胰岛素样生长因子ELISA试剂盒

胰岛素样生长因子ELISA试剂盒 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 试验原理： IGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IGF和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IGF的浓度呈比例关系。 自备材料 胰岛素样生长因子ELISA试剂盒蒸馏水。 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 洗涤酶标板时应充分拍干不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 操作步骤 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。 在450nm波长处测定各孔的OD值。 局限 6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。 试剂盒性能 1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。 2. 特异性：不与其它细胞因子反应。 3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。 胰岛素样生长因子ELISA试剂盒结 果 判 断 与 分 析 1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值 2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的IGF标准品浓度为横坐标（X）人ELISA试剂盒做得相应的曲线，样品的IGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。 3、检测值范围：0-200pg/ml 4、敏感度： 0.1 pg/ml

大鼠酶联免疫分析试剂盒使用说明书

大鼠酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中?SD大鼠一。用纯化的?SD大鼠一（NO）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入一NO），再与?HRP标记的一???????（NO）抗体????，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物?TMB显色。TMB在???HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下（NO）呈正相关。用酶标仪在??450nm转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的一波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中??SD大鼠一（NO）浓度。 试剂盒组成 30倍浓 20ml×1瓶 6ml×1瓶 12孔×8条 6ml×1瓶 6ml×1瓶 6ml×1/瓶 终止液 6ml×1瓶 2???酶标试剂 标准品（80μmol/L）?????0.5ml×1瓶 3???酶标包被板 4???样品稀释液 5???显色剂?A液 6???显色剂?B液 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1份 10???说明书 11???封板膜 12???密封袋 2张 1个 大鼠酶联免疫分析试剂盒使用说明书标本要 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因???NaN3抑制辣根过（HRP）活性。 操作步骤 1.??标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 40μmol/L 20μmol/L 10μmol/L 5μmol/L 5号标准品 4号标准品 3号标准品 2号标准品 1号标准品 150μl的原倍标准品加入??150μl标准品稀释液 150μl的??5号标准品加入??150μl标准品稀释液 150μl的??4号标准品加入??150μl标准品稀释液 150μl的??3号标准品加入??150μl标准品稀释液 150μl的??2号标准品加入??150μl标准品稀释液 2.5μmol/L 2.??加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样?50μl，待测样品孔中先加样品稀释液?40μl，然后再加待测样品?10μl（样品最终稀释度为?5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.??温育：用封板膜封板后37℃温育30分钟。 4.??配液：将??30倍浓 30倍稀释后备用 5.??洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静??????30秒后弃去，如此重复?5次，拍干。 6.??加酶：每孔加入酶标试剂??50μl，空白孔除外。 7.??温育：操作同??3。 8.??洗涤：操作同??5。 9.??显色：每孔先加入显色剂??A50μl，再加入显色剂?B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟. 10.?终止：每孔加终止液??50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.?测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。??测定应在加终止液后?15分钟以内进行。 操作程序总??： 计算以标准物的浓度为横坐标，?OD??值为纵坐标，在坐标纸上，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与??OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的?OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 大鼠酶联免疫分析试剂盒使用说明书注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡?15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有析出，稀释时可在浴中加温助溶，洗涤时不影响。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在?5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本??OD值大于标准品孔第一孔的?OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6个月

人血小板反应酶联免疫分析试剂盒

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中血小板反应(TSP-1)含量。 人血小板反应酶联免疫分析试剂盒 本试剂盒仅供研究使用。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板反应(TSP-1)。用纯化的人血小板反应板反应 (TSP-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血小(TSP-1)，再与?HRP标记的血小板反应?(TSP-1)抗体????，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物?T显色。TB在???HRP酶的催化下转化成蓝色，(TSP-1)呈正相关。用酶标仪在?450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血小板反(TSP-1)浓度。并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板反应应 试剂盒组成 人血小板反应酶联免疫分析试剂盒 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因???NaN3抑制辣根过（HRP）活性。 操作步骤 1.??标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行释。 2.??加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样?50μl，待测样品孔中先加样品稀释液?40μl，然后再加待测样品?10μl（样品最终稀释度为?5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 温育：用封板膜封板后 37℃温育30分钟。 30倍稀释后备用 配液：将?30倍浓 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静重复?5次，拍干。30秒后弃去，如此 加酶：每孔加入酶标试剂?50μl，空白孔除外。 温育：操作同?3。 洗涤：操作同?5。 显色：每孔先加入显色剂?A50μl，再加入显色剂?B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟. 10.终止：每孔加终止液????50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD?值）。测定应在加终止液后?15分钟以内进行。 操作程序总： 计算以标准物的浓度为横坐标，?OD值为纵坐标，在坐标纸上，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与??OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的?OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 人血小板反应酶联免疫分析试剂盒 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡?15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有析出，稀释时可在浴中加温助溶，洗涤时不影响 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在?5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本??OD值大于标准品孔第一孔的?OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6个月

