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LC98-II型高效液相色谱仪在原料乳与乳制品三聚氰胺检测中的应用 下载
LC98-II型高效液相色谱仪在原料乳与乳制品三聚氰胺检测中的应用
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简介:LC98-II型高效液相色谱仪在原料乳与乳制品三聚氰胺检测中的应用 北京温分分析仪器技术开发有限公司 孙高祥 内蒙古旺旺工厂 丁小伟 新疆石河子旺旺乳制品厂 靳妩媚 1 前言 依据GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法,
简介:LC98-II型高效液相色谱仪在原料乳与乳制品三聚氰胺检测中的应用 北京温分分析仪器技术开发有限公司 孙高祥 内蒙古旺旺工厂 丁小伟 新疆石河子旺旺乳制品厂 靳妩媚 1 前言 依据GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法,本文提供了LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳及乳制品中三聚氰胺的高效液相色谱(HPLC)检测方法。 2 范围 GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中,提出高效液相色谱法的定量限为2 mg/kg,液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01 mg/kg。而本文所提供的LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。 3 高效液相色谱法 3.1 原理 试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取,经阳离子交换固相萃取柱净化后,用高效液相色谱测定,外标法定量。 3.2 试剂与材料 均按GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.2操作。 3.3 仪器和设备 3.3.1 LC98-II型高效液相色谱仪(北京温分分析仪器技术开发有限公司):配有P98-II型高压输液泵及UV98-II型紫外检测器。 3.3.2 分析天平:感量为0.0001 g和0.01 g。 3.3.3 离心机:转速不低于4000 r/min。 3.3.4 超声波水浴。 3.3.5 固相萃取装置。 3.3.6 氮气吹干仪。 3.3.7 涡旋混合器。 3.3.8 具塞塑料离心管:50 mL。 3.3.9 研钵。 3.4 样品处理 均按GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.4操作。 3.5 高效液相色谱测定 3.5.1 HPLC 参考条件 a) 色谱柱:C8柱,250 mm×4.6 mm,5 μm,或C18柱,250 mm×4.6 mm,5 μm。 b) 流动相:C8柱,离子对试剂缓冲液(3.2.10)-乙腈(85+15,体积比),混匀。C18柱,离子对试剂缓冲液(3.2.10)-乙腈(90+10,体积比),混匀。 c) 流速:1.0 mL/min。 d) 柱温:40℃。 e) 波长:240 nm。 f) 进样量:20 μL。 3.5.2 标准曲线的绘制 用流动相将三聚氰胺(CAS No:108781)标准储备液逐级稀释得到的浓度为0.1、0.8、2、20、40、80 μg/mL 的标准工作液, 浓度由低到高进样检测,以峰面积-浓度作图,得到图A所示标准曲线。 图A 标准曲线 3.5.3 定量测定 待测样(旺旺集团提供)液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进样分析。下图所示浓度为0.1mg/kg三聚氰胺待测样色谱图及数据。 3.5.4 结果计算 试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按式(1)计算获得: A × c × V×1000 X= × f ……………………(1) As × m×1000 式中: X—— 试样中三聚氰胺的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); A—— 样液中三聚氰胺的峰面积; c—— 标准溶液中三聚氰胺的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V—— 样液最终定容体积,单位为毫升(mL); As —— 标准溶液中三聚氰胺的峰面积; m—— 试样的质量,单位为克(g); f—— 稀释倍数。 3.6 空白实验 除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行。 3.7 仪器定量检测限 LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)的噪声指标为5X10-5AU/mV(50µV),按式(1)计算,可得LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。 3.8 回收率 在添加浓度2 mg/kg~10 mg/kg浓度范围内,回收率在80%~110%之间,相对标准偏差小于10%。 3.9 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 3.10 结论 本文所提供的LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。远远优于GB/T 22388—2008规定的2mg/kg定量检测限,为GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中规定的定量限的1/40。
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