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HPLC的主要分离方法-2.正相色谱与反相色谱

简介:

根据固定相和流动相的相对极性大小,高效液相色谱分为:

  • 根据固定相和流动相的相对极性大小,高效液相色谱分为:

    一、正相色谱

    采用硅胶、氧化铝或带有氰基、二醇基和氨基的极性固定相,非极性流动相操作模式,依据溶质分子的极性大小进行分离。溶质分子与固定相的极性基团产生特异的极性相互作用,极性作用大小决定的保留时间大小。
    正相色谱经常采用的色谱柱的柱强度:
    硅胶柱 ≈ 氧化铝柱 > 氨基柱 > 二醇基柱 > 氰基柱

    二、反相色谱

    采用非极性表面的疏水载体为固定相,以比固定相极性强的溶剂系统为流动相的操作模式,依据溶质分子的疏水性大小进行分离。溶质分子疏水基与疏水固定相产生非特异的疏水相互作用,疏水作用大小决定的保留时间大小。
    反相色谱柱的柱强度(疏水化合物在反相柱的保留值):
    碳十八柱 ≈ 碳八柱 > 苯基柱 > 碳四柱 > 碳三柱 > 碳一柱(TMS)> 氰基柱 >> 非键合硅胶
    反相色谱中常用含水乙腈、甲醇和四氢呋喃的流动相。

    摘自“现代仪器分析网络课程”  作者:厦门大学-阮源萍

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