合集
标准
方法
手册
讲义
报价单
谱图库
色谱图
质谱图
光谱图
X-射线图
波谱图
显微图
更多
专利
样本
相关软件
用户通讯
招标文件
新冠肺炎
其他
标准查询
今日免费资料
论文索引
您还有
0
次抽奖机会
锤子
您现在的位置:
首页
>
资料中心
>
分析方法/应用文章下载
>
high resolution melting HRM 采用快速循环荧光定量PCR仪和LightScanner32上的非标记探针的高分辨率熔解曲线进行突变体等位基因的偏向性扩增 下载
high resolution melting HRM 采用快速循环荧光定量PCR仪和LightScanner32上的非标记探针的高分辨率熔解曲线进行突变体等位基因的偏向性扩增
扫码解锁,免费下载文件
请使用
最新版本仪器信息网APP
扫码登录
步骤:
打开仪器信息网APP并登录 ——》点击APP首页右上角扫一扫 ——》APP端确认解锁 ——》PC端下载文件
免费注册
简介:采用快速循环荧光定量PCR仪和LightScanner32上的非标记探针的高分辨率熔解曲线进行突变体等位基因的偏向性扩增 简介: 高分辨率熔解曲线可以通过扫描PCR的扩增片断来检测杂合体中基因序列的变化。该方法在检测小于400bp的PCR片断时灵敏
简介:采用快速循环荧光定量PCR仪和LightScanner32上的非标记探针的高分辨率熔解曲线进行突变体等位基因的偏向性扩增 简介: 高分辨率熔解曲线可以通过扫描PCR的扩增片断来检测杂合体中基因序列的变化。该方法在检测小于400bp的PCR片断时灵敏度可达99%以上。该方法自开发以来,被不断的应用于新的领域,如采用小片段扩增法和非标记的探针(LunaProbes)对已知序列进行基因分型。 最近,一种基于快速循环荧光定量PCR仪和LightScanner32上的非标记探针的高分辨率熔解曲线分析,进行突变体等位基因的偏向性扩增的方法被开发的了出来。该方法可以在野生型等位基因的背景下检测出突变率小于5%的等位基因的突变。 原理: 采用双链DNA的饱和燃料LCGreen Plus和非标记的探针(LunaProbes)熔解温度的不同(Tm值)来区分不同的基因型。 根据要分析的等位基因,设计出一种可以与之结合的非标记的探针(LunaProbes)。该探针的3’ 端被封闭,以防止PCR过程中的扩增。突变的等位基因的偏向性扩增主要是通过设定PCR反应的退火温度来实现的。这种温度介于完全互补的探针(野生型位点)Tm值和非完全互补的探针(突变体的位点)Tm值之间。在该退火温度下,完全互补的探针和目标DNA链仍然结合在一起,因而抑制野生型序列的PCR反应,从而实现突变体等位基因的偏向性扩增。 示例: LunaProbes与野生型基因之间的Tm值为62ºC,与突变体基因之间的Tm值为54ºC,因而采用58ºC作为退火温度来进行突变的等位基因的偏向性扩增。 图 1. LunaProbes的标准化差异峰. 野生型的等位基因位点(灰色)= 62ºC突变型的等位基因位点(红色)= 54ºC。58ºC作为退火温度来进行50–50的混合样品(黄色)的突变等位基因的差异性扩增。这种扩增方法使得差异扩增的分辨率达到10倍,并且使得检测的灵敏性到0.7–1.5%
详细>
所需积分:
0 分
所需积分:
0 分
0分
下载次数:165 次
获取积分:页面上方
资料大小: 92 KB
上传人:
思博全
上传日期:2009-04-05
收藏资料
(0)
评论
(
0
)
举报
立即下载
扫码免费下载
200份精品资料,免费下载
千种礼品,积分兑换
热门资料
色谱柱的活化技术
HJ 1226-2021 水质 硫化物的测定 亚甲基蓝分光光度法.pdf
纸浆水提出物中五氯酚含量的测定
EU 2020/1245
金相图谱
质谱碎裂技术综述及质谱分析法.rar
安捷伦ICP-OES 5110_中文用户手册.pdf
岛津GC2014气相色谱仪硬件基本操作
80/766/EEC
Agilent 5110 ICP-OES.pdf
