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简介:产品名称:平板计数琼脂(PCA) 英文名称:Plate Count Agar 产品规格:250g 供应商:上海远慕 产品用途:PCA培养基用于检测食品、奶制品、饮用水、化妆品中微生物含量。既用于标准方法,也用于自动化螺旋板计数法。 储存条件:4 ℃保存,3 年有效。 产
简介:产品名称:平板计数琼脂(PCA) 英文名称:Plate Count Agar 产品规格:250g 供应商:上海远慕 产品用途:PCA培养基用于检测食品、奶制品、饮用水、化妆品中微生物含量。既用于标准方法,也用于自动化螺旋板计数法。 储存条件:4 ℃保存,3 年有效。 产品描述: 平板计数琼脂(Plate Count Agar)简称PCA,是非选择性固体培养基,用于食品、化妆品和饮 用水中微生物计数。 本培养基配方采用标准法配方。 平板计数琼脂(PCA)原理: 胰蛋白胨提供有机氮源和游离氨基酸,酵母提取物提供生长因子,葡萄糖作为能量物质。平板计数琼脂培 养基中的营养成分能够支持牛奶及饮用水中绝大多数微生物的生长。 组成成分(g/L): 胰蛋白胨 5.0 酵母提取物 2.5 葡萄糖 1.0 琼脂 15.0 pH 7.0± 0.2 配制方法: 1. 称取以上组分,或者直接称取本公司的平板计数琼脂培养基23.5g 本品,用1000ml去离子水重悬,加热搅拌使其全部溶解。 2. 平板计数琼脂培养基的灭菌温度是:121°C高温灭菌15min。 3. 待冷却至55°C时倒20ml培养基到90mm无菌培养皿中。 4. 对于酵母和霉菌含量高的样品,则用100mm培养皿,每个培养皿倒入20-25ml培养基。 待琼脂表面干燥后使用。 本产品仅供科研使用,请勿用于医药,不能用于临床治疗诊断使用! 平板计数琼脂使用方法(平板计数法、大肠菌群平板计数法、菌落总数平板计数法) 方法一 菌落计数总数之稀释倒平板法 此方法是2010年版国家标准 GB 4789.2-2010中的菌落总数计数方法。 1、称取平板计数琼脂23.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,灭菌完成后,将获得的平板计数琼脂培养基置于45度水浴中备用。 2、样品的稀释及处理。取样品25g或者25ml,溶解于225ml无菌生理盐水或者无菌磷酸盐缓冲液中,然后使得样品充分溶解和混匀。此时的样品浓度是稀释了原样品10倍。 3、10倍梯度稀释样品液。取样品溶解液1 ml,加入9ml 无菌生理盐水或者无菌磷酸盐缓冲液中,吹打均匀,此时的溶液样品浓度是原始样品的0.01倍。每次吸取上一个样品1 ml,加入到9ml无菌生理盐水或者无菌磷酸盐缓冲液中,根据这个方法继续进行样品的连续梯度稀释。 4、 选择2-3个合适的稀释度,吸取该稀释度的1 ml稀释液于无菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。 5、稀释液移入平皿后,及时将凉至45-50 ℃的琼脂培养基(可放置于45℃水浴箱保温) 注入平皿约15-25 mL,并转动平皿使菌液稀释液和琼脂培养基混合均匀。同时将琼脂 培养基倾入加有1 mL无菌生理盐水或者磷酸盐缓冲液的灭菌平皿内作空白对照。 6、待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。 7、观察结果并进行计数。30-300个菌落为合适范围,出具菌落总数计数报告。 方法二:菌落总数计数平板涂布法 1、称取平板计数琼脂23.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。 2、待冷却至55°C时倒20ml培养基到90mm无菌培养皿中,冷却后成为可以使用的平板计数平板,待表面干燥后使用。对于酵母和霉菌含量高的样品,则用100mm培养皿,每个培养皿倒入20-25ml培养基。 待琼脂表面干燥后使用。 3、样品的稀释及处理。取样品25g或者25ml,溶解于225ml无菌生理盐水或者无菌磷酸盐缓冲液中,然后使得样品充分溶解和混匀。此时的样品浓度是稀释了原样品10倍。 4、10倍梯度稀释样品液。取样品溶解液1 ml,加入9ml 无菌生理盐水或者无菌磷酸盐缓冲液中,吹打均匀,此时的溶液样品浓度是原始样品的0.01倍。每次吸取上一个样品1 ml,加入到9ml无菌生理盐水或者无菌磷酸盐缓冲液中,根据这个方法继续进行样品的连续梯度稀释。 5、 选择2-3个合适的稀释度,吸取该稀释度的0. 1 ml或者0.2 ml稀释液于倒好的计数平板中,每个稀释度做两个琼脂平板。 6、使用无菌的玻棒或者其他无菌涂布物品,将稀释液在平板上涂布均匀。 7、将平板置于36±1℃温箱内培养48±2h。 8、观察结果并进行计数。30-300个菌落为合适范围。出具菌落总数计数报告。
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