简介:鼠药中毒检验方法-5各种方法检材前处理
㈠ 有机氟杀鼠药中毒生物检材前处理方法
1、 GC-ECD方法的前处理:
1.1 对照样品制备:取空白胃或肝组织各2克,添加5~10μg氟乙酸钠 (浓0.01mg/mL),混匀作阳性对照。同时取相同的空白组织2克平行操作,作阴性对照。
1.2 提取方法:用丙酮水 (4:1) 5mL×2进行超声振提半小时,再浸提或放置过夜,离心后将浸提液浓缩至约2mL水液后,再离心吸取上清液用苯2~3mL振提半分钟,苯振提的目的,一方面为净化洗涤,另一方面可用来同时排除毒鼠强及常见的有机磷农药。苯洗涤后的水溶液用2mol HCl调pH2左右,用乙酸乙酯5 mL×2提取数分钟,离心分出上层乙酸乙酯,在合并的乙酸乙酯中加入0.2mL 10%三乙醇胺丙酮液,混匀,在60~70℃下挥干备用。
1.3 衍生化方法:在挥干提取液的试管中,加入约0.5g无水硫酸钠和0.1g无水碳酸钾,再加100μl 的10%五氟苄基溴丙酮液,加2mL丙酮,盖严混匀,于微波炉中最低档加热2分钟 (或60℃下加热30分钟) 使其衍生化,取出振摇混匀、离心,上清液可进行GC-ECD分析。
2、 GC-NPD方法的前处理:
2.1 对照样品制备:取空白兔肝1.0g,添加氟乙酰胺纯品5μg (浓度0.01mg/mL),混匀作阳性对照。同时取相同的空白组织1.0g平行操作,作阴性对照。
2.2 提取方法:用丙酮水 (4:1) 5mL×2进行超声振提半小时,然后再振摇5分钟,合并在80℃下空气吹浓缩至<1mL,离心在上清液里再加2mL左右的丙酮,再浓缩至<1mL用苯洗涤一次,离心(苯液用于检验毒鼠强和有机磷农药),上清水溶液备用。
2.3 衍生方法:将上一步的水溶液调为近中性,加100μl衍生化试剂DEPA及100μl催化剂DDC,用2mL×2乙酸乙酯强振5分钟,使其衍生及萃取,离心,分出乙酸乙酯合并,在60~70℃下用空气吹干,加200μl乙醇溶解残渣,然后进行GC-NPD定量分析。
3、 GC-FID方法的前处理
3.1 对照样品制备:取空白血(血站购得)1.0mL两份,其一添加氟乙酰胺纯品5μg,混匀作阳性对照。其二用于平行操作,作阴性对照。
3.2 提取方法:用丙酮水 (4:1) 5mL×2进行超声振提半小时,然后再振摇5分钟,离心合并提取液,在80℃下空气吹浓缩至<1mL,离心在上清液里再加2mL左右的丙酮,再浓缩至<0.5mL,再用甲醇定容到0.5mL,供GC-FID定量分析。