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手把手教你如何选择合适的液相色谱柱
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简介:当研发或调整一个液相色谱(LC)分 离时,我们面临的最大的挑战就是使色 谱峰点来回移动,避免出现色谱峰重 合。该过程涉及改变分离的选择性,α。 正如在最近的一系列“液相色谱故障排 查”文章中所述(1-3),完成这一调整 有很多种方法,其中
简介:当研发或调整一个液相色谱(LC)分 离时,我们面临的最大的挑战就是使色 谱峰点来回移动,避免出现色谱峰重 合。该过程涉及改变分离的选择性,α。 正如在最近的一系列“液相色谱故障排 查”文章中所述(1-3),完成这一调整 有很多种方法,其中一种方法就是更换 色谱柱。当更换色谱柱时,我们的目标 通常是找到一个等效柱或正交柱。所谓 的“等效”,是指能够产生与原色谱柱类 似的分离满意度的另一个色谱柱(也就 是选择性非常类似),例如当将第二色 谱柱来源指定为常规方法的备选方案 时。所谓的“正交”,是指能够产生完全 迥异于原色谱柱所产生分离的另一个 色谱柱。更换为正交柱将导致至少一些 色谱峰对的α出现显著差异(也就是说, 迥然不同的选择性),通常可以观察到 洗脱顺序逆转或是重合的色谱峰对被 分解。研究人员通常需要使用正交柱, 作为一种检查潜在色谱峰的方法、一种 分离已知色谱峰重叠的方法或是一种 用于初步检查样品整体复杂性的筛选 工具。简单通过更换成一个正交柱就能 满足所有分离要求的情况很少见,相 反,在最终的方法能够满意解决所有所 关心的色谱峰问题之前,一个期望就是 需要对色谱条件(例如,溶剂类型、有 机百分比、pH 或温度)进行额外调整。
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