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葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)
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简介:葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书 注意事项: 1、ALP 硫化液易失效,最好分成小分储存,一经开启立即使用。 2、ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。 3、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。 4、本染色液适用于冰冻切
简介:葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书 注意事项: 1、ALP 硫化液易失效,最好分成小分储存,一经开启立即使用。 2、ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。 3、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。 4、本染色液适用于冰冻切片,一般不固定,也可染色后固定,固定步骤非必须步骤。 5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 阴性对照(可选): 将切片置入试剂(D)- G-6-Pase 对照液中,其余步骤相同,结果为阴性。 G-6-Pase 活性处 棕色沉淀 产品简介: 葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6 –phosphatase,G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、肠等组织的膜结合酶,G-6-Pase 和微体紧密结合,定位于内质网,是内质网的主要标志酶,能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。G-6-Pase 对维持血糖浓度的相对恒定有至关重要的作用,是糖代谢的关键酶。当血糖降低时,G-6-Pase 促进肝糖原转变为血糖。当缺乏G-6-Pase 时,会引起糖原分解障碍,使糖原积累在肝、肾、心脏等部位,导致肝糖原储积病。G-6-Pase 最适pH 为6.5,在pH6.0~8.0 亦可,pH8.0 最稳定,pH5.0易变性。组织化学反应多用pH6.5~6.7。 葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。该酶对固定很敏感,组织经80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋,G-6-Pase 完全被抑制。需用新鲜组织低温恒冷切片,经甲醛短时固定酶即失活,但可短时低温丙酮固定,但一般不固定。 自备材料: 1、蒸馏水 2、温箱或水浴锅 操作步骤(仅供参考): 1、冰冻切片入蒸馏水清洗。 2、入G-6-Pase 孵育液,37℃孵育15~20min。 3、自来水冲洗后,蒸馏水冲洗。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育1min。 5、自来水水洗3~5min。 6、(可选)入中性福尔马林,固定2min。 7、入蒸馏水水洗2 次。 8、甘油明胶封片。
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