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抗盐酸克伦特罗单链抗体基因的克隆、序列分析及表达

简介:提取分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA,通过RT—PCR技术,扩增vH和v 用一段柔性肽链一(G s)s将Vw和VfJ连接成ScFv。测序后经NCBI Blast分析,所得ScFv具有重组功能性鼠抗体可变区基因的特征。将所得目的基因与pET一22b(+)连接,转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达,表达蛋白经SDS—PAGE分析,37 C培养5 h表达量较大,25 C诱导表达以可溶性为主。
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