神经元活动
• 长时程监测自由运动小鼠大脑海马CA1亚区的神经元钙活动(成像深度978 μm)
在8.35 Hz的成像速率下,进行100分钟不间断连续监测采集自由运动小鼠大脑海马CA1亚区神经元活动,钙信号瞬态特征无明显变化(平均振幅,衰减时间常数,SNR)
图13. 100分钟不间断采集自由运动小鼠大脑海马CA1亚区神经元活动
小鼠大脑组织3D重构
不同组合满足用户不同需求
技术参数
系统尺寸
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产品货期: 120天
整机质保期: 1年
培训服务: 额外提供免费培训
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