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酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法)操作步骤
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简介:注意事项: 1、ACP 孵育液、ACP 硫化液易失效,最好分成小分储存。ACP 硫化液具有腐蚀性。 2、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。 3、样本需新鲜,取材后应立即处理,否则会影响酶的活性。 4、组织固定需在4℃冰箱进行,时间不宜超过24h
简介:注意事项: 1、ACP 孵育液、ACP 硫化液易失效,最好分成小分储存。ACP 硫化液具有腐蚀性。 2、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。 3、样本需新鲜,取材后应立即处理,否则会影响酶的活性。 4、组织固定需在4℃冰箱进行,时间不宜超过24h,否则酶活性会减弱或消失。 5、组织在石蜡包埋时,温度不宜高于56℃。应使用熔点为52~54℃的石蜡进行浸蜡,浸蜡时间要短,否则酶活性会减弱或消失。 6、不纯的二甲苯会分解黑色沉淀,宜选用AR 级以上的二甲苯。 7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产品组成: 试剂(A): ACP 孵育液 50ml 4℃ 避光 试剂(B): ACP 硫化液 2×1ml RT 避光 试剂(C): ACP 对照液 10ml 4℃ 避光 产品简介: 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的适宜pH 为4.5~5.5。 酸性磷酸酶染色液以β-栺油磷酸钠为底物,在酸性pH 下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸盐,遇铅离子则格成磷酸铅沉淀,再被S2+置换,最终格成硫化铅棕黑色沉淀。酸性磷酸酶的一般抑制剂为氟化物、磷酸根离子。对某些酸性磷酸酶来讲,Cu2+、酒石酸根离子和四氯化碳以及醛类也都是抑制剂,Mn2+为该酶的激活剂。冰冻切片和石蜡切片均可,但多用冰冻切片。临床上,该染色法对前列腺癌和其他脏器的转移性前列腺癌呈强阳性反应,霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、舌表皮性癌、多核巨细胞瘤的瘤细胞质也呈强阳性反应,Ewing 肉瘤、成骨肉瘤等呈阴性反应。
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