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简介:人脑钠素(BNP)ELISA试剂盒说明书下载 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中脑钠素(BNP)的含量。 ELISA 实验原理:试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脑钠素(BNP)水平。用纯化的人脑钠素(BNP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往
简介:人脑钠素(BNP)ELISA试剂盒说明书下载 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中脑钠素(BNP)的含量。 ELISA 实验原理:试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脑钠素(BNP)水平。用纯化的人脑钠素(BNP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脑钠素(BNP),再与HRP标记的脑钠素(BNP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脑钠素(BNP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人脑钠素(BNP)浓度。 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 ELISA 试剂盒组成: 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片(48) 2 片(96) 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:9000pg/ml 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
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