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简介：

氰化物中毒的检验方法-分光光度简介：

氰化物中毒的检验方法-分光光度法

氰离子与某些试剂在一定条件下反应生成有色物质，其最大吸光度与氰离子浓度符合比耳定律，可直接用可见分光光度法分析。或利用氰离子与某些金属离子的络合能力，建立测定氰离子含量的紫外分光光度法

五、分光光度法检验

1. 可见分光光度法

原理——氰离子与卤化剂反应生成卤化氰，再与生醛试剂（如吡啶）反应生成戊烯二醛，醛再与芳香胺或具有α-活泼氢能与醛缩合的试剂反应生成有色物质。在一定浓度范围内有色物的吸光度与氰离子浓度呈线性关系。

试剂——常用卤化剂有氯胺T、次氯酸、溴代唬柏酞亚胺等；常用的生醛试剂有异烟酸、4-甲基吡啶等；常用的缩合剂有对苯二胺、丙二腈、3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮和巴比妥酸等。

操作——在扩散盒内池放入0.1mol/L氢氧化钠 3ml，外池放入检血4ml及稀硫酸4ml，密封在室温下扩散3h。取内池吸收液1ml，加入磷酸缓冲液2ml和0.25%氯胺T溶液1ml，摇匀放置2min，加入3ml吡啶-巴比妥酸试剂，放置10min。同时以空白试剂为参比，在580nm处测定所得紫红色溶液的吸光度，标准曲线法求检血含量。检出限为0.2μg/ml，线性范围0.5μg/ml~5μg/ml。

2. 紫外分光光度法

操作——在氨溶液中氰离子与镍离子生成稳定镍氰络离子，其最大吸收波长为267nm，检液中氰离子浓度在0.5mol~5mol/ml范围内与吸光度呈线性关系。操作时取检材（胃内容、血液或组织匀浆等）1g~2g，加释放剂1:1硫酸2ml ，再加吸收液氯化镍氨溶液2ml~5ml，用抽吸法或扩散法进行分离，以试剂空白为参比测定吸收液267nm处的吸光度，用标准曲线法测检材中氰离子含量。

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