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简介:细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。要求工作环境清洁、空气清新、干燥和无烟尘,下面来瞧瞧:微生物实验室的环境要求。 一、合适的气体环境 气体是哺乳动物细胞培养生存必需
简介:细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。要求工作环境清洁、空气清新、干燥和无烟尘,下面来瞧瞧:微生物实验室的环境要求。 一、合适的气体环境 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。 开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响.但细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长。但有一些细胞也喜欢偏碱环境中生长,如成纤维细胞最适合pH是7.4-7.6.每种细胞都有其最适pH值。 二、培养器皿 器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有: 1.液体储存瓶; 2.培养瓶; 3.培养皿; 4.吸管; 5.离心管; 6.其它。 三、常用设施及设备 1.超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式、直流式、外流式。 2.无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等,缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等。 3.操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物。 4.洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等。 5.分析间:显微镜,计算机及打印机等。
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