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简介:地球上彻底消灭的第一种人类疾病--天花是靠牛痘疫苗来实现的。疫苗已帮助人类抵抗了多种传染性疾病的侵袭。但是,死疫苗不能提供内源性抗原,需多次接种才能起到一般的免疫效果;减毒活疫苗往往存在毒力回升的危险;亚单位疫苗免疫性差;重组疫
简介:地球上彻底消灭的第一种人类疾病--天花是靠牛痘疫苗来实现的。疫苗已帮助人类抵抗了多种传染性疾病的侵袭。但是,死疫苗不能提供内源性抗原,需多次接种才能起到一般的免疫效果;减毒活疫苗往往存在毒力回升的危险;亚单位疫苗免疫性差;重组疫苗存在安全性等问题。基因疫苗在这种情况下于1993年应运而生。基因疫苗指的是DNA疫苗,即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答。抗原基因在一定时限内的持续表达,不断刺激机体免疫系统,使之达到防病的目的。 一、基因疫苗的免疫方法 基因疫苗的免疫方法即基因疫苗的给药途径,目前使用的方法有以下几种: 1)裸DNA直接注射:将裸质粒DNA直接注射到机体的肌肉、皮内、皮下、粘膜、静脉内。这种方法简单易行。 2)脂质体包裹DNA直接注射:包裹DNA的脂质体能与组织细胞发生膜融合,而将 DNA摄入,减少了核酸酶对DNA的破坏。注射途径同裸DNA直接注射。 3)金包被DNA基因枪轰击法:将质粒DNA包被在金微粒子表面,用基因枪使包被 DNA的金微粒子高速穿入组织细胞。 4)繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法:选择一种容易进入某组织器官的细菌,将其繁殖基因去掉,然后用质粒DNA转化细菌,当这些细菌进入某组织器官后,由于不能繁殖,则自身裂解而释放出质粒DNA。 二、基因疫苗的优越性与问题 基因疫苗被称之为第三代疫苗,自1993年问世后,在短短的5年中发展迅速。它与传统的疫苗相比,具有以下显著的优越性: 1) 抗原基因在体内持续表达产生抗原,不断刺激机体免疫系统产生长程免疫,免疫效果更可靠。 2) 对于易变异的病毒,可以选择各亚型共有的核心蛋白保守DNA序列作基因疫苗,产生跨株系的免疫保护反应,从而避免易变异病毒产生的免疫逃避问题。 3) 一个质粒可插入多个抗原基因,即组成多价基因疫苗,故一种基因疫苗可免疫多种疾病。 4) 基因疫苗具有减毒活疫苗的免疫原性,但不会存在活疫苗的毒力回升的危险。 5) 基因疫苗的质粒DNA无免疫原性,不会像重组疫苗那样诱发针对载体的自身免疫反应,故可重复使用。另外,基因还不会受机体已有抗体的影响,可用于带母体抗体的婴儿。 6) 对于毒性大、危险的病毒,以及难以提取抗原的疫苗,基因疫苗的制备相对安全,容易得多。 7) 基因疫苗制备简单,容易大量生产,且成本低。质粒DNA非常稳定,易于贮存和运输。 8) 使用方便,可以经多种途径给药,不需免疫佐剂等。 基因疫苗作为一类新型疫苗,还有一些方面不完善,在实际应用中还存在一些问题有待解决: 1) 安全性问题:基因疫苗一般不会整合到染色体基因组上,但不能排除少数质粒DNA 插入到染色体上,引起插入突变的可能性。不过目前的动物实验尚未发现发生插入突变的证据。 2) 免疫效率有种属个体差异:各动物之间的免疫效率不一样,这可能与不同动物细胞需要不同启动子有关。同种动物之间也有个体差异,免疫效率往往不能达到百分之百,这可能与抗原基因、给药方法途径、给药量有关。 3) 基因疫苗体内持续表达产生抗原蛋白,可能引发免疫耐受。 4) 基因疫苗的免疫应答机制仍不清楚。 三、基因疫苗的应用 基因疫苗目前主要应用于传统疫苗无法对付的病毒性疾病和恶性疾病,如艾滋病、乙型肝炎、癌症等疾病的治疗和预防。 1)病毒性疾病:世界上第一例基因疫苗是用于治疗艾滋病的HIV基因疫苗。1996 年批准在健康人身上进行预防艾滋病的基因疫苗的I期临床试验。流感病毒不同株间保守性抗原基因疫苗对不同株的流感病毒可产生抵抗力,以防止易变异流感病毒的免疫逃避。乙肝病毒表面抗原基因疫苗、包膜蛋白基因疫苗均可诱发机体产生免疫应答。基因疫苗还被用于其他病毒性疾病的预防,如单纯疱疹病毒 、狂犬病毒、丙肝病毒感染等。 2)癌症:有人用癌胚抗原基因疫苗诱导细胞毒性T淋巴细胞反应来治疗癌症。 Plautz等也将MHC-I抗原基因疫苗治疗腺癌或纤维肉瘤也引发了对肿瘤的细胞毒性作用。 3)免疫调节:在注射针对疾病的基因疫苗的同时,注射编码细胞因子或辅助因子的基因疫苗,有助于增强免疫应答,调节免疫反应方向或免疫反应类型。
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