简介:如何建立固相萃取方法
1固相萃取基本步骤
固相萃取的步骤视萃取机理及检测手段可多可少。对于反相固相萃取柱而言,其基本步骤有五步:
a. 固相萃取柱预处理
b. 样品添加
c. 固相萃取柱洗涤
d. 固相萃取柱干燥
e. 目标物洗脱
固简介:如何建立固相萃取方法
1固相萃取基本步骤
固相萃取的步骤视萃取机理及检测手段可多可少。对于反相固相萃取柱而言,其基本步骤有五步:
a. 固相萃取柱预处理
b. 样品添加
c. 固相萃取柱洗涤
d. 固相萃取柱干燥
e. 目标物洗脱
固相萃取柱预处理
无论是自行装填的还是商品化的固相萃取柱在使用之前都是以干燥的状态存在的。如同新购置的HPLC柱一样,在使用时都必须先对柱子进行活化、平衡。对于反相固相萃取柱而言,进行柱子预处理的主要目的有两个:
对固相柱进行活化,展开碳氢链增加和分析物作用的表面积。
对固相柱进行清洗,除去柱上吸附的对分析有影响的杂质。
在具体操作上,一般程序是:先用甲醇或极性有机溶剂淋洗柱子,然后再用水或缓冲溶剂除去多余的有机溶剂。因为上述有机溶剂都是良好的洗脱剂,过多的存在会使目标化合物在吸附过程中损失。当用离子交换 SPE 时, 必须注意系统的pH。其pH值应该与样品保持一致。如果使用的是手工的操作方法,必须注意在加样于固相柱前已处理好的固相萃取柱必需保持湿润。 这点对于非高聚物的固相萃取柱尤为重要。否则会出现回收率低、重现性差的结果。
详细>