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ELISA抗原竞争法检测sIL-2R含量的操作流程 下载
ELISA抗原竞争法检测sIL-2R含量的操作流程
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简介:【操作步骤】 (1) 以一定浓度的纯化或重组的IL-2R(P55)蛋白包被96孔酶标板,100ul/孔,4℃过夜(16-72h); (2) 弃包被液,用1%BSA-PBS封闭非特异性结合位点,200ul/孔,置室温2h; (3) 用洗涤液加满各孔置3min,然
简介:【操作步骤】 (1) 以一定浓度的纯化或重组的IL-2R(P55)蛋白包被96孔酶标板,100ul/孔,4℃过夜(16-72h); (2) 弃包被液,用1%BSA-PBS封闭非特异性结合位点,200ul/孔,置室温2h; (3) 用洗涤液加满各孔置3min,然后倾去,反复洗涤3次; (4) 分别加入不同稀释度的sIL-2R标准品及待测样品,50μl/孔; (5) 各孔均加入FITC标记的IL-2R McAb,50μl/孔,充分混匀后置室温2h; (6) 同上洗涤3次; (7) 各孔均加入碱性磷酶酶标记的兔抗FITC抗体,100μl/孔,置室温1h; (8) 同上洗涤3次; (9) 各孔均加入底物液,100μl/孔,置室温15-30min; (10) 用酶标仪以波长405nm测各孔OD值。 【结果分析】 (1) 以sIL-2R标准品各稀释度对应的浓度值为横座标(X),相应的OD值为纵座标(Y),在普通座标纸上绘制竞争抑制标准曲线,OD值随标准品sIL-2R浓度升高而降低。 (2) 根据待测样品所测得的OD值,在标准曲线上查得样品sIL-2R含量。 (3) 本方法测定sIL-2R含量时,不需要计算抑制百分率。 酶免试剂盒(ELISA KIT) 自身免疫系列酶联免疫试剂(ELISA):抗核抗体(ANA) ,抗中心粒胞浆抗体,双链DNA, ENA抗体,ENA-Profile抗体,Sm/RNP抗体,Sm抗体,Jo-1抗体,Scl-70抗体,SS-A抗体, SS-B抗体,抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab),抗心磷脂抗体IgG(ACA IgG),抗心磷脂抗体IgA(ACA IgA),抗心磷脂抗体IgM(ACA IgM),髓过氧化物酶,蛋白酶3,抗甲状腺过氧化物酶(TPO),?2糖蛋白,抗麦胶蛋白IgG,抗麦胶蛋白IgA,类风湿因子 IgM
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