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饲料中L-肉碱的高效液相色谱(HPLC)检测方案
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简介:左旋肉碱(L-肉碱)又称肉毒碱,是一种水溶性氨基酸,由赖氨酸衍生而来。分子结构为L-γ-三甲胺β-羟丁酸,分子式为C7H16NO3,分子量为161.2。它是B族维生素类似物,曾被称为维生素BT。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基,其饱和键和极性官能
简介:左旋肉碱(L-肉碱)又称肉毒碱,是一种水溶性氨基酸,由赖氨酸衍生而来。分子结构为L-γ-三甲胺β-羟丁酸,分子式为C7H16NO3,分子量为161.2。它是B族维生素类似物,曾被称为维生素BT。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基,其饱和键和极性官能团有良好的水溶性和吸湿性,200℃以上它仍稳定存在,可在PH3~6的溶液中放置一年以上而不变坏。1998年我国卫生部将L-肉碱批准为食品添加剂,列入营养强化剂类。 科晓仪器公司利用全新高性能的LC-10B高效液相色谱仪,经实践检测饲料中L-肉碱的含量,得出的结果准确可靠,检出限好,适用于饲料中L-肉碱的测定,供广大用户参考。 以下是饲料中L-肉碱的详细检测方法。 1 仪器与试剂 1.1 仪器 LC-10B高效液相色谱仪 Vertex 色谱柱 C18 250mm×4.6mm×5μm 实验室常用仪器设备 超声波水浴 分析天平(感量0.001g) 0.45μm水性滤膜 1.2 试剂 异丙醇,色谱纯。 甲醇,色谱纯。 乙腈,色谱纯。 磷酸氢二钠。 磷酸二氢钾。 三乙醇胺。 柠檬酸。 氧化银。 肉碱衍生剂。 2 测定原理 样品经加乙醇超声提取后,然后加入肉碱衍生剂,将衍生物注入高效液相色谱反相柱上进行分离,用紫外检测器在210nm波长处定量测定。 3 试样溶液的制备 称取5g试样于100ml烧杯中,加入30ml无水乙醇,溶解并转移至100ml容量瓶中,先后用10ml无水乙醇分3次洗涤烧杯,样液转移至100ml容量瓶中,超声提取10min后用无水乙醇定容至刻度,混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml,加入肉碱衍生剂0.25ml(衍生剂配制方法:40 mg P-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈,加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl),混合后置于60℃恒温水温箱120 min,吸取20 µl进样分析。 4 色谱条件 色谱柱:Vertex C18柱 250mm×4.6mm×5μm; 流动相:甲醇:磷酸盐=5:95 流速:1.0mL/min; 温度:室温; 进样量:20μL; 检测波长:210nm。 更多检测方案请直接与科晓仪器0571-88955439联系。
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