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示差折光检测器高效液相色谱仪的检定规程
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简介:1. 说明 1.1. 适用范围:适用于RID-10A型示差折光检测器液相色谱仪校正。 1.2. 参照依据:依国家技术监督局JJG705-2002“实验室液相色谱仪检定规程”及《中国药典》2005年版二部附录VH制定。 1.3. 器操作及环境:应符合本仪器操作及维护保养规
简介:1. 说明 1.1. 适用范围:适用于RID-10A型示差折光检测器液相色谱仪校正。 1.2. 参照依据:依国家技术监督局JJG705-2002“实验室液相色谱仪检定规程”及《中国药典》2005年版二部附录VH制定。 1.3. 器操作及环境:应符合本仪器操作及维护保养规程。 2. 检定项目和技术要求 2.1. 泵流量设定值误差:Ss应≤±2%;重复性误差:SR应≤±2% 2.2. 柱温箱温度设定值误差ΔTs:应不超过±2.0℃;柱温箱温度稳定性:应不超过1.0℃。 2.3. 基线漂移:应≤5×10-6RIU/h;基线噪声:应≤5×10-7 RIU。 2.4. 最小检测浓度:应不超过5×10-6g/ml丙三醇/水溶液。 2.5. 定性测量重复性误差(6次定量环进样)应RSD≤1.5%。 2.6. 定量测量重复性误差(6次定量环进样)应RSD≤1.5%。 3. 检定方法 3.1. 泵流量设定值误差Ss,流量稳定性误差SR的检定 3.1.1. 仪器与用具 分析天平 万分之一 秒表 精度1/100秒 容量瓶 50ml 3.1.2. 操作程序 3.1.2.1. 将泵、进样器、色谱柱和检测器连接好,以甲醇为流动相。 3.1.2.2. 按表1设定流量,待流速稳定后,在流动相排出口用事先精密称定过重量的容量瓶收集流动相,同时用秒表记录,准确收集10~25分钟,再精密称定其重量。收集时间 符合表1规定,每个设定值重复测定3次。 3.1.3. 结果计算 按下列公式计算SS和SR: Fm=(W2-W1)/(P.t) SS=(Fm-FS)/FS×100% SR=(Fmax-Fmin)/F×100% W2为容量瓶+流动相的重量(g) W1为容量瓶的重量 P为实验条件下的流动相密度(g/cm3) t为收集流动相的时间(min) Fm为流量实测值(ml/min) FS为流量设定值 Fmin为同一组测量中流量最小值 Fmax为同一组测量中流量最大值 F为同一组测量中流量的算术平均值 3.1.4. 结果判断:SS和SR值应符合下表规定 3.1.5. 注意事项:收集时间应将“秒”换算为“分”代入公式计算。 3.2. 柱温箱温度设定值误差ΔTs、柱温箱温度稳定性Tc的检定 3.2.1. 操作程序:将温度设为40℃,将一经过校正的温度计放入柱温箱内,每隔10min读取温度计显示温度与柱温箱显示温度一次,共读取7次,求出平均值。 3.2.2. 结果计算: ΔTs=平均值与设定值之差 Tc=7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性。 3.2.3. 结果判断:柱温箱温度设定值误差ΔTs应不超过±2.0℃;柱温箱温度稳定性应不超过1.0℃。 3.3. 基线漂移和基线噪声的检定 3.3.1. 色谱条件 色谱柱:C18 流动相:水 流速:1ml/min 数据处理:龙智达GPC色谱工作站 3.3.2. 操作步骤 将仪器各部份联接好(检测器接10mv输出口),接通电源,以水为流动相,流速为1ml/min,量程范围选择0.01×10-6RIU,工作站放大倍数为5,启动泵,待基线稳定后记录基线30min和60min,根据检测器衰减的倍数和测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度,按下式计算基线噪声和基线漂移,用检测器自身的物理量(RIU)表示。 3.3.3. 计算公式: A×0.01×10-6 基线噪声=----------------------- 10×5 B×0.01×10-6 基线漂移=----------------------- 10×5 式中: 10—检测器输出电压为10mv; 5—工作站放大倍数; 0.01×10-6—为设置量程,RIU; A—所记录基线30min内,基线最大峰-峰高对应的值,mv; B--所记录基线60min内,基线偏离原点的值,mv/h。 3.3.4. 结果判断: 基线漂移应≤5×10-6RIU/h; 基线噪声应≤5×10-7 RIU。 3.4. 最低检测浓度的检定 3.4.1. 对照品溶液的配制:配制含丙三醇5×10-6g/ml的水溶液。 3.4.2. 色谱条件: 色谱柱:C18 流动相:水 流速:1ml/min 进样量:20ul(定量环) 数据处理:龙智达GPC色谱工作站 3.4.3. 操作步骤:将仪器各部份联接好(检测器接10mv输出口),接通电源,以水为流动相,流速为1ml/min,量程范围选择0.01×10-6RIU,工作站放大倍数为5,启动泵,待基线稳定后,将上述配制好的对照品溶液进样,记录色谱图。 3.4.4. 按下式计算最小检测浓度: Cl=2·Nd·C/H 式中: Cl:最小检测浓度(g/ml); Nd:基线噪声峰-峰高,mv; C:对照品溶液浓度(g/ml); H:标准溶液的色谱峰高,mv。 3.4.5. 结果判断:最低检测浓度应不超过5×10-6g/ml(丙三醇/水溶液)。 3.5. 定性、定量重复性试验 3.5.1. 色谱条件 色谱柱:C18 流动相:水 流速:1ml/min 进样量:10ul(定量环) 数据处理:龙智达GPC色谱工作站 3.5.2. 操作程序 将仪器各部份联接好(检测器接10mv输出口),接通电源,以水为流动相,流速为1ml/min,量程范围选择1×10-6RIU,工作站放大倍数为5,启动泵,待基线稳定后,用进样阀的定量环注入10ul1×10-3g/ml的丙三醇水溶液,连续进样6次,记录丙三醇的峰保留时间和峰面积。 3.5.3. 结果计算: 式中: RSD%--定性(定量)测量重复性相对标准偏差; Xi--第i次测得的保留时间或峰面积; --6次测量结果的算术平均值; i--测量序号。 3.5.4. 结果判断 定性测量重复性误差:6次峰保留时间相对标准偏差(RSD)应≤1.5%。 定量测量重复性误差:6次峰面积相对标准偏差(RSD)应R≤1.5%。 4. 检定周期 4.1. 法定检定周期为1年。 4.2. 仪器维修或发现异常时应全面检定一次。 4.3. 正常自检按下表执行: 5. 附件: 附:B63314-1 Rev.2 文件历史记录 6. 附表: 表:B63314 Rev.1示差检测器高效液相色谱仪检定记录(执行)
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