最新资料
JJG(机械)192-1996 电机温升电阻测量仪检定规程.pdf
MIL-W-25140B.PDF
MIL-STD-756B.pdf
MIL-F-83300.PDF
MIL-F-9490D.pdf
MIL-D-8708C.PDF
MIL-C-18244A.PDF
MIL-A-8861B.PDF
DZT 0282-2015 水文地质调查规范(1:50000).pdf
JTT 1089-2016 路面沥青改性材料 废橡塑基热塑性弹性体.pdf
最新方案
食品/农产品
环保
制药/生物制药
其他
更多解决方案>>
兽药中含量测试检测方案(液相色谱仪)
应用领域:
水中全氟化合物检测方案(固相萃取仪)
应用领域:
水中全氟化合物检测方案(固相萃取仪)
应用领域:
API 和凝胶胶囊中重金属检测方案(微波消解仪)
应用领域:
相关评论
您的评论:
推荐
发表评论
还可以输入
500
字
品牌合作伙伴
上传资料
一键询价
下载该资料的还下载
实验室玻璃器皿 第1部分
下载 6 次
|
200 积分
|
2045 kb
用直接注入抑制离子色谱法测定燃料乙醇和丁醇中存在的和潜在的硫酸盐和无机氯化物的标准试验方法
下载 3 次
|
200 积分
|
4048 kb
实用高效液相色谱法的建立(第2版)
下载 148 次
|
10 积分
|
2701 kb
全面质量管理基本知识(第四版)
下载 455 次
|
10 积分
|
4592 kb
VDA238-100- 弯曲试验(中英文对照).pdf
下载 94 次
|
30 积分
|
509 kb
更多
>>
推荐会议
更多
>>
推荐课程
气相色谱-质谱联用技术
¥5980
个人版:质谱不神秘
¥5980
【自营】有机质谱谱图解析技巧
¥1999
热重分析技术与应用体系课
¥169
上传者上传的其他资料
Lightscanner 和Lightscanner32 非标记探针法基因分型
一种快速有效的基因分型斑马鱼的方法
变性高效液相色谱高通量检测动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌
用高分辨率溶解数据的内部标准校正杂合子检测
用非标记探针、遮蔽技术及高分辨率熔解扩增子分析对RET原癌基因进行基因分型
COLD-PCR和高分辨率溶解结合使用,高效的筛查和鉴定癌症基因低水平的未知突变
下载排行
本周
本月
全部
1
农村饮用水安全工程——水质监测解
2
气相色谱仪维修手册(故障分析)【P
3
安捷伦GC7890超详细资料
4
计量认证人员职责分配
5
中华人民共和国依法管理的计量器
6
GB/T 2406-2009 氧指数测定方法
7
原子吸收中的干扰及其抑制
1
农村饮用水安全工程——水质监测解
2
气相色谱仪维修手册(故障分析)【P
3
安捷伦GC7890超详细资料
4
计量认证人员职责分配
5
中华人民共和国依法管理的计量器
6
原子吸收中的干扰及其抑制
7
GB/T 2406-2009 氧指数测定方法
1
Q2XXX系列DSC产品介绍
2
研究论文集(理论篇)--论文六:用
3
微波催化有机化学反应机理研究
4
研究论文集(理论篇)--论文七:论
5
LC2000性能测试报告
6
Q系列TMA热机械分析仪 产品介绍
7
epMotion 5075如何出色地完成96
8
环境监测分析实验室的质量管理特
9
物理化学专业工具软件做物化实验
请输入验证码
请输入图中
蓝色的字
免积分下载
确认
输入错误!
仪器信息网资料中心栏目所发布的一切文档、图谱等资源仅限于学习和研究目的,版权归原属作者所有;不得将上述内容用于商业或者非法用途,否则,一切后果请用户自负。您必须在下载后的24个小时之内,从您的电脑中彻底删除上述内容。如果您喜欢该资源,请支持正版,以便得到更好的正版服务。如有侵犯到您的权益,请联系我们(download@instrument.com.cn)处理,感谢您的合作!
安装App资料免费下
资料微服务您的资料助手