血栓素(TXB2)ELISA试剂盒

血栓素(TXB2)ELISA试剂盒测定中，应对包被抗原或抗体的浓度和酶标抗原或抗体的浓度予以选择，以达到最合适的测定条件和节省测定费用。 1．酶标抗抗体工作浓度的选择 （1）用100ng/ml人IgG进行包被，洗涤。 （2）将酶标抗人IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。 （3）加底物显色。加酸终止反应后，读取吸光度（A），绘制曲线如图15-10。读取A值在1.0时的酶标抗稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。该酶标抗人IgG的工作浓度应为1/1600。 血栓素(TXB2)ELISA试剂盒常用酶辣根过氧化酶（HRP）】 1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。 2. 是一种糖蛋白，含糖量约18％；分子量为44kD。 3. 是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合而成的一种卟啉蛋白质。 4. 主酶为无色糖蛋白，在275nm波长处有最高吸收峰；辅基是深棕色的含铁卟啉环，在403nm波长处有最高吸收峰。 用于稀释高浓度的结合物以配成工作液。为避免结合物在反应中直接吸附在固相载体上，在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质（例如1%牛血清白蛋白），通过竞争以抑制结合物的吸附。一般还加入具有抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂，如吐温20，0.05%的浓度较为适宜。在间接测定抗体时，血清标本需稀释后进行测定，也可应用这种稀释液。? 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中S100钙粒蛋白A（S100A8）含量。 血栓素(TXB2)ELISA试剂盒标本要求? 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

豚鼠肿瘤坏死因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书

豚鼠肿瘤坏死因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 3?ng/L?-80?ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定豚鼠血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中豚鼠肿瘤坏死因子α（?TNF-α）水平。用纯化的豚鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（TNF-α），再与?HRP?标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物?显色。B?在?HRP??酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。用酶标仪在?450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中豚鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。 试剂盒组成 2.??加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样?50μl，待测样品孔中先加样品稀释液?40μl，然后再加待测样品?10μl（样品最终稀释度为?5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 温育：用封板膜封板后置?37℃温育30分钟。 配液：将?30倍浓缩洗涤液用蒸馏水??30倍稀释后备用 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置?30秒后弃去，如此重复?5次，拍干。 加酶：每孔加入酶标试剂?50μl，空白孔除外。 温育：操作同?3。 洗涤：操作同?5。 显色：每孔先加入显色剂?A50μl，再加入显色剂?B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 10.终止：每孔加终止液????50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD?值）。测定应在加终止液后?15分钟以内进行。 操作程序总结： 计算以标准物的浓度为横坐标，?OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与??OD值计算出标 豚鼠肿瘤坏死因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡?15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在?5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本??OD值大于标准品孔第一孔的?OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6个月

人低氧诱导因子ELISA 检测试剂盒

人低氧诱导因子ELISA 检测试剂盒 试验原理： 　　　　HIF-1α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知HIF-1α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HIF-1α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HIF-1α的浓度呈比例关系。 　　　　　　　　　　　　 自备材料 蒸馏水。 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 试剂的准备 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。 人低氧诱导因子ELISA 检测试剂盒操作步骤 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。 在450nm波长处测定各孔的OD值。 局限 6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。 试剂盒性能 1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。 2. 特异性：不与其它细胞因子反应。 3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。 人低氧诱导因子ELISA 检测试剂盒结 果 判 断 与 分 析 1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值 2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的HIF-1α标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的HIF-1α含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。 3、检测值范围：0-800pg/ml 4、敏感度： 1.0 pg/ml